雞新城疫抗體檢測(cè)技術(shù)在診斷中的實(shí)踐分析

譚逢誼

摘 要：我國(guó)經(jīng)濟(jì)建設(shè)進(jìn)程不斷加快，使養(yǎng)殖業(yè)有較好的發(fā)展，對(duì)我國(guó)經(jīng)濟(jì)發(fā)展具有較大的促進(jìn)作用。其中，在對(duì)家禽進(jìn)行養(yǎng)殖的過(guò)程中，易引發(fā)不同疾病，尤其在對(duì)雞的養(yǎng)殖過(guò)程中，易出現(xiàn)雞瘟，對(duì)人們健康造成一定的影響。其中新城疫疾病，主要癥狀有神經(jīng)紊亂、呼吸困難以及漿膜出血等，嚴(yán)重危害雞的健康生長(zhǎng)。新城疫抗體檢測(cè)技術(shù)能夠?qū)υ摬〔【M(jìn)行有效抑制，在診斷的過(guò)程中有較好的實(shí)踐效果。

關(guān)鍵詞：雞新城疫;抗體檢測(cè)技術(shù);實(shí)踐

我國(guó)在對(duì)雞飼養(yǎng)的過(guò)程中，雞新城疫疾病對(duì)雞的健康生長(zhǎng)造成較大的威脅，在實(shí)踐過(guò)程中存在雞非典型新城疫及新城疫強(qiáng)毒株感染與免疫問(wèn)題，是雞發(fā)病的主要因素。若雞體內(nèi)新城疫抗體無(wú)法達(dá)到相應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)，便會(huì)引發(fā)新城疫疾病，這就需要采用新城疫抗體檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行有效的診斷，以此在實(shí)踐過(guò)程中有較好的應(yīng)用效果，具有較高的診斷價(jià)值。

一、新城疫病毒概述及結(jié)構(gòu)

1.新城疫病毒概述

新城疫病毒也作為雞瘟，是新城疫的病原體，該病毒有囊膜的單股負(fù)鏈RNA病毒，屬于副粘病毒科，其具有較大的傳染性，能夠引起家禽呼吸道、消化道病變，有較高的出血量，在較大程度上會(huì)對(duì)家禽類動(dòng)物有較大的傳染性。

2.新城疫病毒結(jié)構(gòu)

新城疫病毒主要呈現(xiàn)出球狀，直徑約為300 nm，其結(jié)構(gòu)模式為，兩個(gè)外模蛋白、基質(zhì)蛋白以及核殼體。此外，該病毒RNA基因組長(zhǎng)度約為15 kb，編碼有6個(gè)蛋白，外模標(biāo)案蛋白為融合蛋白，可以有效與靶細(xì)胞膜進(jìn)行有效的融合，以此使病毒大量復(fù)制。

二、影響雞新城HI抗體檢測(cè)的因素

1.溫度的影響

在對(duì)新城疫HI抗體進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中，若室溫較高，會(huì)在一定使紅細(xì)胞解凝時(shí)間減少，若室溫較低時(shí)紅細(xì)胞解凝時(shí)間增加。若室溫過(guò)高時(shí)，應(yīng)將不同試劑放置在4度的環(huán)境中，以便備用。因室溫較高時(shí)會(huì)加快反應(yīng)速度，因此應(yīng)使判定結(jié)果提前，不能在解凝過(guò)程中進(jìn)行判定，否則會(huì)使抗體水平無(wú)法相應(yīng)降低。若溫度較低時(shí)，需要對(duì)HI反應(yīng)時(shí)間實(shí)施有效的延長(zhǎng)。

2.抗原的影響

抗原也會(huì)對(duì)HI 抗體檢測(cè)產(chǎn)生一定的影響，若抗原老舊時(shí)，在對(duì)紅細(xì)胞凝聚的過(guò)程中，會(huì)出現(xiàn)下降的狀態(tài)，并且使凝集后解凝時(shí)間變短，這對(duì)檢測(cè)雞新城疫抗體不利，因此需要采用新的抗原對(duì)雞新城疫HI抗體實(shí)施有效的檢測(cè)。

3.雞紅細(xì)胞濃度的影響

在對(duì)雞新城疫抗體進(jìn)行檢測(cè)的過(guò)程中，會(huì)使用到不同比例的懸浮液，比如采用1%的紅細(xì)胞懸浮液、0.5的紅細(xì)胞懸浮液，無(wú)論何種懸浮液均需要在配制的過(guò)程中保證其準(zhǔn)確性。一般情況下，紅血球濃度相對(duì)較大，其HI值相對(duì)較小，反之HI值較大。在此過(guò)程中，應(yīng)當(dāng)對(duì)紅細(xì)胞離心過(guò)程中，離心速度與時(shí)間的有效控制，只有這樣才能配制出準(zhǔn)確的懸浮液，同時(shí)懸浮液在使用的過(guò)程中需要混合均勻，以此確保濃度的均勻。

三、新城疫發(fā)病癥狀

由于一些因素的影響，我國(guó)不同地區(qū)雞的飼養(yǎng)出現(xiàn)了一些問(wèn)題，發(fā)病率較高，甚至一些地區(qū)發(fā)病率高達(dá)90%，死亡率也在逐年上升，對(duì)雞的健康養(yǎng)殖造成較大威脅。其主要癥狀有：呼吸困難、體溫高、排不同顏色稀便以及下痢等，甚至還會(huì)出現(xiàn)兩腿麻痹、不能站立以及神經(jīng)等癥狀，這在較大程度上威脅雞群的健康生長(zhǎng)。

四、剖檢變化

氣管出血、喉頭以及小腸一些部位出現(xiàn)點(diǎn)狀、斑塊狀出血，甚至出現(xiàn)潰瘍;腺胃乳頭、腺胃與肌胃交界處出血，盲腸扁桃體出血、潰瘍、腫脹;脾臟腫大有白色壞死點(diǎn);腎、肺、肝基本正常，無(wú)明顯變化。

五、實(shí)驗(yàn)室診斷

1.細(xì)菌涂片和分離培養(yǎng)

將病雞脾臟、肝臟以及腦組織取出并作為組織觸片，通過(guò)革蘭氏染色與美蘭染色鏡檢，檢測(cè)結(jié)果顯示為發(fā)現(xiàn)任何細(xì)菌。再將上述病料接種SS瓊脂平板、普通瓊脂平板，在37度環(huán)境中24 h，結(jié)果發(fā)現(xiàn)無(wú)細(xì)菌。

2.病毒分離

取出死亡雞腦、脾臟，研磨后凍融2次，用含有青霉素、鏈霉素的無(wú)菌生理鹽水進(jìn)行稀釋，其稀釋比例為1：5，再將其4000r/min離心15 min，將上清液取出，放置于4度的冰箱中12 h，以作備用。首先進(jìn)行雞胚接種：將病料進(jìn)行雙抗處理，并通過(guò)尿囊腔接種30枚11日齡的SPF雞胚，一般情況下將每胚量控制在0.2 ml，最用量石蠟將其封孔進(jìn)行孵化，清除死亡雞胚，4 h照蛋一次，把死亡雞胚放置在4度的冰箱中進(jìn)行冷藏。其次進(jìn)行病毒鑒定：（1）病毒血凝試驗(yàn)：在進(jìn)行血凝試驗(yàn)的過(guò)程中，首先取出雞胚集中的尿囊液，通過(guò)微量法將血凝版進(jìn)行一定比例的稀釋，同時(shí)設(shè)置生理鹽水對(duì)照孔，再向每個(gè)孔內(nèi)加入1%的紅細(xì)胞，需要注意的是需要在雞的體內(nèi)獲取紅細(xì)胞，振蕩搖勻，并放置于25度的環(huán)境中，40 min觀察結(jié)果。待生理鹽水對(duì)照孔中的紅細(xì)胞沉到孔底后對(duì)結(jié)果實(shí)施判定，如果有一定的凝集性，表明雞在發(fā)病的過(guò)程中，病原體有較高的血凝性;（2）在判定結(jié)果中，前4孔依然存在不同程度的凝集，主要是因ND陽(yáng)性血清降低所致，且病毒濃度相對(duì)較高，從第5孔開(kāi)始病毒對(duì)紅細(xì)胞的凝集作用被ND陽(yáng)性血清所抑制，在雞腦脾分離出的病毒具有對(duì)膿細(xì)胞凝集的特點(diǎn)，同時(shí)還被ND陽(yáng)性血清抑制，表明分離病毒與NDV有一定的相關(guān)性。具體數(shù)據(jù)由表1所示。

3.抗體檢測(cè)

在病雞廠中按照5%采樣30只，實(shí)施有效的ND抗體檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果顯示，30只病雞有27只出現(xiàn)抗體表現(xiàn)出異常上升，結(jié)合臨床癥狀與剖檢變化，表明雞群感染了ND強(qiáng)度。

六、發(fā)生非典型ND的緊急措施

發(fā)生非典型ND方法主要從以下幾個(gè)方面入手：1.通過(guò)接種疫苗對(duì)未被傳染的雞群畸形疫苗的接種，一般情況下采用倍量Clone-30疫苗進(jìn)行接種，也可以使用倍量IV疫苗滴鼻點(diǎn)眼的方法提升抗體，還能夠通過(guò)肌肉注射的方式注射油乳劑滅活苗，此外還能夠通過(guò)口服的方式V4弱毒疫苗實(shí)施有效預(yù)防。在對(duì)雞群進(jìn)行預(yù)防的過(guò)程中，應(yīng)根據(jù)實(shí)際病情針對(duì)性選擇預(yù)防藥物與接種方法，不宜使用大劑量的I系疫苗，主要是因此種疫苗會(huì)使雞群產(chǎn)生一定的應(yīng)急反應(yīng)，對(duì)雞的下蛋率造成較大的影響，并且會(huì)減緩雞群的恢復(fù)時(shí)間，在此基礎(chǔ)上也增加了死亡率;2.將感染較為嚴(yán)重的病雞隔離診治，并對(duì)已經(jīng)死亡病雞通過(guò)焚燒的方式避免病毒的蔓延，同時(shí)還需要對(duì)飼養(yǎng)環(huán)境進(jìn)行有效的消毒，以此確保飼養(yǎng)環(huán)境不被病毒侵害，使雞群有一個(gè)良好的生長(zhǎng)環(huán)境;3.在進(jìn)行疫苗的接種時(shí)，應(yīng)只對(duì)健康雞進(jìn)行接種，患病雞不能進(jìn)行接種，能夠使用抗血清以及抗ND卵黃液實(shí)施有效的治療，同時(shí)還能在飼料與水中添加抗菌類藥物，以此可有效防止繼發(fā)感染細(xì)菌病，為雞身體素質(zhì)的提升奠定良好的基礎(chǔ)。

七、雞新城疫抗體檢測(cè)技術(shù)在診斷中的應(yīng)用

根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行ND抗體檢測(cè)為基礎(chǔ)的雞場(chǎng)，以此能夠有效提升免疫接種的密度，對(duì)質(zhì)量的提升具有較大的促進(jìn)作用，以此使雞體內(nèi)的不同抗體具有較高的穩(wěn)定性，比如循環(huán)抗體、高滴度的中和抗體，由此可以選擇一下免疫程序：10日齡雞使用NDII系或者IV系滴鼻點(diǎn)眼首免，25日齡采用II系疫苗進(jìn)行再次滴鼻點(diǎn)眼，并且在此基礎(chǔ)上進(jìn)行肌肉注射ND油乳劑滅活苗，一般情況下注射量保持在0.3 ml/只;60日齡雞進(jìn)行聯(lián)苗注射，還可以進(jìn)行弱毒注射;120日齡雞聯(lián)苗或者油苗注射，種雞在350日齡實(shí)施二次油苗接種。

1.確定雛雞首免日齡

鄒雞一般在母源抗體消失或者接近消失時(shí)實(shí)施首免，以此能夠得到較為理想的免疫效果。一般情況下對(duì)鄒雞在1日齡時(shí)進(jìn)行采血，并對(duì)HI效價(jià)進(jìn)行檢查。若是大型、高密度的飼養(yǎng)場(chǎng)中，抽樣率應(yīng)大于0.1%，若雞群越小，抽樣率越大，一般抽樣率為2%最為理想。通過(guò)一定的計(jì)算求出HI抗體效價(jià)均值，再通過(guò)公式進(jìn)行有效的推算，以此計(jì)算出首免日齡，首免日齡一般為4.5（1日齡HI抗體效價(jià)均值-4）+5。比如，某地區(qū)某批雛雞1日齡Hl抗體效價(jià)均值為6log2，表明其首免日齡=4.5（6-4）+5=14。

2.首免后定期抽檢，適時(shí)強(qiáng)化免疫

首免后10 d采取血樣進(jìn)行抽樣檢查，若IH抗體效價(jià)均值降至4log2以下，需要進(jìn)行二免，或以下時(shí)進(jìn)行二免。二免后15 d在進(jìn)行血樣的采取，若抗體效價(jià)在5log2以下，應(yīng)進(jìn)行二次疫苗的接種，之后需要將IH效價(jià)保持在5log2以上，同日齡的種雞與其他雞相比應(yīng)高一個(gè)滴度，若在該標(biāo)準(zhǔn)以下，需要及時(shí)采取疫苗的接種，直到IH抗體效價(jià)均值保持在2log2以上為止，由此可以斷定免疫發(fā)揮了其應(yīng)有的作用，如若不需要對(duì)其進(jìn)行補(bǔ)免。

八、結(jié)語(yǔ)

綜上所述，我國(guó)在進(jìn)行雞的飼養(yǎng)過(guò)程中，由于一些外部因素的影響，使雞發(fā)生的疾病越發(fā)增多且復(fù)雜，其中雞新城疫疾病是危害雞群健康發(fā)展的疾病之一，所以需要采用雞新城疫抗體檢測(cè)技術(shù)對(duì)新城疫抗體實(shí)施有效的監(jiān)測(cè)，能夠保證監(jiān)測(cè)的準(zhǔn)確性，再采取有效的措施實(shí)施針對(duì)性診斷治療，以此有效提高雞群的健康生長(zhǎng)。

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