亞洲人群CYP17(-34T/C)基因多態性與子宮內膜異位癥易感性的Meta分析

程雯，翟東霞，張丹英，姚睿嬪，王汝倩，俞超芹

(第二軍醫大學長海醫院中醫系，上海　200433)

亞洲人群CYP17(-34T/C)基因多態性與子宮內膜異位癥易感性的Meta分析

程雯，翟東霞，張丹英，姚睿嬪，王汝倩，俞超芹*

(第二軍醫大學長海醫院中醫系，上海200433)

【摘要】目的應用Meta分析探討亞洲人群中細胞色素氧化酶17基因(CYP17)(-34T/C) 基因多態性和子宮內膜異位癥(EMs)易感性的關系。方法檢索Pubmed、中國知網、萬方、中國生物醫學文獻數據庫(CBM)等中、英文數據庫中發表的關于亞洲人群CYP17 (-34T/C)基因多態性和EMs易感性的文獻。對文獻進行質量評價、篩選和提取相關病例對照研究資料，利用R軟件進行Meta 分析，計算合并的比數比(OR)及其95%可信區間(CI)。結果 共納入文獻6篇，累計病例組662例，對照組937例。分析結果顯示：等位基因對比模型(T vs. C)：OR=1.283，95%CI：0.948-1.737；雜合子模型(TC vs. CC)：OR=1.181，95%CI：0.919-1.518；純合子模型(TT vs. CC)：OR=1.612，95%CI：0.899-2.889；顯性模型(TT+TC vs. CC)：OR=1.320，95%CI：0.932-1.871；隱性模型(TT vs. TC+CC)：OR=0.716，95%CI：0.456-1.123。結論本次Meta分析結果顯示，在亞洲人群中CYP17(-34T/C)基因多態性與EMs易感性并無顯著相關性，但需要開展更多設計細致、實施良好的大樣本量病例-對照研究以得到更科學可信的結論。

【關鍵詞】CYP17；基因多態性；子宮內膜異位癥；Meta分析

Methods： Databases from Pubmed，CNKI，Wanfang and CBM were collected，and the relevant papers and literatures were analyzed by Meta-analysis. Crude odds ratio (OR) with 95% confidence interval (CI) was used to assess the strength of association.

Results： A total of 6 studies including 662 patients and 937 controls were identified. The pooled results showed no association between polymorphism T→C of geneCYP17 and endometriosis risk in the Asian population (T vs. C：OR=1.283，95%CI：0.948-1.737；TC vs. CC：OR=1.181，95%CI：0.919-1.518；TT vs. CC：OR=1.612，95%CI：0.899-2.889；TT+TC vs. CC：OR=1.320，95%CI：0.932-1.871 and TT vs. TC+CC：OR=0.716，95%CI：0.456-1.123).

Conclusions： The meta-analysis suggested that polymorphism of gene CYP17(-34T/C)was not associated with endometriosis susceptibility in Asian population. Considering the limited sample size and ethnicity included in our meta-analysis，an updated meta-analysis needs to be conducted when more well-designed studies are published.

(JReprodMed2016，25(6)：487-492)

子宮內膜異位癥(EMs)是子宮內膜種植于子宮腔以外部位的婦科疾病，已有研究證實EMs具有一定的遺傳特征[1]。育齡婦女中EMs的發病率約為10%～15%，它是導致婦女痛經、不孕以及盆腔疼痛等癥狀的重要原因之一，EMs的發生嚴重影響育齡婦女的生活質量[2]。因此，探索EMs的發病機制并尋找有效的治療手段是婦科領域刻不容緩的課題之一。

基因多態性已經證實與EMs發病具有一定的聯系，其中以激素合成、代謝相關的基因研究最多，例如CYP17。CYP17基因位于10號染色體，在激素合成中起著重要作用[3]。CYP17(-34T/C)多態位點位于5’非編碼區翻譯起始點-34 bp處，T-C突變后單個堿基的替換產生了限制性內切酶MspA1的酶切位點，繼而產生兩種等位基因Al(T)和A2(C)[4]，當等位基因A2存在時，可以增加基因的轉錄效率，提高酶的活性，使雌激素合成增多，誘發EMs[5]。CYP17(-34T/C)基因多態性與EMs易感性的研究較多，然而，分子流行病學結果(尤其是在不同人種中的結果)并不一致[6-7]。目前的研究主要集中在歐洲的白種人及亞洲的黃種人，其中涉及白種人的研究可查到3篇，分別涉及英國人[8]、土耳其人[9]及意大利人[10]，3篇研究的結果一致，提示CYP17(-34T/C)基因多態性與EMs發病無顯著相關性；涉及亞洲人的研究較多，地區涉及日本、中國大陸及中國臺灣等，但研究結果存在較大差異，尚無統一結論。本文擬采用Meta分析更精確地評估亞洲人群中CYP17(-34T/C)基因多態性與EMs易感性之間的關系。

資料與方法

一、數據收集

通過計算機檢索Pubmed、Elesevier等外文文獻數據庫中2015年6月前公開發表的文獻，檢索關鍵詞包括 CYP17、cytochrome P450c17 gene、endometriosis、genetic polymorphism、SNP、gene mutation，依次分別組合。檢索中國知網(CNKI)、萬方、維普、中國生物醫學文獻數據庫(CBM)、中文生物醫學期刊/會議文獻數據庫(CMCC/CMAC)等中文文獻數據庫在2015年6月前公開發表的期刊、會議文獻、學位論文，檢索詞為子宮內膜異位癥、CYP17、細胞色素氧化酶17基因、基因多態性、突變、SNP，依次分別組合。手工檢索全國婦產科學術會議及中國中西醫結合學會婦產科專業委員會會議論文集；查閱檢索到所有文獻的參考文獻索引，手工檢索相關文獻。

二、文獻納入標準和排除標準

納入標準：(1)有關亞洲人群的CYP17(-34T/C)基因多態性與EMs發病風險的原始研究；(2)運用獨立的病例-對照試驗設計；(3)可獲得基因型分布頻數或相關數據；(4)各研究中，對照群體基因型分布均符合Hardy-Weinberg(HWE)平衡。

排除標準：非臨床論著(包括綜述、Meta分析等)、研究對象為非亞洲人群、重復報告、文獻中不能準確獲得CYP17的各基因型分布、對照群體基因型分布顯著偏離HWE平衡的研究。

三、質量控制

(1)嚴格根據入選標準收集相關文獻及數據；(2)由兩位研究者分別對文獻進行整理、摘錄。并交叉核對納入文獻的結果，對有分歧的文獻通過討論或由第3位研究者決定其是否納入。(3)數據庫建立，數據由雙人提取并雙機錄入，以確保數據提取和錄入的準確性。

四、統計學分析

通過計算下列基因型模型獲得OR值及其95%CI，用以評估亞洲人群的CYP17(-34T/C)基因多態性與EMs發病風險的關聯強度。基因型模型：等位基因對比模型(T vs. C)、雜合子模型(TC vs. CC)、純合子模型(TT vs. CC)以及顯性模型(TT+TC vs. CC)和隱性模型(TT vs. TC+CC)。根據異質性(I2)大小選擇合適的效應模型，I2>50%時選擇隨機效應模型；I2≤50%時選擇固定效應模型。發表偏倚應用Egger’s test進行評價，P<0.05為有發表偏倚。上述統計分析均采用R軟件(R-3.2.0)進行，P<0.05為差異具有統計學意義。

結果

一、研究資料的基本情況

根據我們的檢索條件，共6篇文獻納入研究(納入流程見圖1，所有文獻的基因頻率分布見表1)，其中中國大陸[11-12]、中國臺灣[13-14]、日本[8，15]各兩篇研究。一共662例EMs患者和937例對照個體納入本Meta分析。

圖1　文獻篩選流程圖

二、Meta分析

各基因模型合并結果及異質性如下：等位基因對比模型(T vs. C)：OR=1.283，95%CI：0.948-1.737，I2=76.1%(圖 2)；雜合子模型(TC vs. CC)：OR=1.181，95%CI：0.919-1.518，I2=0%(圖 3)；純合子模型(TT vs. CC)：OR=1.612，95%CI：0.899-2.889，I2=73.4%(圖 4)；顯性模型(TT+TC vs. CC)：OR=1.320，95%CI：0.932-1.871，I2=52.5%(圖 5)；隱性模型(TT vs. TC+CC)：OR=0.716，95%CI：0.456-1.123，I2=70.4%(圖6)。分析結果顯示，CYP17(-34T/C)基因多態性并沒有增加亞洲人群中EMs的發病風險。

三、敏感性和發表偏倚分析

將上述基因型模型中單個研究逐個排除后重新計算獲得OR值及其95%CI，探討單個研究對于整體分析的影響程度及Meta分析的結果穩健性。結果顯示排除單個研究后，Meta分析結果均未發生顯著變化，提示本研究中Meta分析的結果是穩健、可信的。采用Egger’s test評價其發表偏倚，結果顯示各基因型模型中未發現顯著偏倚。

表1　Meta分析納入文獻的基本資料

圖2　等位基因對比模型(T vs. C)與EMs易感性的Meta分析

圖3　雜合子模型(TC vs. CC)與EMs易感性的Meta分析

圖4　純合子模型(TT vs. CC)與EMs易感性的Meta分析

圖5　顯性模型(TT+TC vs. CC)與EMs易感性的Meta分析

圖6　隱性模型(TT vs. TC+CC)與EMs易感性的Meta分析

討論

EMs的發生發展受到體內性激素水平的影響，而調控性激素水平的藥物也已經被證實對于EMs有一定的治療效果[16-19]。另外，臨床數據表明EMs具有遺傳背景[20]，所以，性激素合成、代謝相關基因的單核苷酸多態性與EMs發生的聯系也被越來越多的研究者關注。

CYP17基因與血清雌激素及孕激素濃度密切相關。一系列研究發現，CYP17(-34T/C)基因多態性與多種婦科疾病易感性有一定聯系，包括子宮內膜癌[21]、乳腺癌[22]以及多囊卵巢綜合征[23]，但其與EMs發生是否相關目前還存在爭議。CYP17在雌激素的生物合成過程中非常重要，其是雌激素合成過程中的限速酶，將孕酮、孕烯醇酮轉化為17α羥孕烯醇酮、雄烯二酮(AND)和脫氫表雄酮，繼而轉化為睪酮、雌二醇、雌酮。當其啟動子-34位堿基T-C突變后，該處堿基序列由CCACT變為CCACC，從而增加了一個CG盒(SP1結合位點)，使得轉錄因子結合位點增加，上調CYP17基因的轉錄水平，增加了酶的活性，最終使雌激素的合成水平升高[5]。高濃度的雌激素為內膜組織異位種植和生長提供有利微環境，促進EMs的發生發展[24]，提示CYP17(-34T/C)基因多態性和EMs易感性存在聯系。然而，這一推論并未在一些臨床病例-對照研究中得到驗證，關于歐洲白種人的研究提示二者無顯著關聯，關于亞洲人群的研究目前還存在爭議[9，15]。因此，本研究中我們利用Meta分析，對已有研究進行匯總，共納入6篇病例-對照研究文獻(662例EMs患者和937例對照)探索亞洲人群中CYP17基因多態性與EMs易感性之間的關系。結果顯示，在亞洲人群中，CYP17(-34T/C)基因多態性與EMs易感性無顯著相關性。

但我們的研究尚存在一些不足，因為本次研究只納入中國大陸、中國臺灣及日本的研究數據，缺少亞洲其它地區的實驗數據；納入的文獻中均以醫院基礎的非EMs患者人群作為對照組，容易受到其它疾病的影響；未提供詳細的基因型分布數據的文獻(如趙欣等[25]對432例EMs患者的研究)不納入本次分析，納入文獻數和樣本量相對較小；并且本次分析中部分基因型模型存在較高的異質性，缺乏對于病例的亞分類是造成高異質性的重要原因，但因為納入文獻中患者生活的環境因素、生活方式、家族史等無法獲得，且同一地區納入分析的文獻不足3篇，無法進行更深入的亞分類分析。

綜上所述，本次Meta分析結果顯示，在亞洲人群中CYP17(-34T/C)基因多態性與EMs易感性并無顯著相關性。但由于目前的臨床病例研究中，缺少生活習慣、環境因素以及生理周期情況等亞分類，且缺少健康人群納入對照，容易出現假陰性的結果等。針對上述不足，本課題組認為需要對CYP17(-34T/C)基因多態性與EMs易感性的關系開展更多設計細致、實施良好的大樣本量病例-對照研究，從而得到更科學、可信的結論。

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[編輯：肖曉輝]

Meta analysis of CYP17 (-34T/C) gene polymorphism and endometriosis susceptibility in Asian population

CHENG Wen，ZHAI Dong-xia，ZHANG Dan-ying，YAO Rui-pin，WANG Ru-qian，YU Chao-qin*

ChanghaiHospitalofTraditionalChineseMedicine，SecondMilitaryMedicalUniversity，Shanghai200433

【Abstract】Objective： To estimate the relationship between CYP17 (-34T/C) gene polymorphism and endometriosis susceptibility in Asian population.

Key words：CYP17；Gene polymorphism;Endometriosis；Meta-analysis

DOI：10.3969/j.issn.1004-3845.2016.06.002

【收稿日期】2015-10-20；【修回日期】2015-12-23

【基金項目】國家自然科學基金重點項目(30930113)

【作者簡介】程雯，女，浙江嘉興人，碩士，住院醫師，中西醫結合臨床專業.(* 通訊作者)