大黃藥用牙膏的制備工藝研究

王圓夢 王姿楊 高國香 劉廣義 張小榮 邵晶

摘要 [目的]篩選出大黃提取物制備藥用牙膏的最佳工藝。[方法]采用HPLC法測定大黃提取物中蒽醌類化合物的含量，以所加蒸餾水溫度、攪拌總時長、大黃提取物加入先后順序為制備工藝主要影響因素，考察不同工藝條件對大黃提取物牙膏感官性狀的影響。[結果]所測蒽醌類成分符合試驗要求。最終確定水溫50 ℃、攪拌15 min、大黃提取物預先與丙三醇混合的試驗工藝，方可使得膏體長時期穩定不變色。[結論]制備所得的大黃提取物藥用牙膏膏體細膩光亮、氣味清涼、黏稠度適中，制備工藝穩定可行。

關鍵詞 大黃提取物;藥用牙膏;制備工藝;高效液相色譜

中圖分類號 TQ658.41文獻標識碼 A

文章編號 0517-6611（2021）07-0177-03

Abstract [Objective]To screen out the best technology for preparing medicinal toothpaste with rhubarb extract.[Method]HPLC method was used to determine the content of anthraquinones in rhubarb extract.To investigate the effects of different technological conditions on the properties of rhubarb extract toothpaste based on three main factors： the temperature of distilled water，the total stirring time and the order of adding rhubarb extract.[Result]The anthraquinone components were in conformity with the experimental requirements.The technology of 50 ℃ water temperature，stirring for 15 min，rhubarb extract mixed with glycerol in advance was best for the paste to maintain stable and nondiscoloration for a long time.[Conclusion]The rhubarb extract toothpaste paste is fine and bright，with cool smell and moderate viscosity，and the technology is feasible.

Key words Rhubarb extract;Medicated toothpaste;Preparation technology;High performance liquid chromatography

作者簡介 王圓夢（1997—），男，甘肅禮縣人，碩士研究生，研究方向：藥用植物資源開發利用與保護。*通信作者，教授，博士，碩士生導師，從事中藥活性物質基礎與質量控制研究。

口腔是人類進食的器官，消化的起點，作為保衛人體健康的“門戶”顯得尤為重要。第四次全國口腔健康流行病學調查顯示97%成人罹患口腔疾病。當今時代，社會生活節奏加快，高強度的工作以及巨大的生活壓力使得人們在飲食上更加青睞于辛辣刺激、方便速食，尤其是我國國民普遍喜食火鍋、燒烤類食物，長此以往便會給身體積累出現各種各樣的隱患。生活中常見由于胃火上炎導致的口腔炎癥及潰瘍，降低生活質量，且長期的口腔潰瘍是導致口腔癌的主要原因之一[1]。醫學研究發現，口腔疾病不僅影響口腔健康，還與癌癥、慢性呼吸道疾病、心血管疾病和糖尿病等全身系統性疾病的發生關系密切[2]。因此，口腔健康應該受到人們的關注。

大黃為傳統中藥材，其主要來源于蓼科植物掌葉大黃（Rheum palmatum L.）、唐古特大黃（Rheum tanguticum Maxim.ex Balf.）或藥用大黃（Rheum officinale Baill.）的干燥根和根莖[3-4]，具有祛熱利瀉、行瘀通經等功效。大黃主要含有大黃素、大黃酸、蘆薈大黃素等蒽醌類成分及以番瀉苷為代表的雙蒽醌類成分。現代研究表明，大黃中的蒽醌類成分具有抗炎、抑菌、止血、抗氧化等功效。大黃提取液具有抑制牙釉質脫礦的作用，可以減緩牙齒外層牙釉質的溶解[5];大黃素對多種致病菌有抑制作用，且同時具有抗氧化性，對牙周局部有免疫抑制，對于治療牙周炎具有較好的作用[6]，也有研究者將大黃素制成口腔用品的相關報道。筆者以大黃提取物為原料，以提取物中蒽醌類物質含量為指標，探究不同輔料及制備工藝對于大黃藥用牙膏感官性狀的影響，以優選其制備工藝，為大黃提取物制備中藥藥用牙膏的可行性提供參考依據。

1 材料與方法

1.1 儀器與設備 LC-16型島津高效液相色譜儀（中國島津蘇州有限公司）;HH-601型水浴鍋（金壇市恒豐儀器廠）;DZF-6020真空干燥箱（上海博訊實業有限公司醫療設備廠）;102電熱鼓風干燥箱（龍口市先科儀器公司）;BS-110S電子天平（北京賽多利斯儀器系統有限公司）;KQ-500DE超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）;SY-5000旋轉蒸發器（上海亞榮生化儀器廠）。

1.2 試材與試劑 對照品蘆薈大黃素（T28D6F8264）、大黃酸（T30A8F42628）、大黃素（C18F8Q29652）、大黃酚（T24J10F93796）、大黃素甲醚（T09M9F55482）均由上海源葉生物科技有限公司提供。十二烷基硫酸鈉（H0218）、丙三醇、碳酸鈣（H00389）均由天津大茂化學試劑廠提供。糖精鈉（S817755-01）、L-薄荷醇（S817756-01）均由上海麥克林生化科技有限公司提供。甲醇為色譜純，水為純凈水;其他試劑均為分析純。試驗用藥材大黃購自甘肅奮力達儀器有限公司，經甘肅中醫藥大學晉玲教授鑒定為蓼科植物掌葉大黃（Rheum palmatum L.）的干燥根。

1.3 大黃提取物的制備及質量評價

1.3.1 大黃提取物的制備。取4份干燥大黃藥材，每份150 g，加8倍量無水乙醇，于室溫浸漬12 h，后80 ℃水浴回流提取2 h，濾過，藥材殘渣再加6倍量無水乙醇80 ℃水浴回流提取1 h，濾過，70 ℃水浴減壓回收乙醇，所得糖漿狀物置于烘箱內，60 ℃減壓干燥，得膨松狀干燥物，研磨成粉，裝于密封袋內，于冰箱中儲存待用。

1.3.2 大黃提取物中蒽醌類化合物的含量測定。

1.3.2.1 色譜條件[7]。Agilent HC-C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以甲醇-0.1%磷酸溶液（85∶15）為流動相;檢測波長254 nm。柱溫30 ℃;流速1.0 mL/min。

1.3.2.2 對照品溶液的制備。精密稱取大黃酚、蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素和大黃素甲醚對照品各適量，置于10 mL容量瓶中，于室溫加甲醇振搖溶解，并定容至刻度，得到混合對照品溶液的濃度分別為132、24、88、41、61 μg/mL。

1.3.2.3 供試品溶液的制備。取“1.3.1”項下制得的浸膏粉0.701 2 g，置于具塞錐形瓶內，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，水浴回流60 min，冷卻至室溫后再次稱重，用甲醇補足缺失的重量，搖勻，過濾，移取續濾液5 mL于燒瓶中，水浴揮干溶劑，加8%鹽酸溶液10 mL，超聲溶解，再加入10 mL三氯甲烷，水浴回流提取60 min，冷卻至室溫后，倒入分液漏斗中，加入三氯甲烷萃取3次，每次10 mL，收集合并萃取液，減壓回收三氯甲烷至小體積，水浴揮干，殘渣用甲醇溶解至10 mL容量瓶中，并定容至刻度線，搖勻，過微孔濾膜，取續濾液，即得。

1.3.2.4 線性關系的考察。混合對照品溶液經微孔濾膜過濾后，移至進樣瓶中，按“1.3.2.1”色譜條件，分別進樣5、10、15、20、25、30 μL，用高效液相色譜儀進行測定，對比各成分的出峰位置并記錄峰面積，以進樣濃度X（μg/mL）為橫坐標、峰面積Y為縱坐標繪制標準曲線，計算得出線性回歸方程。

1.3.2.5 大黃提取物中各蒽醌類成分含量測定。分別精密吸取供試品溶液20 μL，按“1.3.2.1”色譜條件進行檢測，對比各成分的出峰位置并記錄峰面積，分別帶入回歸方程計算，最終得到4份樣品中各成分的平均質量分數。

1.4 大黃藥用牙膏的制備工藝研究

1.4.1 輔料的篩選。通過參考文獻資料，藥用牙膏常用的主要輔料有：摩擦劑用碳酸鈣、磷酸氫鈣，增稠劑用羧甲基纖維素鈉（CMC-Na）、黃原膠，發泡劑用十二烷基硫酸鈉，保濕劑用丙三醇，防腐劑用苯甲酸鈉，甜味劑用糖精鈉，香料用L-薄荷醇。按照試驗目的，通過預試驗篩選剔除部分輔料。

1.4.2 成型工藝。將糖精鈉、苯甲酸鈉等水溶性原料用蒸餾水溶解，作為預混合物1;取CMC-Na快速攪拌下分散在丙三醇中，作為預混合物2;稱取碳酸鈣、十二烷基硫酸鈉等混合研磨，作為預混合物3;將蒸餾水加入到燒杯中，加入預混合物1、預混合物2，快速攪拌，待混合液稀稠，加入預混合物3繼續攪拌，加入香精，高速攪拌一定時間，最后膏體用復合軟管包裝。通過預試驗研究發現，影響牙膏成型的因素主要為加入蒸餾水的溫度、攪拌總時長、大黃提取物加入的先后步驟等，因此試驗設9個制備工藝條件如表1所示，調整水溫、攪拌時長、大黃提取物的加入步驟，制備出大黃提取物牙膏。

1.4.3 品質評價。以牙膏的外觀、拉絲現象為指標，采用感官評價法進行評價[8]。

2 結果與分析

2.1 線性關系的考察 按“1.3.2.4”方法操作，以進樣濃度X（μg/mL）為橫坐標、峰面積Y為縱坐標繪制標準曲線，計算得出各成分的線性回歸方程和線性范圍如表2所示。結果表明，蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚5種蒽醌類成分分別在0.120～0.720、0.440～2.640、0.205～1230、0.660～3.960、0.305～1.830 μg/mL線性關系良好，相關系數r均為1.000 0。

2.2 大黃提取物中各蒽醌類成分含量測定 按“1.3.2.5”方法操作，得到4份樣品中各成分的平均質量分數見表3。結果顯示，大黃提取物中以蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚和大黃素甲醚總量計，總蒽醌含量平均為56.38 mg/g。

2.3 大黃藥用牙膏的制備工藝研究

2.3.1 輔料的篩選。按“1.4.1”方法操作，最終確定大黃藥用牙膏的配方如表4所示。

2.3.2 成型工藝條件的篩選。由表5可知，牙膏的外觀受所加入溶液溫度的影響最大，其次是攪拌時間，這與最終膏體是否均勻黏稠有關;大黃提取物加入的先后順序對膏體儲存過程中顏色的變化影響最大。最終確定水溫50 ℃、攪拌15 min、大黃提取物預先與丙三醇混合的試驗工藝，所得膏體細膩均勻、氣味清涼、口感舒適。

3 討論與結論

目前牙周病在世界范圍都非常普遍，多集中在成年人群。對于細菌性疾病，醫療衛生領域多采用抗生素等易產生耐藥性的治療方法。而中草藥牙膏可避免細菌的耐藥性，給口腔健康更有效的保護。大黃在口腔健康上發揮的作用主要與其抗炎、抑菌、止血、抗氧化功效相關。蔡秀紅等[9]取大黃9 g，煎取藥液300 mL，漱口1～2 min后吐掉，每天4～6次的方法用于治療過量食用煎炒辛辣食物引發的口腔潰瘍，并收錄入由國家中醫藥管理局主管的《中國民間療法》中“口腔潰瘍民間療法”項下。筆者通過對大黃活性成分治療口腔疾病的相關文獻分析，結果顯示大黃提取物對牙周炎等口腔疾病有一定的抑制和組織修復作用。現代藥理學研究顯示，大黃素、蘆薈大黃素均具有抑菌消炎作用，其中大黃素具有廣譜抑菌作用，對金黃色葡萄球菌不易產生耐藥性，對鏈球菌亦很敏感，其次對肺炎雙球菌、鏈球菌、白喉桿菌、枯草桿菌、炭疽桿菌、痢疾桿菌、傷寒桿菌、霍亂弧菌及多種常見的致病性真菌均有較強的抗菌作用。郭陽等[6]通過小鼠試驗探討了大黃素對于牙周炎的抗氧化作用，結果顯示大黃素可以顯著提高超氧化合物歧化酶（SOD）活性，降低血清中丙二醛（MDA）含量，同時刺激谷胱甘肽過氧化酶的活性，給促進牙周組織恢復帶來了福音。鞣質是大黃止血的重要活性成分，此外，大黃鞣質還對組織損傷具有保護作用[10]，對牙齦出血有一定作用。因而，大黃提取物制備的藥用牙膏應該具有一定的市場推廣價值。