結直腸癌與WWOX基因相關性的Meta分析

王金玉 張茂 劉鵬程

[摘要]目的：系統評價結直腸癌的發生發展與包含WW的氧化還原酶結構域（WWOX）表達的關系及其對腫瘤的影響。方法：檢索Embase、中國知網、PubMed、萬方數據庫以及維普數據庫中關于結直腸癌與WWOX表達關系的對照研究的文獻，采用95%置信區間（CI）和優勢比（OR）為效應指標，應用RevMan.5.3軟件對符合條件的結果進行Meta分析。結果：最終納入5篇符合條件的文獻，Meta分析結果示：WWOX基因在結直腸癌與癌旁組織中表達差異（OR=0.11，95%CI0.07～0.17，P<0.01），有無淋巴結轉移中WWOX基因的表達差異（OR=0.19，95%CI.0.12～0.30，P<0.01），不同分化程度中WWOX基因表達差異（OR=4.63，95%CI.2.93～7.32，P<0.01）。結論：在結直腸癌的發生發展中，可認定有WWOX基因的參與，歸納分析WWOX基因與結直腸癌的相關性，有助于更好地在臨床中診治及預防結直腸癌。

[關鍵詞]WWOX基因;結直腸癌;Meta分析：相關性

[中圖分類號]R735.3+7.

[文獻標識碼]A.

[文章編號]2096-5249（2022）03-0007-04

在全球范圍內，結直腸癌是癌癥相關死亡的主要原因之一，其在男性中死亡率排名第二，女性中排名第三[1]。在我國，近幾年中結直腸癌的發病率也在逐漸上升，原發性和轉移性結直腸癌的新療法已經出現，為患者提供了更多的選擇;這些治療包括腹腔鏡手術治療原發性疾病、更積極地切除轉移性疾病（如肝和肺轉移）、直腸癌放療以及新輔助和姑息性化療。然而，雖說上述治療方案在結直腸癌的臨床治療中是較為有效的措施，可延長生存期，使患者的生存質量有一定程度改善，但仍然無法提高患者的5年生存率。

含有人類WW結構域的氧化還原酶（WWOX）基因位點位于16號染色體上的一個常見脆性位點（CFS）FRA16D（16q23.1-q23.2）。該基因跨越1.1Mbp，是人類基因組中最長的基因之一。其由兩個N端WW域和一個C端短鏈脫氫酶/還原酶域組成。第一個WW結構域（WW1）通過與富含脯氨酸的PPXY（P是脯氨酸，X是任何氨基酸，Y是酪氨酸）基序的伙伴蛋白結合而參與蛋白質-蛋白質相互作用，并充當調節其定位、反式激活和穩定性的銜接蛋白，從而影響正常生理和發育。WWOX共包含有9個外顯子，其在基因庫中的編號為51741。WWOX基因的WW功能域有1～4外顯子編碼，外顯子5～8編碼的則是位于WWOX中心部位的氧化還原酶功能域。其在2000年發現后不久，WWOX就被譽為腫瘤抑制基因。在隨后幾年的研究中，這一功能得到了無可爭議的證實。大多數腫瘤表現出高雜合性丟失率和WWOX表達降低。新近的研究發現在HCT116結腸癌細胞系的FRA16D處發現了一組復雜的缺失，負責去除WWOX基因的片段，證明WWOX也參與結直腸癌的發生發展。

因此，為進一步了解結直腸癌的發生、發展與抑癌基因WWOX表達程度的相關性，本文將對既往關于WWOX基因與結直腸癌發生發展關系相關文章的研究結果采用Meta分析進行定量分析，為診斷、治療結直腸癌提供新的方法。

1材料與方法

1.1資料來源

檢索Embase、PubMed、中國知網、萬方數據庫以及維普數據庫中有關WWOX基因與結直腸癌關系的中外文獻。中文檢索詞為：“WW的氧化還原酶結構域”或“WWOX”，“結直腸癌”或“結腸癌”或“直腸癌”或“直腸腺癌”或“乙狀結腸癌”。英文檢索詞為：“OxidoreductasedomaincontainingWW”OR“WWdomain containing oxidoreductase”OR“WWOX”OR“Coloncancer”OR“colorectal cancer、rectal can-cer”OR“Adenocarcinoma of rectum”OR“Sigmoid colon cancer”OR“CRC”。由兩位研究員對檢索結果進行評閱，第三方僅在不確定或存在爭議時進行評定。

納入標準：（1）具有完整臨床病理資料，病理回報為結直腸癌，無放化療于術前;（2）以病例對照研究為研究方法;（3）以中、英文文獻為研究對象;（4）能夠提供陽性表達的例數的原始數據;（5）各篇文獻均是關于結直腸癌與WWOX基因表達之間的研究。

排除標準：（1）綜述、動物研究、評述類文獻等;（2）文獻未能獲取全文;（3）無法提供完整數據以及重復發表的數據;（4）未設立對照組的研究。

1.2數據提取

基于上述標準對數據進行提取，內容包括：第一作者姓名、發表時間、國籍、研究例數、WWOX基因在結直腸癌組織及癌旁組織中陽性表達例數，有無淋巴結轉移時WWOX表達例數以及不同分化程度下WWOX基因表達陽性例數。其中，兩名研究員對所納入的數據進行提取，若兩名研究員對所提取的數據意見不同時，由第三名研究員共同討論決定。

1.3數據統計

采用RevMan5.3軟件，對結直腸癌及WWOX基因表達的關系進行統計分析以優勢比及其95%可信區間的二分變量作為效應量。采用固定效應模型，存在同質性于各篇文獻之間（P>0.05，I2<50%）。用隨機效應模型：文獻之間具有異質性（P<0.05，I2≥50%），即對根據臨床判斷有合并意義，可進行合并的數據進行合并。尋找統計學異質性來源則借用敏感性分析來評價結果的穩定性實現。如無法判斷，則采用描述性分析。森林圖展現Meta分析的結果，文獻潛在的發表偏倚通過漏斗圖進行觀察（由RevMan5.3軟件生成）。

2結果

檢索數據庫，通過閱讀題目、摘要、去除重復文獻等方法將檢索到的70篇文獻去除59篇，后排除6篇未提供詳細數據的文獻，最終納入Meta分析的有5篇[2-6]，納入文獻特征見表1，所收集的文獻研究均出自中國。

2.1WWOX基因與結直腸癌組織及癌旁組織相關性

分析WWOX表達在結直腸癌及癌旁組織中的差異，納入的5篇文獻中均有報告，其中結直腸癌組織的陽性表達共141例，癌旁組織中有193例陽性表達，分析結果提示無統計學異質性（P=0.66，I2=0）。Meta分析采取固定效應模型進行。結果顯示，在結直腸癌組織與癌旁組織WWOX表達差異有統計學意義（OR=0.11，95%CI0.07～0.17，P<0.01），見圖1。

2.2WWOX表達情況與結直腸癌分化程度關系的分析結果

納入的5篇文獻均有WWOX表達與結直腸癌分化關系，其中111例患者為高/中分化，30例患者為低分化。不存在統計學異質性（P=0.94，I2=0）。采用固定效應模型，分析結果示（OR=4.63，95%CI2.93～7.32，P<0.01），差異具有統計學意義，見圖2。

2.3WWOX表達情況與淋巴結轉移關系的分析結果

納入的5篇文獻均有WWOX表達與淋巴結轉移的關系，其中有淋巴結轉移共32例，無淋巴結轉移的共109例。無統計學異質性存在（P=0.99，I2=0）。采用固定效應模型，結果顯示各組件差異具有統計學意義（OR=0.19，95%CI0.12～0.30，P<0.01），見圖3。

2.4發表偏倚

對納入的所有文獻中，通過繪制漏斗圖進而了解本冊Meta分析有無發表偏倚，由圖可知，所繪制的圖形基本對稱（采用Revman5.3軟件繪制），說明無明顯發表偏倚，見圖4。

3討論

我國的消化道惡性腫瘤中，結直腸癌的發病率一直位居前列，且正呈現出一種逐年遞增的趨勢。結直腸癌的發病原因未能徹底明確，僅了解其發生發展與遺傳、環境等方面的因素有關，并且在癌癥的形成過程中還涉及到許多諸如癌基因激活，抑癌基因失活等誘發細胞生物學改變的過程，各種癌基因與抑癌基因互相協同，相互作用，共同參與腫瘤的發生與發展。現在有大量數據支持WWOX在癌癥生物學中的作用，包括觀察到WWOX的丟失或減弱發生在許多人類惡性腫瘤中，包括骨腫瘤、乳腺癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、胰腺癌和許多血液疾病[7-8]。WWOX的基因組定位使得該基因座容易受到基因雜合性丟失（LOH）或純合缺失的影響，從而導致基因表達降低。或者，其他表觀遺傳和遺傳因素在沉默WWOX表達中起作用。在眾多結直腸癌的研究當下，WWOX表達在癌組織中表達通常會減低，這可能與WWOX基因同源性缺失的機制相關[9-11]。在結直腸癌HCT1116細胞系中存在的堿基同源性改變多達25～50個，例如導致WWOX轉錄本表達降低是與通過使WWOX的一個等位基因外顯子6～8去除的雜合子缺失有關[12-15]。

通過本次Meta分析所納入的5篇文獻研究結果表明，在結直腸癌組織中WWOX表達較癌旁組織明顯降低，研究結果顯示，在結直腸癌中合并（OR=0.11，P<0.01），差異具有統計學意義，提示WWOX表達降低可能與結直腸癌的發生發展有關。在與結直腸癌分化程度研究中合并（OR=4.63，P<0.01），在有無淋巴結轉移關系研究中合并（OR=0.19，P<0.05），上述研究差異均有統計學意義，表明隨著WWOX基因陽性表達率降低，結直腸癌分化程度越低，淋巴結轉移可能增大。

然而，本研究仍有一定局限性。首先，本次Meta分析納入文獻數量較少;其次，本次研究僅以中英文為本研究語種，尾隨其他語種的相關資料進行研究，使資料全面性不全。以上局限性可能會使結論的證據強度受到一定影響。

根據本次課題研究結果，證明抑癌基因WWOX對結直腸惡性腫瘤的發生發展具有一定的抑制作用，但上述結論僅僅局限于META分析，如何將抑癌基因WWOX運用于臨床，從而更好的診斷與治療結直腸癌是目前需要側重考慮的問題。除此之外，對于WWOX在各種癌癥中的表達差異是否具有特異性，以及表達過程中是否有其他因素參與以及表達受何種因素影響，目前仍然需要進一步研究。不同于P53、PTEN等研究較為深入的基因[16]，WWOX對于腫瘤方面的研究目前國內外較少，就目前所有的研究結果來看，對于WWOX在腫瘤發生發展中的詳細作用以及對腫瘤患者預后的影響情況僅僅知識冰山一角，需要人們繼續不斷的研究。

通過本次分析研究，WWOX作為抑癌基因可以抑制結直腸癌的發生發展，當其表達降低時，可導致結直腸癌的發生，并且加速結直腸癌的浸潤以及轉移，這為結直腸癌的診斷與治療提供了一定的幫助。因此，進一步檢測、分析與研究WWOX基因，將對結直腸癌的發生發展機制有更進一步的了解，對于結直腸癌的預防及治療將提供更加堅實可靠的理論基礎。

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（收稿日期：2021-10-26）