安胎顆粒質量標準研究

【中圖分類號】R286 【文獻標志碼】A 【文章編號】1007-8517（2025）10-0057-06

DOI： 10.3969/j . issn.1007 -8517. 2025.10. zgmzmjyyzz202510011

Study onQuality Standard of Antai Granules

YE Wenqi1XU Dinghao2 1.Zhejiang Research Institute of Traditional Chinese Medicine，Hangzhou 31Oo23，China; 2.Biological science College of Life Science Tianjin University，Tianjin 3OoO72，China

Abstract：ObjectiveTobuildthemethodforqualitycontrolofAntaiGranules.MethodsTLCmethodwasused toidentifyAstragaliRadix，AsiniCoriiColla，PaeoniaeRadixlbaandDipsaciRadixinthepreparation.The DiaponinsVwasdeterminedwith the wavelengths of 212nm ，Agilent EC-C₁₈ column （ 150mm×4.6mm ， 4μm ），mobile phase of acetonitrile-water（26：74）， the column temperature 3O degrees centigrade，the flow rate of 1.0mL per minute and the injection volume of 10μL Results TLC spotswereclear，egativeandnoterference，AstragaliRadix，AsiniCori Coll，PaeonaeRadixlbaandDipsaciRadixwef tively identified.Diaponins Vwas in a good linear relationship in the range of O.4802＼～9. 6045μg （ r=0 .9997），The average recovery rates was 99.8% and RSD was 2.7% . Conclusion This method is efficient and accurate，can be applied to the quality control of Antai Granules.

Keywords：AntaiGranules；DiaponinsVI；Quality Standard;HPLC

安胎顆粒為醫院制劑，源自婦科臨床經驗方“安胎飲”，由苧麻根、黃芩、酒白芍、枸杞子、麩炒白術、菟絲子、炒黃芪、阿膠珠、續斷片等16味中藥組成，具有益氣健脾，補腎安胎的功效，臨床主要用來治療先兆流產、胎動不安[1]。本研究采用薄層色譜法建立炒黃芪、酒白芍、阿膠珠、黃芩的定性鑒別方法，采用HPLC法測定川續斷皂苷VI的含量[2-5]，為該制劑的質量控制和標準提供參考和依據。

1儀器與試藥

ME204-E電子分析天平（瑞士梅特勒公司），G型薄層層析硅膠板（青島海洋化工），高效液相色譜系統（美國Agilent1260、日本島津LC2030C-3Dplus）。對照品見表1，均為中國食品藥品檢定研究院購入。

HPLC乙腈（TEDIA），AR甲醇（成都科隆），實驗室自制超純水，安胎顆粒（批號：S1、S2、S3、S4；規格： 10g/ 袋）。

2方法與結果

2.1薄層鑒別取安胎顆粒樣品研細后均照TLC色譜法（《中國藥典》2020版四部通則0502）項下試驗，比較供試品色譜與對照品色譜相應的位置上的對應及陰性樣品有無干擾。

2.1.1炒黃芪的鑒別供試品溶液制備：取 加甲醇 50mL ，超聲處理 30min ，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加 20mL 水溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2次，每次 20mL ，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次[6-7]，每次 20mL ，棄去氨試液，再用正丁醇飽和水 20mL 洗滌，保留正丁醇液蒸干，殘渣加 80% 甲醇 1mL 使溶解，即得。對照品溶液： 0.5mg/mL 黃芪甲苷溶液， 80% 甲醇作溶劑。色譜條件及結果：缺炒黃芪陰性樣品無干擾（見表2，如圖1所示）。

2.1.2阿膠珠的鑒別供試品溶液制備：取 置厭氧瓶中，加入 25mL 濃度 3mol/L 的鹽酸溶液，攪拌均勻后加蓋密封，置烘箱中加熱 6h ，烘箱溫度為 105C ，放冷，濾過，再加水 30mL 蕩洗，殘渣濾過并人濾液，濾液加氫氧化鈉飽和液調節 pH5～6 ，加熱濃縮至 5～10mL ，加于732強酸苯乙烯陽離子交換樹脂柱（柱長 16cm ，內徑1.5cm ，需前處理）上[10]，加水 100mL 洗脫，棄去洗脫液，用 3% 的氨溶液 10mL 洗脫，收集中性及酸性的洗脫液，蒸干，殘渣用 50% 乙醇 1mL 使溶解，即得。對照品溶液： 1mg/1mL 甘氨酸溶液，溶劑為 50% 乙醇[11-13]。色譜條件及結果：缺阿膠珠陰性樣品無干擾（見表3，如圖2）。

1、2為缺阿膠珠陰性樣品，點樣量分別為 10μL 、 15μL 3、4、5為安胎顆粒，點樣量分別為 5μL ， 10μL ， 15μL 6為甘氨酸對照品，點樣量 1μL

2.1.3酒白芍的鑒別供試品溶液制備：取 ，置圓底燒瓶中，加乙醇 10mL 浸潤，再加乙酸乙酯50mL ，加熱回流 30min ，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加乙醇 1mL 使溶解，加于中性氧化鋁柱（ 100～200 目， 3g ，內徑 1.5cm ）上[14]，用50mL乙醇洗脫，收集洗脫液，濃縮至 1mL ，即得。對照品溶液： 1mg/mL 芍藥昔溶液，溶劑為乙醇。色譜條件及結果：缺酒白芍陰性樣品無干擾（見表4，如圖3所示）。

2.1.4黃芩的鑒別供試品溶液制備：取約 5g 置圓底燒瓶中，加入 30mL 乙酸乙酯-甲醇（3：1）的混合溶液，加熱回流 30min ，放冷，濾過，濾液蒸干，殘渣加甲醇 1mL 使溶解，即得[15]。對照品溶液： 1mg/mL 黃芩苷溶液，溶劑為甲醇。色譜條件及結果：缺黃芩陰性對照無干擾（見表5，如圖4所示）。

圖3酒白芍薄層鑒別圖譜表5安胎顆粒黃芩薄層鑒別表

1、2為缺酒白芍陰性樣品，點樣量分別為10μL， 15μL ；3、4、5為安胎顆粒樣品，點樣量分別為 ⁵μL， 10μL， 15μL; 6、7、8為芍藥苷對照品，點樣量分別為5μL，10μL，15μL

2.2 川續斷皂苷V的含量測定

2.2.1 色譜條件 后續實驗均按該項下色譜條件進行測定。

2.2.2對照品溶液的配制取川續斷皂苷V對照品，精密稱定，加適量甲醇溶解，使其成為濃度為1mg/mL 的貯備液。精密量取上述溶液適量，加乙腈-水（26：74）的混合溶液稀釋成 0.15mg/mL搖勻，即得。

2.2.3供試品溶液的制備取安胎顆粒，研細，精密稱定 3g ，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱重，超聲處理 30min ，放冷，再稱重，用溶劑補重，搖勻，過 0.45μm 濾膜，取續濾液，即得[16] C

2.2.4陰性對照溶液的制備取缺續斷片的安胎顆粒陰性樣品，照“2.2.3”項下方法操作，制成缺續斷片陰性對照溶液。

2.2.5 方法學驗證

2.2.5.1專屬性考察取對照品溶液、安胎顆粒樣品溶液、空白溶劑及缺續斷片陰性對照溶液進樣。樣品在與對照品保留時間相同處出鋒，且與前后小峰分離度 gt;1.5 ，理論板數 gt;3000 ，陰性無干擾（如圖5）。

2.2.5.2線性關系的考察貯備液（L6）：精密稱定 0.02037g 川續斷皂苷V對照品（含量測定純度 94.3% ），加甲醇溶解并定容至 20mL ，搖勻。用甲醇將L6貯備液（濃度為 960.4455μg/mL ）稀釋至不同濃度。L1：L6貯備液 0.5mL10mL ，濃度為 48.0223μg/mL . 12：L6 貯備液 mL，濃度為 96.0446μg/mL ; 貯備液 1.6mL ，濃度為 153.6713μg/mL ： 貯備液3mL5mL ，濃度為 576.2673μg/mL ；L4：L5貯備液3mL5mL ，濃度為 345.7604μg/mL ；L1＼～L6進樣測定并繪制標準曲線。結果見表7。

2.2.5.3精密度試驗進樣測定同一對照品溶液S1（ n=5 ），計算其峰面積RSD為 0.1% ，儀器精密度良好。

2.2.5.4重復性試驗進樣測定按“2.2.3”制備的安胎顆粒樣品（ n=6 ），算得川續斷皂苷VI含量的RSD為 2.7% ，重復性良好[5]

2.2.5.5 重現性試驗精密稱取同一批號的安胎顆粒樣品（ n=6 ），由不同人員使用不同HPLC，按重復性試驗方法測定并計算含量，測得川續斷皂苷VI含量RSD為 1.1% 。本法具有良好的重現性[5]。

2.2.5.6加樣回收率試驗精密稱定 _1.5g 已知含量的安胎顆粒，取L6貯備液 1.9mL 加入，揮干后按重復性試驗方法測定并計算含量。見表8。本法回收率良好。

2.2.5.7穩定性試驗取同一供試品溶液，室溫放置，在 0～40h 內每隔一段時間進樣，測得樣品中川續斷皂苷V峰面積 RSD=1.4% （ n=12 ）， 40h 內該溶液具有穩定性[5]

2.2.6樣品含量測定取 S2～S4 樣品，按S1制備方法處理并進樣，測得3批顆粒中川續斷皂昔VI的含量。結果見表9。

3討論

炒黃芪薄層鑒別中分別對三種展開劑進行比較，結果表明：采用三氯甲烷－甲醇－水系統展開后，主斑點的Rf值適中，分離效果佳，故最終選用該展開劑。炒黃芪、酒白芍、阿膠珠和黃芩的TLC鑒別色譜條件經過不同溫濕度考察和不同廠家薄層板比較，展開效果均良好。同時，對枸杞子的甜菜堿、墨旱蓮的對照藥材及旱蓮苷A、黨參的黨參炔苷等藥味也進行了鑒別指標的摸索，均未發現與對照品顏色相同的斑點或陰性樣品有干擾，故未能建立薄層鑒別方法。

定量鑒別中，本實驗分別研究了黃芪甲苷、芍藥苷、毛蕊異黃酮葡萄糖苷作為含量測定指標的可能性。黃芪甲苷藥典使用蒸發光散射檢測器進行含量測定，不同儀器響應相差較大，耐用性考察未通過；芍藥昔以乙腈 -0.1% 磷酸溶液作為流動相，調整等度及梯度洗脫比例和樣品提取方法，陰性干擾均不能完全消除；毛蕊異黃酮葡萄糖昔流動相為乙腈 -0.1% 甲酸溶液，改變甲酸溶液濃度至 0.2% 、 0.4% ，供試品目標峰峰型較差且分離效果均不佳，故不列入含量指標。

4結論

上述實驗結果表明，定性實驗中，炒黃芪、酒白芍、阿膠珠和黃芩的供試品色譜中，主斑點顯色清晰，陰性無干擾，均能有效鑒別。定量實驗中，川續斷皂苷V液相操作方法專屬性強，線性關系好，加樣回收率符合要求。綜上，本研究建立的方法可用于安胎顆粒的質量控制。

參考文獻

[1］國家藥典委員會．中華人民共和國藥典：一部［M].北京：中國醫藥科技出版社，2020：344.

[2］單秀明，王瑾，吳愛英．HPLC法測定跌打片中川續斷皂苷V的含量［J]．中國藥師，2013，16（3）：388-390.

[3］謝仕偉，梁沃華．HPLC法測定續斷配方顆粒中川續斷皂苷VI的含量［J]．中國中醫藥咨訊，2011，3（3）：1.

[4］馮良．反相高效液相色譜法同時測定滇女金丸中黃芪甲苷，川續斷皂苷VI的含量［J]．中國實用醫刊，2017，44（22）：123-125.

[5］楊曉騰，滕統華．祛風止痛膠囊質量標準研究［J].中國藥品標準，2016，17（1）：24-27.

[6］李喜香，張志瑞，畢映燕，等．祛寒逐風顆粒質量標準研究［J]．中國中醫藥信息雜志，2020，27（2）：53-58.

[7］汪祺，張聿梅，戴忠，等．黃芪中皂苷類成分的特征薄層圖譜鑒別［J]．中國藥事，2011，25（12）：1227-1229，1232.

［8］鄒榆紅，黃毅嵐．強腰壯骨膏的薄層鑒別［J]．瀘州醫學院學報，2008（1）：68-69.

[9］李慧慧，汪現，張錚，等．桑菊感冒合劑質量標準研究［J]．海峽藥學，2011，23（2）：59-61.

[10］郭巧技，宋瀟瀟，劉吉金，等．調經丸的薄層色譜鑒別［J]．中國現代藥物應用，2009，3（18）：125-126.

［11］畢曉黎．復方甲亢膠囊的藥學研究［D]．武漢：湖北中醫學院，2004.

[12］方文清．玉泉丸的質量標準研究［J]．海峽藥學，2012，24（10）：58-60.

[13］金芳，雷茂華，宋坤．復方功血沖劑中阿膠的薄層色譜鑒別［J]．中藥材，1998（2）：95.

[14］李慧林．清熱通淋顆粒的研究［D]．濟南：山東中醫藥大學，2013.

[15］劉茂軍，房志仲，李錫晶，等．疏肝利膽片質控方法研究［J]．天津醫科大學學報，2009，15（3）：508-511，524.

［16］夏冬梅.藏藥“俄色葉”的質量標準研究［D]．成都：成都中醫藥大學，2015.（收稿日期：2024-08-20編輯：陶希睿）