不同海拔地區高血壓患者同型半胱氨酸水平及代謝酶基因多態性與血壓及氧化應激水平的關系研究

【摘要】背景隨著高海拔地區高同型半胱氨酸血癥（HHcy）及高血壓發病率的增加，同型半胱氨酸（Hcy）及其代謝酶基因多態性與血壓、氧化應激水平之間的關系尚不明確，探討其相關性或許可為高海拔地區H型高血壓提供新的診療思路。目的分析海拔對Hcy代謝酶基因多態性的影響，比較不同基因型之間血壓、Hcy及氧化應激水平的差異，探討Hcy水平與血壓、氧化應激之間的相關性。方法納入2023年7月—2024年7月在青海大學附屬醫院診治的玉樹地區（海拔 3800～4 200m ）高血壓患者60例（高海拔高血壓組）、健康受試者30例（高海拔健康組）；納入西寧地區（海拔 2260m ）高血壓患者60例（低海拔高血壓組）、健康受試者30例（低海拔健康組）為研究對象。收集研究對象的基線資料和實驗室檢查結果，檢測 Hcy代謝酶基因多態性。采用Pearson 相關性分析探討 Hcy、血壓、血清氧化型谷胱甘肽（GSSG）、一氧化氮（NO）、超氧化物歧化酶（SOD）水平的相關性。結果各組受試者年齡、性別、BMI、吸煙史、飲酒史、服藥史、高血壓家族史、民族比較，差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ）。高海拔高血壓組 、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、GSSG 高于高海拔健康組、低海拔高血壓組，NO、SOD低于高海拔健康組、低海拔高血壓組（ Plt;0.05 ）；高海拔健康組SBP、DBP、GSSG高于低海拔健康組，SOD低于低海拔健康組（ Plt;0.05 ）；低海拔高血壓組Hcy、SBP、DBP、GSSG高于低海拔健康組，SOD低于低海拔健康組（ Plt;0.05 ）。不同海拔地區高血壓組受試者亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）C677T基因型頻率比較，差異有統計學意義（ Plt;0.05 ），MTHFRA1298C、蛋氨酸合酶還原酶（MTRR）A66G基因型頻率比較，差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ）；不同海拔地區健康組受試者MTHFRC677T、MTHFRA1298C、MTRRA66G基因型頻率比較，差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ）。120例高血壓患者MTHFRC677T位點中CC基因型56例（ 46.67% ），CT基因型43例（ 35.83% ），TT基因型21例（ 17.5% ），MTHFRA1298C位點中AA基因型62例（ 51.67% ）、AC基因型51例（ 42.50% ）、CC基因型7例（ 5.83% ），MTRRA66G位點中AA基因型62例（ 51.67% ）、AG基因型48例（ 40.00% ）、GG基因型10例（ 8.33% ）。MTHFRC677T位點中TT基因型 Hcy、SBP、NO、SOD 水平高于CT基因型和CC 基因型，GSSG 低于CT基因型和CC 基因型，CT基因型Hcy、SBP、NO、SOD水平高于CC基因型，GSSG低于CC基因型（ Plt;0.05 ）；MTHFRA1298C位點中CC基因型Hcy水平、HHcy比例高于AC基因型和AA基因型，AC基因型 Hcy 水平、HHcy比例高于AA基因型（ Plt;0.05 ）；MTRRA66G位點中GG基因型 、NO、HHcy比例高于CC 基因型和CT基因型，CT基因型Hcy、NO、HHcy比例高于CC基因型（ Plt;0.05 ）。HHcy患者DBP、GSSG高于非HHcy血癥患者，NO、SOD低于非HHcy 患者。相關性分析結果表明，高血壓受試者Hcy與DBP、GSSG水平呈正相關，與NO、SOD水平呈負相關，NO與DBP水平呈負相關（ Plt;0.05 ）。結論高海拔地區高血壓患者血壓相較于低海拔地區高血壓患者更高，氧化應激水平更高，但MTHFRC677T基因分型趨向于正常型，導致Hcy升高的突變型比例較低，與傳統觀點存在一定的偏差，關于Hcy代謝酶基因多態性與 、血壓水平的關系尚不明確，未來仍需更多探索。

【中圖分類號】 R 544.1 【文獻標識碼】 ADO1：10.12114/j.issn.1007-9572.2024.0496

Study on the Relationship between Homocysteine Levels， Polymorphisms of Homocysteine Metabolizing Enzyme Genes， Blood Pressure，and Oxidative Stress Levels in Hypertensive PatientsatDifferentAltitudes

ZHANG Ning FAN Shiming REN Ming SHEN Youlu MA Yanmei DOU Xiaohong PU Cuo LU Xingqin

HUANG Qiang XUE Rui WANGFuyan LIN Ying ZHANG Jihui TIAN Huizhen2，HANPing2，HAN Yujuan2，HAN

Shuping LIU Qingling LU Tianlong LU Yongliang E Weijian

1.Graduate School of Qinghai University， Xining 81000，China

2.Department of Cardiology， Afliated Hospital of Qinghai University， Xining 810oo，China

*Corresponding author： FAN Shiming，Chief physician/Professor； E-mail： 13639786140@163.com

【Abstract】BackgroundWith the increasing incidence of hyperhomocysteinemia（HHcy）and hypertension in high-altitude regions，therelationshipsamong homocysteine（Hcy），polymorphismsof Hcymetabolizing enzyme genes，blood presure，and oxidative stresslevels remain unclear.Exploring these corelations may provide new diagnostic and therapeutic insights for H-typehypertension inhigh-alitude areas.ObjectiveTo analyze the impactof altitudeonpolymorphisms of Hcy metabolizing enzyme genes，compare diferences in blood pressure，Hcylevels，and oxidative stress levelsamong different genotypes，and explore the corelationsbetween Hcylevels and blood pressure aswellas oxidative stressMethodsFromJuly 2023to July2O24，6Ohypertensive patients（high-altitude hypertension group）and30healthysubjects（high-altitude healthy group）fromtheYushuregion（altitude：38O0-42OOm）wererecruitedfromtheAfiliated Hospitalof Qinghai University. Additionally，6O hypertensive patients（low-altitude hypertension group）and 30 healthy subjects（low-altitude healthy group）fromtheXiningregion（altitude：226Om）wereincludedinthestudy.Baselineinformationandlaboratorytestresults were collected from the subjects，and polymorphisms of Hcymetabolizing enzyme genes were detected.Pearson correlation tests wereused to investigate the corelations among Hcy，blood pressure，serum oxidized glutathione（GSSG），nitric oxide （NO），and superoxide dismutase（SOD）levels.ResultsThere were no significant diferences inage，gender，BMI， smoking history，drinking history，medication history，family history of hypertension，or ethnicityamong the groups （ Pgt;0.05 ） Thehigh-altitudehypertension grouphad higher Hcy，systolic blood pressure（SBP），diastolic blood pressure（DBP），and GSSG levels，andlower NOand SOD levels compared to the high-altitude healthy groupand thelow-altitude hypertension group （ Plt;0.05 ）.The high-altitude healthy group had higher SBP，DBP，and GSSG levels，and lower SOD levels compared to the low-altitude healthy group （ Plt;0.05 ）. The low-altitude hypertension group had higher Hcy，SBP，DBP，and GSSG levels， and lower SOD levels compared to the low-altitude healthy group （ Plt;0.05 ）. There was a significant difference in the genotype frequency of the methylenetetrahydrofolate reductase（MTHFR）C677T polymorphism between the hypertension groups at different altitudes （ Plt;0.05 ），but no significant differences in the genotype frequencies of the MTHFR A1298C and methionine synthase reductase （ MTRR ） A66G polymorphisms （ Pgt;0.05 ）. There were no significant differences in the genotype frequencies of the MTHFR C677T，MTHFR A1298C，and MTRR A66G polymorphisms between the healthy groupsat diferent altitudes （ Pgt;0.05 ）. Among the 120 hypertensive patients，56（ 46.67% ）had the CC genotype，43（ 35.83% ）had the CT genotype， and 21 （ 17.5% ） had the TT genotype at the MTHFR C677T locus;62（51.67%） had the AA genotype，51（ 42.50% ）had the AC genotype，and 7 （ 5.83% ） had the CC genotype at the MTHFR A1298C locus； 62（ 51.67% ） had the AA genotype， 48 （ 40.00% ） had the AG genotype，and 10 （ 8.33% ） had the GG genotype at the MTRR A66G locus. At the MTHFR C677T locus，the TTgenotype was asociated with higher Hcy，SBP，NO，and SOD levelsandlower GSSG levels comparedto he CT and CC genotypes，and the CT genotype was associated with higher Hcy，SBP，NO，and SOD levelsand lower GSSG levels compared to the CC genotype （ Plt;0.05 ）. At the MTHFR A1298C locus，the CC genotype was associated with higher Hcy levels andahigher proportionof HHcycompared totheACandAA genotypes，andtheAC genotype Was assciated with higher Hcy levels and a higher proportion of HHcy compared to the AA genotype （ Plt;0.05 ）. At the MTRR A66G locus，the GG genotype was asociated with higher Hcy，NO levels，anda higher proportion of HHcycompared to the CCandAG genotypes，and the AG genotype was assciated with higher Hcy，NO levels，，and a higher proportionof HHcycompared to the CC genotype（ Plt;0.05 ）. Patients with HHcyhad higher DBP and GSSG levelsand lower NOand SODlevels comparedto non-HHcy patients.Correlation analysisshowed thatHcywasposivelycorrelated withDBPand GSSGandnegativelycorelatedwithNOandSODinhypertensive subjects，and NO was negatively correlated with DBP（ Plt;0.05 ）.Conclusion Hypertensive patients in high-altitude regionshave higher blood pressure andoxidative stress levels compared tothose inlow-altitude regions. However，the genotype distributionof the MTHFRC677Tpolymorphismtends towards the normaltype，withalowerproportionofmutan genotypes that leadtoincreased Hcylevels，whichdeviatesfromtraditional views.TherelationshipbetweenpolymorphismsofHcymetabolizing enzyme genes and Hcy and blood pressre levels remains unclear，and further exploration is needed in the future.

【Key words】Hypertension；Hyperhomocysteinemia；Homocysteine；Altitude；MTHFR gene polymorphisms; MTRR gene polymorphisms；Oxidative stress

近年來高血壓的發病率不斷升高，已影響全球超過15億人，增加了心力衰竭、冠心病等心血管疾病的發生風險[1]。原發性高血壓患者中約 75% 伴血清同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）水平升高，稱為H型高血壓2]。亞甲基四氫葉酸還原酶（5，10-methylenetetrahydrofolatereductase，MTHFR）C677T、A1298C及蛋氨酸合酶還原酶（methionine synthasereductase，MTRR）A66G為Hcy代謝關鍵酶，該酶基因型突變會顯著影響Hcy水平。高海拔可增強體內氧化應激及Hcy水平，影響MTHFR及MTRR基因多態性頻率，高同型半胱氨酸血癥（hyperhomocysteinemia，HHcy）是心血管疾病的危險因素之一，亦會增強人體內氧化應激水平、升高血壓。目前關于Hcy代謝關鍵酶不同基因型是否對Hcy、血壓、氧化應激水平產生影響尚不明確，Hcy與血壓、氧化應激水平是否存在相關性尚無定論。本文旨在分析海拔對MTHFR、MTRR基因多態性頻率的影響，比較Hcy代謝關鍵酶不同基因型之間Hcy、血壓、氧化應激水平差異，同時探索Hcy、血壓、氧化應激水平之間是否存在相關性。

1對象與方法

1.1 研究對象

納入2023年7月—2024年7月在青海大學附屬醫院診治的玉樹地區（海拔 3800～4200m ）高血壓患者60例（高海拔高血壓組）、健康受試者30例（高海拔健康組）；納入同期診治的西寧地區（海拔 2260m ）高血壓患者60例（低海拔高血壓組）、健康受試者30例（低海拔健康組）為研究對象。

納入標準：（1）高血壓患者符合《中國高血壓防治指南（2024年修訂版）》［3]診斷標準；（2）年齡18＼～75歲；（3）研究對象為世居者（當地生活3代以上）或移居者（在當地生活10年以上）。排除標準：（1）繼發性高血壓、冠心病、糖尿病及其他系統疾病；（2）BMI?28.0kg/m² 或 lt;18.5kg/m² ；（3）妊娠期或哺乳期婦女；（4）近3個月內服用過影響Hcy水平的藥物，如葉酸、維生素 B₆ 、維生素 B₁₂ 等。

本研究經青海大學附屬醫院倫理委員會批準（倫理號：P-SL-2023-290）、中國人類遺傳資源采集許可［國科人遺審字（2023）CJ0216號」。向研究對象仔細解釋研究目的和程序，并取得每位參與者的書面知情同意書。

1.2研究萬法

1.2.1問卷調查和人體測量：所有受試者填寫基本信息的調查問卷，完成人體測量，包括性別、年齡、BMI、血壓、吸煙史（吸煙定義為患者自入院治療前10年內曾經有規律的吸煙，且吸煙數量累計 ?100 支）、飲酒史（飲酒定義為患者自本次入院接受治療前曾經有規律的飲酒）、用藥史、高血壓家族史等。身高精確到0.1cm ，體質量精確到 0.1kg 。血壓測量前要求患者安靜休息 30min ，然后使用UA-779數字監護儀測量3次收縮壓（SBP）和舒張壓（DBP），結果取2次平均值。1.2.2血液樣本采集和實驗室檢測：受試者禁食 8h 后，于次日7： 00am 行靜脈采血。取 5mL 靜脈血離心（轉速 3000r/min ，離心半徑 10cm ，離心時間 10min ）分離血清，于 -80% 冰箱內保存，統一在青海大學附屬醫院中心實驗室采用微量酶標法測定血清氧化型谷胱甘肽（glutathioneoxidized，GSSG）、一步法測定血清一氧化氮（nitricoxide，NO）、酶聯免疫吸附試驗法測定超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）水平。檢測Hcy水平，并根據《中國高血壓防治指南（2018年修訂版）》［4]，HHcy定義為血漿 Hcy?15μmol/L ，最終120 例高血壓患者中 74 例非 HHcy，46 例 HHcy 。1.2.3DNA提取和基因分型：晨起空腹采肘靜脈血2mL ，加入EDTA抗凝，立即置于 4^°C 冰箱中，在 ^1h 內離心 3500r/min ，離心半徑 20cm ， 10min 。采用血液基因組DNA提取試劑盒（FAH2401001，中國深圳）提取基因組DNA，并于 -20% 保存。使用MTHFR和MTRR基因多態位點檢測試劑盒（PCR-熒光探針熔解法）進行基因分析。取 2mL 靜脈血，EDTA-K2抗凝，采用微量樣品基因組DNA提取試劑盒（深圳市億立方生物技術有限公司，粵深械備20140012號）提取核酸，對基因多態位點進行擴增，擴增參數如下， 95^°C ， 180s 95^°C ， 20s ， 60^°C ， 50s ， 72^°C ， 40s ，45個循環；72% ， 300s ; 95°C ， 120s ; 40% ， 180s ： 40^°C～85^°C ，升溫熔解曲線分析。試驗結果解釋如下，（1）FAM熒光為677位點，熔解曲線峰在 ?57% 時，為677CC正常型；熔解曲線峰在 ?63^°C 時，為677TT突變型；

有前述兩個熔解曲線峰時，為677CT雜合型。（2）Cy5熒光為1298位點，熔解曲線峰在 ?53% 時，為1298AA正常型；熔解曲線峰在 ?62^°C 時，為1298CC突變型；有前述兩個熔解曲線峰時，為1298AC雜合型。（3）ROX熒光為66位點，熔解曲線峰在 ?54^°C 時，為66AA正常型；熔解曲線峰在 ?59^°C 時，為66GG突變型；有前述兩個熔解曲線峰時，為66AG雜合型。（4）臨床樣品的任何一個熒光通道，不符合上述類型之一時，為該樣品試驗失敗，重新檢測。

1.3 統計學方法

采用SPSS23.0統計學軟件進行數據分析，符合正態分布的計量資料以 表示，兩組間比較采用獨立樣本 Φ_t 檢驗，多組間比較采用單因素方差分析；計數資料采用例（ % ）表示，組間比較采用 χ² 檢驗。采用Pearson相關性分析探討Hcy、血壓、GSSG、NO、SOD水平的相關性。以 Plt;0.05 為差異有統計學意義。

2結果

2.1受試者基線資料

各組受試者年齡、性別、BMI、吸煙史、飲酒史、服藥史、高血壓家族史、民族比較，差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ），見表1。

2.2受試者血壓與實驗室檢查結果

各組受試者Hcy、收縮壓（SBP）、舒張壓（DBP）、GSSG、NO、SOD比較，差異有統計學意義（ Plt;0.05 ）。

組間兩兩比較結果顯示，高海拔高血壓組 、SBP、DBP、GSSG高于高海拔健康組、低海拔高血壓組，NO、SOD低于高海拔健康組、低海拔高血壓組，差異有統計學意義（ Plt;0.05 ）；高海拔健康組SBP、DBP、GSSG高于低海拔健康組，SOD低于低海拔健康組，差異有統計學意義（ Plt;0.05 ）；低海拔高血壓組Hcy、SBP、DBP、GSSG高于低海拔健康組，SOD低于低海拔健康組，差異有統計學意義（ Plt;0.05 ），見表2。

2.3不同海拔地區受試者基因型頻率比較結果

不同海拔地區高血壓組受試者MTHFRC677T基因型頻率比較，差異有統計學意義（ Plt;0.05 ），MTHFRA1298C、MTRRA66G基因型頻率比較，差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ）；不同海拔地區健康組受試者MTHFRC677T、MTHFRA1298C、MTRRA66G基因型頻率比較，差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ），見表3＼～4。

Hardy-Weinberg平衡分析結果顯示，不同海拔地區高血壓組和健康組受試者的基因多態性均無偏差（ Pgt;0.05 ），見表5＼～6。

2.4高血壓受試者不同基因多態性血壓與實驗室檢查結果比較

120例高血壓患者MTHFRC677T位點中CC基因型56例（ 46.67% ），CT基因型43例（ 35.83% ），TT基因型21例（ 17.5% ），MTHFRA1298C位點中AA基因型62例（ 51.67% ）、AC基因型51例（ 42.50% ）、cc基因型7例（ 5.83% ），MTRRA66G位點中AA基因型

62例（ 51.67% ）、AG基因型48例（ 40.00% ）、GG基因型10例（ 8.33% ）。MTHFRC677T位點中TT基因型 Hey， SBP、NO、SOD水平高于CT基因型和CC基因型，GSSG低于CT基因型和CC基因型，CT基因型Hcy、SBP、NO、SOD水平高于CC 基因型，GSSG低于CC基因型，差異有統計學意義（ Plt;0.05 ）；3種基因型DBP、HHcy、 SBP?140mmHg 、 DBP?90mmHg 比例比較，差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ）；MTHFR A1298C位點中CC基因型 水平、HHcy比例高于AC基因型和AA基因型，AC基因型Hcy水平、HHcy比例高于AA基因型，差異有統計學意義（ Plt;0.05 ）；3種基因型SBP、DBP、GSSG、NO、SOD、 SBP?140mmHg 、D BP?90mmHg 比例比較，差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ）；MTRRA66G位點中GG基因型Hcy、NO、HHcy比例高于CC基因型和CT基因型，CT基因型 、NO、HHcy比例高于CC基因型，差異有統計學意義（ Plt;0.05 ）；3種基因型SBP、DBP、GSSG、SOD、 SBP?140mmHg 、 DBP?90mmHg 比例比較，差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ），見表7。

2.5非HHcy患者與HHcy患者血壓與實驗室檢查結 果比較

HHcy患者DBP、GSSG高于非HHcy患者，NO、SOD低于非HHcy患者，差異有統計學意義（ Plt;0.05 ），見表8。

2.6高血壓受試者血壓、Hcy、氧化應激指標的相關性分析

相關性分析結果表明，高血壓受試者Hcy與DBP、GSSG水平呈正相關，與NO、SOD水平呈負相關，NO與DBP水平呈負相關（ Plt;0.05 ），見表9。

3討論

Hcy為蛋氨酸轉化為半胱氨酸過程的中產物［5]，蛋氨酸在轉移酶的作用下轉化為S-腺苷甲硫氨酸（S-adenosylmethionine，SAM），SAM去甲基化生成S-腺苷同型半胱氨酸，后水解生成Hcy[6]。Hcy一方面通過轉硫途徑去除，另一方面在蛋氨酸合酶的作用下再甲基化為蛋氨酸去除[7]，再甲基化途徑以5-甲基四氫葉酸為底物、維生素 B₁₂ 為蛋氨酸合酶的輔助因子[8]，MTHFR可催化5，10-亞甲基四氫葉酸轉換成5-甲基四氫葉酸，MTRR可將5-甲基四氫葉酸轉化為四氫葉酸[9]，在這個過程中，Hcy代謝與細胞內葉酸代謝產生交聯，這也是葉酸水平影響Hcy代謝的重要原因。葉酸屬水溶性B族維生素，人體不能合成，需從綠色蔬菜中攝取，而高海拔地區人群由于飲食結構中綠葉蔬菜攝人不足，缺乏葉酸及維生素，易導致Hcy代謝受阻在體內蓄積形成 HHey 。研究顯示，高海拔地區HHcy及高血壓的患病率高于低海拔地區[10]，血壓水平隨海拔的升高而升高[1]。本研究結果顯示，納入的120例患者中僅有46例（ 38.3% ）患者為 HHcy ，高海拔的玉樹地區高血壓組及健康對照組血壓水平及 Hey 水平均高于西寧地區，與上述研究結果較為一致。

高海拔低氧環境會誘導機體產生大量氧自由基，升高機體內氧化水平、降低抗氧化能力，破壞人體內氧化平衡，加劇氧化應激水平[12]。隨著海拔高度的增加、大氣壓的降低，人體細胞和組織內不斷降低的氧分壓會加劇線粒體、黃嘌呤氧化還原酶、細胞色素P450依賴的微粒體電子傳遞系統產生活性氧（reactive oxygenspecies，ROS），氧化應激水平會隨海拔的升高而加劇[13]。SOLIMAN等［14]進行的實驗表明高海拔環境會降低大鼠體內SOD水平，本研究發現玉樹地區人群體內氧化物GSSG及NO水平高于西寧地區、SOD水平低于西寧地區結論與之一致，而長期暴露于高海拔低氧環境會升高人體內氧化水平、降低抗氧化水平[13]。為了分析海拔對血壓、氧化應激水平的影響，本研究對兩地健康組進行比較，結果發現玉樹地區血壓、GSSG水平高于西寧地區，SOD水平低于西寧地區，表明海拔升高可增加血壓、氧化應激水平。

目前研究表明，海拔可能影響MTHFRC677T、MTRRA66G基因型頻率，但尚無確切結論。YANG等［15］研究發現高海拔環境下MTHFRC677T位點的TT型等位基因頻率低于低海拔地區；REYES等[16]分析了C677T基因多態性在墨西哥和中美洲人群中的分布，結果顯示T等位基因的頻率從東南到西北，隨海拔水平的升高而降低。而YANG等[15］分析發現高海拔人群體內MTHFR677T等位基因的頻率高于C等位基因。本研究結果顯示，高血壓組MTHFRC677T基因多態型在西寧地區以突變型（CT、TT型）為主，玉樹地區以野生型（CC型）為主且TT基因型頻率低于西寧地區（ ）。格桑平措等［7］的研究發現，低海拔地區（河南、山西等）基因型頻率占比均低于高海拔地區（西藏），與其不同的是，本研究結果顯示兩地區高血壓組MTHFRA1298C、MTRR66GG基因型頻率差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ）。此外，本研究比較兩地區健康對照組MTHFRC677T、MTHFRA1298C、MTRRA66G基因型頻率未發現具統計學差異（ Pgt;0.05 ），并未發現海拔對基因多態性頻率產生明顯影響。高海拔地區人群可能出于對環境適應的原因會產生基因型頻率的改變，但基因型頻率差異與海拔的關系仍需更多研究來探索。

MTHFR、MTRR均為Hcy代謝途徑關鍵酶，C677T基因型中T取代C、A1298C基因型中C取代A、A66G基因型中G取代A均會影響酶活性進而升高人體內Hcy水平［18-19]。SIDDIQI等［20]的研究表明 MTHFRC677T和A1298C多態性與血清Hcy水平升高之間存在顯著關聯，677位點的TT型和1298位點的CC型具更高Hcy水平，相反MTRRA66G基因型與Hcy水平無顯著相關性。與此結論不同，MAZOKOPAKIS等［21]研究表明MTHFR677TT基因型血清Hcy水平顯著高于CC或CT基因型，但MTHFRA1298C基因多態性與Hcy水平無相關性。在分析不同基因型對Hcy水平的影響中，本研究結果顯示C677T、A1298C、A66G三種基因多態性之間Hcy水平差異具有統計學意義，純和突變型 gt; 雜合突變型，雜合突變型 gt; 野生型（ Plt;0.05 ）；同時發現在A1298C、A66G基因型中HHcy主要集中于雜合突變基因型（AC型、AG型）（ Plt;0.001 ）。本研究結論與目前研究結果一致的是677TT基因型可升高Hcy水平，而不同的是A1298C、A66G基因多態性亦對Hcy水平產生了影響。MTHFRA1298C不會影響Hcy水平可能與基因突變在影響MTHFR活性的同時并不會導致不耐熱蛋白的形成（MTHFR基因突變會降低酶的耐熱性）有關［21]，因此探索 MTHFR A1298C 基因多態性對Hcy 水平的影響似乎是無意義的，與此結論相悖的是SIDDIQI等［20]的研究與本研究均發現A1298C基因型突變可對Hcy水平產生影響，因此MTHFRA1298C與Hcy水平的關系仍需進一步研究。

HHcy可致血管內皮舒張功能減退，進一步加劇高血壓的發生、發展［22]。本研究進一步探討了Hcy 代謝的關鍵酶MTHFR、MTRR不同基因型患者之間血壓水平的差異，結果表明，高血壓組MTHFRC677T不同基因型患者之間SBP水平存在差異，TT基因型SBP水平gt;CT 型 型（ P=0.04 ），即突變基因型可能具有更高水平的SBP，但C677T不同基因型之間高SBP發生率的差異無統計學意義（ Pgt;0.05 ）。YUAN等[23]研究表明，攜帶MTHFR667TT的患者有更高的高DBP發生率，攜帶MTRR66GG的患者有更高的高SBP發生率。本研究未發現MTHFRA1298C、MTRRA66G不同基因型對血壓的影響。

Hcy水平在升高血壓的同時亦會增強高血壓患者體內氧化應激水平[24-25］，MTHFR、MTRR 基因多態性可對Hcy、血壓水平產生影響，本研究進一步分析了不同基因型與氧化應激水平的關系，結果表明，TT型GSSG水平低于CT型，CT型GSSG水平低于CC型，同時TT型SOD水平高于CT型，CT型SOD水平高于CC型，即C677T基因型突變（CT、TT基因型）會降低氧化、升高抗氧化水平，從而降低氧化應激水平。而WANG等［26]分析MTHFR遺傳多態性與氧化應激生物標志物的關系，發現攜帶MTHFR677CC基因型受試者具有較高的紅細胞SOD活性，增強抗氧化應激能力，降低氧化應激水平。除此之外，本研究及既往研究并未發現MTHFRA1298C、MTRRA66G不同基因型之間存在氧化應激水平差異。

研究表明，HHcy可通過減少抗氧化生物標志物SOD的分泌來干擾抗氧化防御系統，最終導致氧化應激和細胞損傷[27]。在H型高血壓的發病過程中，腎素－血管緊張素-醛固酮系統的激活及HHcy會增加ROS的產生，升高氧化應激水平[28]。HHcy可能加劇H型高血壓的嚴重程度。因此本研究分析了H型高血壓發病過程中 水平對氧化應激水平的影響，結果發現HHcy高血壓患者GSSG及DBP水平高于非HHcy患者0 P=0.038，0.025 ）SOD水平低于非HHcy患者（ P/=0.011 ），說明 Hey 水平可能會升高氧化水平、降低抗氧化能力。本研究進一步分析了 Hcy 、氧化應激水平之間是否存在相關性，結果顯示 Hey 水平與DBP、GSSG水平呈正相關關系，Hcy水平與SOD水平呈負相關關系。

海拔升高與基因突變均會升高血壓、Hcy水平，同時Hcy水平升高亦會使血壓、氧化應激水平升高。一方面高海拔環境氧化應激水平升高可能是由于突變型基因頻率的降低，另一方面矛盾的是，高海拔在升高血壓、Hcy水平的同時降低突變基因型頻率會降低HHcy的發生率，但從本研究結果來看，兩地區只有高血壓組MTHFGC677T基因型頻率存在差異，健康對照組并未存在基因型頻率差異，海拔對基因型頻率是否產生影響仍不明確，目前關于Hcy代謝酶基因多態性與Hcy、血壓水平的關系尚不明確，仍需更多探索。

總之，高海拔地區趨向于過氧化應激，可加劇H型高血壓的發生、發展。目前個體化基因檢測已經逐漸普及，未來對不同海拔地區、基因型針對性使用降Hcy、抗氧化應激藥物可能是H型高血壓個體化藥物治療的新靶點。

作者貢獻：張檸負責研究的實施，撰寫論文；任明負責提出主要研究目標，構思設計研究；沈有錄、馬艷梅、竇小紅、普措、魯星琴、薛睿、王福彥、林瑩、張吉輝、田輝珍、韓萍、韓玉娟、韓淑萍、劉青靈負責數據的收集與整理；盧天龍、蘆永良、鄂維建負責試驗設計驗證與質控；黃強進行論文的修訂；樊世明負責文章的質量控制與審查，對文章整體負責，監督管理。

本文無利益沖突。

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（收稿日期：2024-10-08；修回日期：2025-01-09）（本文編輯：鄒琳）