姜黃素聯(lián)合順鉑對(duì)人膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響

孫靜汝 寧方玲

【摘要】目的：觀察姜黃素（curcumin，CUlL）聯(lián)合順鉑（cisplatin，DDP）對(duì)人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251增殖和凋亡的影響。方法：在體外培養(yǎng)的人膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251細(xì)胞，采用不同濃度的姜黃素聯(lián)合順鉑處理24h，MTT法檢測(cè)其對(duì)U251細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用，流式細(xì)胞儀檢測(cè)其對(duì)細(xì)胞周期和凋亡的影響。結(jié)果：?jiǎn)斡媒S素處理24h可濃度依賴性抑制人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251的增殖，5umol/L對(duì)U251細(xì)胞增殖無(wú)明顯作用。姜黃素不同濃度與順鉑3ug/mL聯(lián)合應(yīng)用對(duì)U251細(xì)胞增殖抑制率明顯高于姜黃素單用。20umol/L姜黃素將細(xì)胞聚結(jié)在G2/M期，3umol/L順鉑將細(xì)胞聚結(jié)在s期，并誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡增加（P<0.01），兩者聯(lián)合應(yīng)用具有相加或協(xié)同作用。結(jié)論：姜黃素聯(lián)合順鉑抑制人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，且兩者聯(lián)合應(yīng)用具有相加或協(xié)同作用，可能通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期來(lái)實(shí)現(xiàn)的。

【關(guān)鍵詞】姜黃素 順鉑 膠質(zhì)瘤

順鉑是治療膠質(zhì)瘤最有效的化療藥物之一，但由于治療過(guò)程中伴發(fā)的嚴(yán)重毒副作用如耳毒性、神經(jīng)毒性等，使其應(yīng)用受到很大限制。因而，如何減弱該類(lèi)藥物的毒副作用和增強(qiáng)其化療敏感性備受關(guān)注。姜黃素是從姜黃根莖中提取的一種多酚類(lèi)化合物。國(guó)內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)姜黃素能夠通過(guò)多種途徑對(duì)多種腫瘤具有抑制作用，并且能夠提高腫瘤對(duì)化療藥和放射治療的敏感性。目前，對(duì)于姜黃素聯(lián)合化療藥物順鉑誘導(dǎo)人腦膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞凋亡尚未見(jiàn)報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)觀察姜黃素聯(lián)合順鉑用藥治療膠質(zhì)瘤的效應(yīng)和可能機(jī)制，為腦膠質(zhì)瘤的綜合治療復(fù)方制劑的制備提供理論依據(jù)。

1材料與方法

1.1材料人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株U251購(gòu)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫(kù)。姜黃素購(gòu)自美國(guó)Sigma公司，MTT購(gòu)自美國(guó)Sigma公司。細(xì)胞周期與細(xì)胞凋亡檢測(cè)試劑盒購(gòu)自上海索萊寶生物科技有限公司。

3討論

近年來(lái)，體內(nèi)外研究結(jié)果證實(shí)姜黃素具有很強(qiáng)的抗腫瘤活性，對(duì)乳腺癌、骨肉瘤、肺癌、胃癌等均有抗腫瘤效應(yīng)。其毒副作用小，用于抗腫瘤治療前景廣闊。膠質(zhì)瘤是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見(jiàn)的原發(fā)性腫瘤，其診斷和預(yù)后均不理想。單用DDP化療，其療效并不滿意且毒副作用高，復(fù)發(fā)風(fēng)險(xiǎn)大。因而，如何適當(dāng)減少化療藥劑量，提高化療藥物的療效并減少?gòu)?fù)發(fā)值得深入研究。

本研究發(fā)現(xiàn)姜黃素作用24h能夠濃度依賴性抑制U251細(xì)胞的增殖，與順鉑聯(lián)用，其對(duì)細(xì)胞增殖抑制效率明顯提高，兩者具有協(xié)同作用。并且聯(lián)合應(yīng)用細(xì)胞凋亡顯著增加。姜黃素和順鉑聯(lián)合應(yīng)用對(duì)膠質(zhì)瘤U251細(xì)胞增殖和凋亡具有協(xié)同作用。 細(xì)胞周期失控在腫瘤的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要的作用，阻滯細(xì)胞周期可抑制細(xì)胞增殖并促進(jìn)細(xì)胞凋亡|q。姜黃素可通過(guò)細(xì)胞周期的調(diào)控促進(jìn)細(xì)胞凋亡，本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，姜黃素與順鉑聯(lián)用24 h，GO/G1和s期明顯增加，而G2/M期明顯減少，兩者聯(lián)合用藥與單用姜黃素或順鉑比較，G2/M期細(xì)胞比例明顯下降，表明姜黃素可增加膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)順鉑的敏感性。 本研究證實(shí)姜黃素聯(lián)合順鉑可通過(guò)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期抑制細(xì)胞增殖和誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，兩者聯(lián)用具有一定的增效性。這些結(jié)果為姜黃素的抗腫瘤效應(yīng)提供了新的研究證據(jù)，并為兩種藥物的聯(lián)合使用及復(fù)合制劑的制備提供了實(shí)驗(yàn)依據(jù)。