賴流慶 郭蕾 馬莉
【摘要】目的:探究膠體金免疫結合試驗在疾病預防控制領域檢驗中的臨床應用。方法:分別在多種不同的病毒檢測中應用膠體金免疫結合試驗,最后分析檢測結果。結果:膠體金免疫結合試驗在各類疾病的防控中均有準確檢測結果。結論::膠體金免疫結合試驗在疾病預防控制領域檢驗中的臨床應用效果顯著,值得推廣應用。
【關鍵詞】膠體金免疫結合試驗;疾病預防控制領域;檢驗;臨床應用
【中圖分類號】R821.4+2 ? ? ?【文獻標識碼】A ? ? 【文章編號】2095-6851(2019)08-070-01
膠體金免疫結合試驗直接利用商品試劑便達到了檢測的目的,不需要應用其他儀器,在數分鐘內經肉眼觀察到結果[1],為臨床提供可靠參考依據,有著較高的應用價值。本文從膠體金免疫技術概述、膠體金免疫結合試驗檢測原理和膠體金免疫結合試驗在疾病預防、控制、檢驗等方面的具體應用展開分析,現報道如下。
1 膠體金免疫技術概述
在還原劑枸櫞酸鈉作用下和靜電作用下,膠體金是氯金酸(HAuCl4)分別可以聚合成一定形狀大小的金顆粒和一種穩定的膠體狀態,這是被稱為膠體金。根據資料文獻報道,在弱堿條件下膠體金會帶有負電荷,這時與帶正電荷的蛋白質相互結合,發生了靜電結合反應,不會影響蛋白質的生物特性。膠體金除了與蛋白質結合,同樣能與諸多生物大分子如SPA等相結合。根據膠體金的物理性質并和生物學特性,能夠廣泛用于組織學、病理學和細胞生物學等行業領域中。此外我們對結合試驗檢測原理進行分析。經過載體微孔濾膜包可明確膠體金免疫結合試驗中是抗體或是抗原,在毛細管作用下待檢驗的標本,其濾膜上的抗體或抗原和標本中的抗原或抗體相結合,最終需要使用膠體金結合物輔助檢測。因此快速免疫金滲濾法和免疫層析法是現代臨床醫學檢驗的重要手段,前者應用范圍最為廣泛,表現出了快速、簡便、準確和無污染等優勢。
2 膠體金免疫結合試驗在疾病預防控制領域檢驗中的臨床應用
2.1 細菌性疾病的檢驗中膠體金免疫結合試驗的應用
首先檢測鼠疫耶爾森菌。快速免疫金滲濾法能夠快速準確檢測出結果,根據耶爾森菌不與小腸結腸耶菌發生交叉反應這一特性,檢測靈敏度、特異性高,結果顯示2.4×105cfu/ml為檢出最低限。1.0×105cfu/ml為檢測試驗的靈敏度,使用F1抗體金探針得到F1的10ug/L為檢出最低限,開始檢驗面粉、奶粉、土壤、酵母粉等相關材料,結果一致。其次檢測金黃色葡萄球菌。金黃色葡萄球菌檢測結果顯示3.3×106cfu/ml~6.1×106cfu/ml為最低檢出限范圍。總計檢出12株大腸埃希菌、18株不產毒素金黃色葡萄球菌,并有1株發生交叉反應。最后是檢測沙門菌。使用抗原吸附法檢測沙門菌,根據在封閉環境下抗沙門菌會和其他腸道桿菌發生交叉反應[2],結果顯示免疫層析12.1×106cfu/ml為最終靈敏度。試驗中菌懸液為108~1011cfu/ml實施檢測未現鉤狀效應。
2.2 膠體金免疫結合試驗對病毒性疾病的檢驗應用
首先檢測艾滋病抗體。通過膠體金免疫結合試驗來檢測申報注冊艾滋病抗體快速檢測試劑,并做出臨床評估,結果提示靈敏度高達100.00%的樣本試劑均為強陽性,共檢測15家申報注冊艾滋病抗體,在健康獻血員樣品中的檢測特異性96.8%~100.0%,試劑檢測靈敏度在73.7%~94.8%范圍之間。其次檢測柯薩奇病毒。因為柯薩奇病毒和多種疾病的發生有關。例如手足口病,因此研制出層析診斷試紙條用于檢驗中。結果顯示靈敏度為96.4%,特異性為66.8%,與執行標準RT-PCR檢測結果差距不大。最后檢測流行性出血熱抗體。使用膠體金免疫結合試驗對檢測的所有患者樣品血清均呈陽性,靈敏度為97.9%。對家貓血清、黑線姬鼠、兔免疫血清進行檢測,結果呈陰性。
2.3 膠體金免疫結合試驗對寄生蟲病的檢驗應用
檢測血吸蟲抗體,使用快速免疫金滲濾法結果靈敏度為96.8%,對急性血吸蟲患者檢測血清標本靈敏度為99.9%,對慢性患者檢測血清標本靈敏度為97.9%,對晚期患者檢測血清標本靈敏度為92.8%。
2.4 膠體金免疫結合試驗對其他微生物疾病的檢驗應用
檢測梅毒。膠體金免疫結合試驗可檢驗梅毒,國外檢測梅毒經常使用的試劑為梅毒螺旋體和TPPA 試劑,相比之下我國的膠體金試劑盒檢測靈敏度均遠超出[3]。在孕婦血清、紅斑狼瘡患者和正常體檢者中應用膠體金免疫結合試驗檢測,均取得理想效果。
3 結語
綜上所述,當前臨床采用的膠體金免疫結合試驗是在酶免疫結合試驗基礎上發展起來的一種新型固相標記免疫測定技術,具有單份測定、簡單方便、快速操作等優勢,已經廣泛用于臨床檢驗中,受到了廣大醫學工作者的認可和肯定。
參考文獻:
[1] 張峰, 李建新, 戰祥彩, et al. 膠體金免疫結合試驗在疾病預防控制領域檢驗中的應用分析[J]. 中外醫療, 2012, 31(34):11-11.
[2] 趙春. 疾病預防控制領域檢驗中膠體金免疫結合試驗的應用探析[J]. 中國實用醫藥, 2015(19).
[3] 章小雨, 戴曉愛. 免疫膠體金技術在醫學檢驗領域的應用與進展[J]. 實驗與檢驗醫學, 2014(3):279-281.