液相色譜法測定餅干、派、面包等食品中安賽蜜的含量

趙迪

摘 要：目的：建立一種高效液相色譜法檢測保定市在售餅干、面包、派等食品中安賽蜜的方法，監測食品安全風險，保證消費品安全。方法：采用C18反相色譜柱，二極管陣列檢測器，以0.02 mol·L-1乙酸銨溶液∶甲醇=95∶5（V∶V）為流動相，檢測波長225 nm，流速1.0 mL·min-1，溫度28.1 ℃，檢測環境濕度58%，以水為提取溶劑超聲波多次提取安賽蜜，加入沉淀劑去除提取液中雜質，進樣量5 μL，上機測定安賽蜜含量。結果：共檢測了27份樣品，最低檢出限為0.001 μg·mL-1，相對標準偏差為0.45%，樣品回收率在95%以上，超標數0，合格率100%。結論：本方法操作簡單、快捷、準確率較高，適合餅干、面包、派等烘焙食品中安賽蜜含量的監測。

關鍵詞：安賽蜜；高效液相色譜；食品添加劑

Abstract： Objective： To establish a high performance liquid chromatography method for the detection of acesulfame potassium in biscuits， bread， pie and other foods sold in Baoding city， so as to monitor food safety risks and ensure the safety of consumer products. Method：The analysis was performed on a C18 reversed-phase column with diode array detector. The mobile phase was 0.02 mol·L-1 ammonium acetate solution∶methanol =95∶5?（V∶V）. The detection wavelength was 225 nm， the flow rate was 1.0 mL·min-1， the temperature was 28.1 ℃， and?the humidity was 58%. The acesulfame potassium was extracted by ultrasonic with water as the extraction solvent. The precipitant was added to remove the impurities in the extract. The injection volume was 5 μL， and the content of acesulfame potassium was determined by machine. Result： A total of 27 samples were tested， with a minimum detection limit of 0.001 μg·mL-1， a relative standard deviation of 0.45%， and sample recovery rate above 95%， exceed the standard 0， qualified rate 100%. Conclusion： This method is simple and fast to operate， and has high accuracy. It is suitable for monitoring acesulfame potassium content in biscuits， bread， pie and other?baked goods.

Keywords： acesulfame potassium; high performance liquid chromatography; food additive

餅干、面包、派等食品的基本原料是面粉、酵母、食鹽、飲用水和白砂糖，再添加適量牛奶、蛋產品、色素和甜味劑等烘焙而成。烘焙食品營養豐富，色香味俱佳，不僅可以作為主要食物，也可以作為甜品點心，還能夠作為饋贈親朋好友的禮品。烘焙類食品作為生活不可或缺的一部分，消費水平已經超過了傳統米面制品。隨著生活水平的提高，食品的消費將保持穩定的水平。相關數據統計，我國烘焙類食品行業在2006—2010年，資產總額、銷售收入的年均增長速度均保持在21%以上，2010年全年烘焙類食品的銷售收入超過1 100億元。

安賽蜜（乙酰磺酸鉀）是一種食品添加劑，和糖精（鄰苯甲酰磺酰亞胺）相似，甜度較高，被認為是最有前途的甜味劑之一。安賽蜜作為非營養型甜味劑，不參加新陳代謝，不為機體提供能量，具有口感好、無熱量、不代謝、不吸收、無致齲齒性、耐熱和耐酸等優點[1]。因此，安賽蜜在1992年就被國家衛生部允許應用于餐飲領域。乙酰磺酸鉀是目前世界上第4代人工合成的甜味劑，生產工藝簡單、價格比較便宜，食品生產者遵守相關規定，嚴格按照標準添加安賽蜜，不會影響食用人群的身體健康，部分食品生產企業在達到預期效果的前提下可能會提高安賽蜜在食品中的含量，機體長期攝入安賽蜜類甜味劑，會嚴重損害肝臟的生理功能，對神經系統也有嚴重的影響，老、幼、孕等特殊人群受到的危害尤為嚴重。為了杜絕超標和超范圍使用安賽蜜的食品進入市場，對消費者健康造成影響，我國對安賽蜜在食品中加入的含量作了嚴格規定[2]。安賽蜜最低檢出限0.001 g·kg-1，面包糕點食品中最高允許添加量0.3 g·kg-1，不得超標使用[3]。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

LC-20A島津液相色譜儀配置紫外檢測器（濟南捷島分析儀器有限公司）；SK-1渦旋振蕩器（常州國華電器有限公司）；TG16-WS高速離心機（湘儀離心機有限公司）；KQ-600E超聲波清洗器（武漢華科達實驗社貝有限公司）；PL202-S分析天平（深圳時代之峰有限公司）。C2H3N（色譜純）；KH2PO4（分析純）；冰乙酸（優級純）；超純水；乙酸鋅；亞鐵氰化鉀；安賽蜜標準儲備液；磷酸二氫鉀溶液（20 mmoL·L-1）：2.72 g無水磷酸二氫鉀，用水定容至1 L。

1.2 試驗方法

1.2.1 色譜條件

色譜柱：YWG-C18（4.6 mm×250 mm，10 μm）；流動相：0.02 moL·L-1乙酸銨溶液∶甲醇=95∶5（V∶V）；流速：1 mL·min-1；檢測波長：225 nm。

1.2.2 方法優化

餅干、面包類食品的成分比較復雜，脂質、蛋白質等會影響安賽蜜的檢測效果。因此，在樣品前處理過程中需要除去干擾物質，選用乙酸鋅和亞鐵氰化鉀作為沉淀劑，不僅能夠完全除去干擾物質，還不干擾安賽蜜的檢測，且容易通過過濾法除去雜質[4]。20 ℃安賽蜜在水中的溶解度為270 g·L-1，微溶于酒精等有機溶劑[2]。超聲提取法能加快分子運動，加大固體和液體之間的接觸面積，使待測組分脫附和溶解速度加快，提取的速度也更快，提取更完全[2]。已有試驗證實使用純水作為安賽蜜的提取溶劑，超聲提取30 min以上，安賽蜜的加標回收率95.0%～98.9%，效果較理想[5]。

1.2.3 樣品處理

準確稱取樣品10.0 g于50 mL比色管中，用蒸餾水定容，渦旋振蕩器振蕩1 min后置于超聲波清洗器中超聲提取15 min，然后高速離心機5 000 r·min-1離心10 min，最后取上清液于50 mL容量瓶，加水定容，0.45 μm濾膜過濾，等待測定[4]。根據安賽蜜的保留時間、特征光譜定性，采用外標法定量[6]。檢測樣品，做加標回收試驗，取10%的樣品進行平行樣品檢測[4]。

2 結果與分析

2.1 線性范圍

用純水對安賽蜜標準溶液進行稀釋，配制濃度為0.500 μg·mL-1、2.500 μg·mL-1、5.000 μg·mL-1和12.500 μg·mL-1（現用現配）的標準系列溶液進行測定，以安賽蜜的保留時間定性分析，以測得的峰面積、安賽蜜質量濃度（μg·mL-1）繪制標準工作曲線[4]。按10%的比例取平行樣進行檢測，得y=33 072x+66.468 6，相關系數R2=0.999 9，結果見表1[3]。

2.2 精確度試驗

取1份不含安賽蜜的空白樣品做6次平行測定，相對標準偏差為0.45%，見表2。

2.3 加標回收試驗

隨機稱取2份樣品，質量均為5.00 g，編號1、2，加標安賽蜜標準溶液1 μg，按1.2.3方法計算回收率，具體測定結果見表3。

2.4 最低檢出限

取安賽蜜5.0 g，定容至50 mL，進樣5 μL，按S/N=3計算，最低檢出限為0.001 μg·mL-1，符合實驗要求。

2.5 樣品檢測結果

本次實驗檢測樣品共27份，安賽蜜的檢出值均低于0.001 g·kg-1，結果見表4。

3 結論

隨著生活水平的提高，人們的食品安全意識不斷提高。本文采用高效液相色譜法對保定市在售餅干、派、面包等食品中的安賽蜜含量進行了檢測，使用C18反相色譜柱作為分離柱，以0.02 mol·L-1乙酸銨溶液∶甲醇=95∶5（V∶V）為流動相，檢測波長225 nm，流速1.0 mL·min-1。樣品處理以水作為提取溶劑，超聲波振蕩，加入沉淀劑去除提取液中雜質，操作簡便易行。此次共檢測了27份樣品，安賽蜜的最低檢出限為0.001 μg·mL-1，樣品回收率在95%以上，合格率100%。結果表明，本方法操作簡便易行、準確率高，適合用于檢測餅干、面包等烘焙食品中安賽蜜的含量，對于餅干類食品生產企業和各級食品監督單位開展糕點類食品中安賽蜜的檢測有較好的適用性。

參考文獻

[1]姜彬，馮志彪.甜味劑發展概況[J].食品科技，2006，31（1）：71-74.

[2]白靜.高效液相色譜法測定食品中的安賽蜜[J].食品科學，2011，32（16）：245-248.

[3]王林裴，周迎春，鄭亞哲，等.高效液相色譜法同時測定飲料中的5種添加劑[J].農產品加工，2019（11）：50-54.

[4]鄧明娟，金曼麗，邱理，等.10%啶蟲脒·唑蟲酰胺乳油的高效液相色譜分析[J].化工技術與開發，2018，47（1）：50-52.

[5]汪元亮，熊馬劍，左軍鳳，等.高效液相色譜法測定多種硫化體系藥用橡膠制品中游離硫含量[J].藥品評價，2021，18（9）：524-527.

[6]丁磊.堅果與炒貨食品中抗氧化劑的測定方法研究：高效液相色譜法[D].合肥：安徽大學，2010.