高效液相色譜—柱后衍生熒光光譜法測定蔬菜和水果中6種N—甲基氨基甲酸酯類農藥

魏良勝

摘要 采用高效液相色譜-柱后衍生熒光光譜法測定蔬菜和水果中涕滅威亞砜、涕滅威砜、3-羥基克百威、滅多威等6種N-甲基氨基甲酸酯類農藥。樣品經乙腈提取，以水和乙腈為流動相梯度洗脫。結果表明，6種農藥的分離效果良好，在0.05～2.00 mg/L范圍內線性關系良好，相關系數>0.995，變異系數RSD為2.3%～8.8%，加標回收率為77.1%～82.3%，此法可用于蔬菜和水果中氨基甲酸酯類農藥殘留檢測。

關鍵詞 高效液相色譜；柱后衍生；氨基甲酸酯農藥；蔬菜；水果

中圖分類號 O657.7+2；S481+.8 文獻標識碼 A 文章編號 1007-5739（2018）14-0121-01

氨基甲酸酯類農藥是20世紀50年代推廣應用的有機合成殺蟲劑，具有選擇性強、高效、廣譜、對人畜低毒、易分解和殘留少的特點，常用于蔬菜和水果病蟲害的防治，但氨基甲酸酯類農藥具有致突變、致畸、致癌作用，因而建立一種簡單快速的檢測氨基甲酸酯類農藥的檢測方法尤為重要。目前，檢測氨基甲酸酯類農藥的方法主要有氣相色譜法[1-2]、氣質聯用法[3]、液質聯用法[4]及高效液相色譜-柱后衍生法[5]。由于氨基甲酸酯類農藥熱穩定性差，氣相色譜法適用性不強；液質聯用儀器價格及維護成本昂貴，對操作人員素質要求較高，限制了該法在基層實驗室的使用；而液相色譜-柱后衍生法方法簡單，方法靈敏度較高，應用較為普遍。本文研究了采用固相萃取柱凈化樣品，液相色譜-柱后衍生熒光法測定蔬果中6種N-甲基氨基甲酸酯類農藥的分析方法。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Alliance高效液相色譜超高效液相色譜儀配2475熒光檢測器，美國WATERS公司生產；氮吹儀（Organomation N-EVAP-111）；Best-S30FV 純水機；電子天平TD20001，余姚市金諾天平儀器有限公司生產；Multiquck3（匈牙利博朗）；IKA-T25均質器，艾卡（廣州）儀器設備有限公司生產；IKA RV-8旋轉蒸發儀，艾卡（廣州）儀器設備有限公司生產；一次性注射器、0.22 μm水相濾膜、固相萃取柱，均由上海安譜實驗科技股份有限公司生產。

甲醇、乙腈、二氯甲烷均為色譜純，由默克股份有限公司生產；硼砂、氫氧化鈉、巰基乙醇、氯化鈉、無水硫酸鈉、鄰苯二甲醛均為分析純，由國藥集團化學試劑公司生產。

OPA衍生劑：稱取19.1 g硼砂超聲溶解后，定容至1 000 mL，過0.22 μm濾膜，置于棕色試劑瓶中。稱取50 mg鄰苯二甲醛溶于5 mL甲醇中（此過程注意避光），加至硼砂緩沖液中，再向緩沖溶液中加入100 μL巰基乙醇?；靹颍R用時配制。

標準品：涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、3-羥基克百威、涕滅威、克百威6種標準品購于農業部環境質量監督檢驗測試中心，臨用時用50%甲醇稀釋至 1.00 μg/mL。

1.2 色譜條件

色譜柱：XBridgeRC8 4.6×150 mm，3.5 μm；保護柱：X-BridgeRC8 4.6×2 mm，3.5 μm；色譜柱溫度35 ℃，衍生溫度80 ℃，OPA流速0.30 mL/min，NaOH流速 0.30 mL/min，激發波長340 nm，發射波長455 μm，流動相為乙腈和水，梯度洗脫程序如表1所示。

1.3 樣品前處理

取蔬菜可食部分粉碎后，稱取25.00 g樣品置于燒杯中，加入 50 mL乙腈，勻漿1 min，過濾至已加入約7 g NaCl的具塞量筒中，振搖1 min，靜置30 min，待水相和乙腈相完全分離，吸取上層乙腈相5.00 mL，氮吹至近干，用1 mL甲醇-二氯甲烷（1∶99）溶解，過固相萃取柱，固相萃取柱上端加入適量無水硫酸鈉，并用4 mL甲醇-二氯甲烷（1∶99）活化后，上樣，用4 mL甲醇-二氯甲烷（1∶99）分2次洗脫，收集洗脫液，氮吹至近干，加入1 mL 50%甲醇溶解殘渣，混勻，過0.22 μm濾膜，上機測定。

2 結果與討論

2.1 氮吹

氨基甲酸酯類農藥遇熱易分解，樣品前處理過程中2次氮吹溫度不能太高，且注意不能完全吹干，否則會導致農藥檢測結果偏低。

2.2 固相萃取柱的選擇

一般樣品選用氨基柱凈化，色素含量高的樣品對檢測結果有一定干擾，應選用CARE/NH2固相萃取柱凈化，進一步去除色素。

2.3 線性范圍、相關系數及檢出限

應用本文建立的色譜方法，配制6種N-甲基氨基甲酸酯類農藥的系列標準混合溶液，上機測定，其中濃度為1.00 mg/L的標樣色譜圖見圖1，以質量濃度（mg/L）為橫坐標，峰面積為縱坐標，繪制標準曲線，得到相應的線性回歸方程，同時以三倍信噪比考察了6種農藥的檢出限，具體結果見表2。

2.4 樣品測定、回收率及精密度試驗

應用本文建立的方法測定了香菇菜、卷心菜、蘋果、西瓜中6種N-氨基甲酸酯類農藥殘留情況，4個樣品均未檢出6種N-氨基甲酸酯類農藥，選用卷心菜樣品進行加標回收試驗，卷心菜樣品和樣品加標色譜圖見圖2、3，6種農藥的加標回收率在77.1%～82.3%之間，重復6次測定的相對標準偏差為2.3%～8.8%，可以滿足農藥殘留測定的要求。

3 結論

本文采用高效液相色譜-柱后衍生熒光光譜法同時測定蔬菜、水果中6種N-甲氨基甲酸酯類農藥，目標物用C8柱分離，效果良好，樣品采用固相萃取柱凈化，除雜效率高，目標物回收率理想，檢測靈敏度可以滿足常規檢測的需求，蔬果中其他N-氨基甲酸酯類農藥檢測可參考本方法。

4 參考文獻

[1] 張蘊，吳香倫，汪尤剛，等.磁分散固相萃取-氣相色譜法測定水中8 種氨基甲酸酯類農藥[J].中國衛生檢驗雜志，2016，26（11）：1521-1528.

[2] 江虹.氣相色譜法測定果蔬中6種氨基甲酸酯類農藥殘留[J].海峽預防醫學雜志，2015，21（6）：66-67.

[3] 馬杰，李青，白梅，等.QuChERS前處理與在線凝膠滲透色譜-氣相色譜質譜聯用法測定蔬菜水果中20種農藥殘留[J].食品安全質量檢測學報，2016，7（1）：20-26.

[4] 丁葵英，徐文娟，孫軍，等.液相色譜-高分辨質譜法快速篩查蔬菜中20種氨基甲酸酯類農藥[J].食品研究與開發，2015，36（17）：123-128.

[5] 呂平，杜國冬，韋麗君，等.高效液相色譜-柱后衍生法測定東盟水果中氨基甲酸酯類農藥殘留[J].分析科學學報，2015，31（4）：589-592.