血細胞參考測量實驗室質量控制人員比對實驗分析

陳微（通信作者），王會如，楊忠，康娟，宋偉，朱晉升

北京市醫療器械檢驗所·醫療器械檢驗與安全性評價北京市重點實驗室 （北京 101111）

CNAS-CL01：2018《檢測和校準實驗室能力認可準則》[1]規定質量控制的要求，質量控制是利用現代科學管理的方法和技術分析過程中的誤差，控制與分析有關的各個環節，確保實驗結果的準確可靠[2]。實驗室質量控制可分為外部質量控制和內部質量控制，實驗室外部質量控制一般通過實驗室間比對、能力驗證等方式進行，實驗室內部質量控制一般通過人員比對、不同方法比對、不同儀器比對、質量控制圖、回收實驗等方式進行[3]。

隨著我國科技的快速發展，對實驗人員的要求越來越高。為保障實驗室質量體系有效運行，確保數據結果的可追溯性，實驗人員的經驗和技能是首要影響因素，并關系到實驗室專業技術水平、質量水平，故人員能力建設是重要組成部分，需要推進、完善、提升。人員比對實驗是指在相同的環境條件下，采用相同的實驗方法、相同的儀器，由不同實驗人員對同一樣品進行的實驗[4]。采取人員比對的方式進行內部質量控制，不僅可提升實驗人員的操作能力，而且可使用比對數據縮小實驗人員數據結果的差異，發現存在的問題并進行糾正和改進。本研究通過對紅細胞和白細胞參考測量方法進行人員比對實驗，并對其結果進行分析評價，對于提高實驗人員的技術能力、為本實驗室的質量控制提供可靠的數據與依據具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 材料

樣本：選取15份新鮮血樣本，紅細胞要求正常范圍3.8×1012/L～5.8×1012/L，白細胞要求正常范圍3.5×109/L～9.5×109/L。

儀器與試劑：SYSMEX 半自動電阻抗粒子計數儀，乙二胺四乙酸二鉀（ethylene diamine tetraacetic acid-K2，EDTAK2）采血管，移液器（20、200、1 000 μl），容量瓶（100、1 000 ml），稀釋液，溶血劑。

1.2 方法

1.2.1 比對人員要求及比對頻次

本實驗室選取2名授權人員，工作滿8年并取得中級以上職稱資格；每半年進行1次內部比對考核。

1.2.2 實驗方法

每名比對人員按照WS/T 245-2005《紅細胞和白細胞計數參考方法》[5]操作。紅細胞計數：使用20 μl 移液器吸取新鮮血樣本，加入1 000 ml 容量瓶中，使其混合均勻，倒入稀釋杯中，根據半自動電阻抗粒子計數儀紅細胞操作規定得出該樣本中紅細胞個數。白細胞計數：使用200 μl 移液器吸取新鮮血樣本及1 000 μl 移液器吸取溶血劑，分別加入100 ml 容量瓶中，使其混合均勻，靜置15 min 后倒入稀釋杯中，根據半自動電阻抗粒子計數儀白細胞操作規定得出該樣本中白細胞個數。

1.3 評價方法

紅細胞和白細胞比對結果應符合本實驗室制定的作業指導書《參考測量項目人員間比對》規定要求，計算比對人員同一天紅細胞和白細胞樣本數值的平均值，將A 人員數據作為參考值，比對實驗結果按照公式（1）進行評價：

其中， xi為B 人員測定值，x 為A 人員參考值。

紅細胞2%、白細胞4%為《參考測量項目人員間比對》規定的相對允差。

2 結果與分析

2.1 結果

同一天使用3支新鮮血樣本，計算每3支樣本總平均值，由表1和表2可以看出，實驗人員比對項目數據結果的相對允差全部符合規定要求，保證了實驗過程和數據的可靠性、有效性，并發現具有提升空間。

表1 實驗數據比對結果匯總

表2 人員比對結果分析評價

2.2 實驗操作分析

（1）樣本：新鮮血樣本需在規定時間內完成實驗，放置時間越長，血液成分變化越大，越易影響數據結果。（2）儀器設備：儀器設備的參數和維護是保證結果可靠的關鍵，SYSMEX 半自動電阻抗粒子計數儀由廠家定期校準計數體積，每周使用質控物監測儀器的穩定性，并由授權專人進行該臺儀器的維護[6]。（3）人員：紅細胞和白細胞參考測量方法是一項細致的實驗工作[7]，需要高素質的專業技術人員及更多的經驗積累，個人在獨立完成操作的前提下，定期組織人員比對實驗確保其在規定范圍內，也是對實驗人員技術能力的監督。（4）其他：實驗過程中，環境的溫度和濕度相對恒定，樣本混勻程度和溶血時間等因素都會影響數據結果。

3 討論

人員比對是內部質量管理控制的方法之一，在實驗活動中實施內部質量控制和質量監督，采取糾正措施和預防措施持續改進管理體系，可提高實驗人員的技術水平及素質能力，其主要通過考核實驗結果的一致性來保證數據結果的可靠性和有效性[8]。如果實驗人員未經過專業的培訓和考核，不同實驗人員對同一實驗方法進行操作，得出的結果會有很大差異[9]。實驗人員嚴格按照內部制定的作業指導書及標準進行實驗，盡量減少環境設備等影響因素，可使內部質量得到有效控制；定期組織開展人員比對實驗，分析實驗人員之間的差異，可使其從自身分析過程中找出存在的問題。

總之，影響實驗工作準確性的因素有很多，為切實提升實驗室的能力，有效控制實驗室的內部質量，需通過人員比對及外部機構組織的能力驗證活動，了解真實水平，發現問題，并進行糾正和整改，才可有效達成目標[10]。