不同環節豬群豬繁殖與呼吸綜合征監測結果比較分析

摘要：豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS）又名藍耳病，是一種具有免疫抑制性，對繁殖系統與呼吸系統危害嚴重的豬群傳染病。其中的高致病株，從2006 年以來曾經給我國的養豬業造成了極其嚴重的損失。目前PRRS在豬場的流行范圍仍然很廣，經濟損失難以估量，勢必成為今后豬場凈化的重要病種，而凈化又需要可靠的監測結果作為技術支撐。

關鍵詞：豬繁殖；監測；呼吸綜合征；對比

由于目前繁殖與呼吸綜合征（PRRS）流行毒株與變異比較復雜，其疫苗缺乏基因標記等技術，給監測-凈化工作帶來不少困擾。同時，不同采樣環節、樣品種類-檢測方法所獲得的藍耳病監測結果，也存在部分顯著差異。本文根據豬繁殖與呼吸綜合征凈化標準要求，試就現階段養豬業技術水平差異較大的情況下，對豬繁殖與呼吸綜合征的不同采樣環節與樣品種類、檢測方法所獲得的監測結果，進行對比研究，以便尋找最佳的采樣策略，應用于豬繁殖與呼吸綜合征流行狀況的監測活動指導。通過對檢測結果的研究分析，認為當前豬繁殖與呼吸綜合征區域性監測的最適采樣點在屠宰環節，以病原學樣品與檢測方法進行，并以擴繁場的病原學監測結果作為補充。

為了監測豬繁殖與呼吸綜合征的區域性流行狀況，作為今后場群凈化的依據，筆者從生豬養殖環節、屠宰環節與無害化處理環節，分別采集了病原學與血清學樣品，進行監測。采用了抽樣統計方法對采樣方案進行了預先設計，對不同采樣策略獲得的結果，進行了差異檢驗，以對比不同采樣環節、樣品種類、檢測方法所得結果之間，是否存在顯著差異，并通過流行病學調查確定原因，以作為采樣策略優選的客觀依據。

1 材料

1.1 血清學樣品

全部源自湖南省衡陽市范圍內豬場養殖的豬群，從生豬養殖環節采集，來自該市7縣市區37個大型豬場。

1.2 病原學樣品

以在生豬養殖、屠宰、無害化處理環節隨機采集的脾臟為檢樣，全部源自湖南省衡陽市范圍內養殖的豬群。屠宰環節樣品涉及該市7縣市區64個豬場，無害化處理環節樣品涉及該市8縣市區203個豬場（三年內有部分豬場重復采樣）。養殖環節病原學樣品為淋巴結，來自前述37個大型豬場中的30個豬場暫存冰庫的病死豬。

2 方法

2.1 病原學檢測方法

2020年11月—2021年3月上旬無害化處理環節病原學樣品，以及2022年3月屠宰環節病原學樣品，2022年5月生豬養殖環節病原學樣品，均只采用通用型實時熒光PCR檢測試劑盒；2022年3月至12月的無害化處理環節病原學樣品，對其中通用型熒光PCR檢測陽性樣品，采用HP-PRRS熒光PCR檢測試劑盒再次檢測。

2.2 血清學檢測方法

間接ELisa法

2.3 抽樣設計

無害化處理環節在衡陽市現有的2個病死動物無害化處理中心每個月隨機抽樣10～30份。

屠宰環節在衡陽市25個屠場隨機采樣，每個來源不同豬場的屠宰豬平均采集10份樣品，計劃每次采集28個豬場280份樣品。衡陽市全部屠宰場點只有54個，可供應出欄肥豬的豬場達2 844個，在上述25個屠宰場隨機確定抽樣日期與屠宰豬群，每個豬場采集10頭豬的組織或血樣。

生豬養殖環節因生物安全與采樣技術限制，只在大型豬場采集，為非隨機抽樣。每場平均采集10份血清。部分豬場采集了病死豬淋巴結，作為病原學檢樣。

2.4 統計學分析

采用卡方檢驗進行不同組間的差異分析，根據豬場是否檢出核酸陽性個體劃分為陽性場與陰性場，比較豬場場群水平陽性率差異。

3 結果與分析

3.1 檢測結果

（見下頁表1）

3.2 差異性分析

基于目前生物安全顧慮，動物防疫機構技術人員不能進入豬舍采樣；生豬養殖環節只能依靠技術實力較強的大型豬場內部采集病原學、血清學樣品，因此樣品只能代表大型豬場的情況；同時，Elisa法監測目前缺少鑒別免疫/感染抗體的試劑盒，無法區分抗體陽性是由感染或免疫造成，因此本文中，陽性場均以檢出核酸陽性為準。不做血清學監測的顯著性差異檢驗，只對隨機抽樣的無害化處理環節與屠宰環節病原學樣品的豬場陽性率進行檢驗對比。

（見下頁表3）

經檢測結果統計分析，屠宰環節的豬場陽性率均高于無害化處理環節，兩者之間存在極顯著差異。

4 藍耳病（PRRS）流行狀況監測的不同采樣策略的分析

4.1 影響因素分析

第一，豬繁殖與呼吸綜合征自身特點

豬繁殖與呼吸綜合征病毒不是終身帶毒的疫病，在封群飼養200 d以上，陽性場可以在病原學上群體轉陰[1]。在免疫抑制等因素影響下，會以低水平循環感染的形式存在，為通過病原學檢測發現陽性個體/陽性豬場，提供了可能性[2]。

根據2022年3—12月監測（見表1與表2），湖南省衡陽市從無害化處理環節病死豬中檢出的高致病株只占全部PRRS陽性個體的13.64%（9/66），說明該市區域范圍以慢性經過的PRRS經典株為主。

2022年5月筆者對申報非洲豬瘟無疫小區的37個大型豬場附帶進行了藍耳病病原學與血清學監測，病原學結果發現，其中30個豬場收集的110份暫存病死豬淋巴結的PRRS核酸均為陰性（這些暫存病死豬最終將由無害化處理中心收集處理）；37個豬場中12個非免疫場中有6個檢出了PRRS抗體，抗體陽性率在25%～50%之間；對其中4個非免疫抗體陽性豬場收集到的病死豬12份淋巴結檢測核酸結果全部陰性；說明無害化處理環節采樣，可能漏過部分飼養管理水平高、死淘率低的PRRS陽性豬場；經典株感染豬會有較大機會以臨床健康、亞健康的狀態進入屠宰環節，這也是該市屠宰環節中的豬場病原學陽性率高于無害化處理環節，且存在差異極顯著的基本原因。因此，在無害化處理與屠宰環節PRRS病原學監測中，個體陽性率差異不顯著的情況下，要更可靠掌握區域內PRRS陽性豬場的分布范圍，在屠宰環節采樣監測獲得豬場陽性率比無害化處理環節更適宜。

第二，檢測技術因素

血清學方法：考慮到目前檢測PRRS抗體的ELISA試劑盒都以保守性好的N蛋白作為包被抗原，無法區分感染抗體與免疫抗體，因此抗體陽性檢測結果在結合問卷調查豬場免疫程序的情況下，可以確認非免疫豬場的感染狀況；例如2022 年5 月37個大型豬場集中監測中發現，有6個非免疫抗體陽性場，其中母豬場1個，自繁自養場2個，肥育豬場3個。而對免疫豬場的情況，需要結合抗體S/P值與離散度，結合保育階段死淘率，進行逐個豬場的計算分析。因此無論養殖環節或屠宰環節采集的血清樣品—抗體檢測方法，目前對于藍耳病區域性流行狀況大批量監測有局限性，只能作為場群內部層面的監測選項之一。

病原學方法：由于以往豬繁殖與呼吸綜合征病毒變異較多[3]，造成PRRS疫苗品種與疫苗株相應較多，又極少采用基因標記技

術[4]，因此目前難以區別疫苗株與野毒株。而在現行豬場PRRS免疫/非免疫凈化標準中，病原學檢測結果是否陰性是重要的判定條件。

第三，人工技術性干預因素

由于ASF疫情的嚴重沖擊，湖南省衡陽市豬場從2021年下半年起普遍采取了封群飼養的措施，以保障各場生物安全。這為阻斷PRRS病毒進一步變異空間，并為實現種母豬場封群200 d后群體病原學轉陰創造了有利條件。

根據顯著性差異檢驗結果可知，無害化處理環節2020年11月—2021年3月，與2022年3—12月的兩個時期病原學監測結果，個體與豬場陽性率沒有顯著性差異，說明我市PRRS感染死亡情況在2020年11月—2022年12月保持穩定。

而2022年3—12月與2023年3—12月無害化處理環節監測的病原學個體/豬場陽性率對比，均有顯著差異，呈現下降趨勢；而同期屠宰環節兩年的病原學監測結果，個體/豬場陽性率也呈現趨于顯著差異的下降趨勢。在衡陽市養豬業從2021年下半年以后普遍實行封群隔離飼養已達2年以上的情況下，是否能夠從顯著性差異角度證實封群飼養對PRRS的凈化效果，有待今后更多的監測

結果。

4.2 結論

根據以上分析，豬繁殖與呼吸綜合征的區域性監測，在無害化處理環節與屠宰環節個體陽性率之間差異不顯著的情況下，為了更可靠掌握代表實際流行范圍的場群陽性率，采樣策略宜以屠宰環節+病原學樣品為主要采樣策略，無害化處理環節病原學監測作為參考。為了做到監測對象全面覆蓋，考慮到屠宰環節采樣無法將種/母豬場納入監測范圍，對于少數種/母豬場，可以通過監管性監測中進行的相關病原學監測來完成全面覆蓋。

豬場內部監測方面，非免疫場可以通過PRRS抗體檢測發現感染陽性。而有條件的免疫場，目前可以通過不同類別存欄豬扁桃體、新生仔豬斷尾血等作為病原學檢樣，或分析抗體水平離散度與斷奶仔豬死淘率解決。

今后豬繁殖與呼吸綜合征以及其他病種的區域性流行趨勢分析與防控措施效果評估，可以采用不同時間段的場群病原學陽性率是否存在顯著性差異，進行客觀判斷。

5 存在的問題與改進建議

本次監測采用的病原學檢樣為脾臟與淋巴結，相比扁桃體，陽性率結果可能有所低估，尤其是個體陽性率。

PRRS區域性監測的樣品選擇，宜在不同環節統一樣品種類與檢測方法，使檢測結果具有更好的可比性。目前PRRS凈化的檢測標準要求的PRRS病原學陰性，采用的病原學檢樣是病毒存續時間最長的扁桃體。如果在屠宰環節采集待宰豬扁桃體，需要加強動物防疫機構的采集技術培訓。

5.1 無害化處理環節病原學監測

第一，預警監測：對收集病死豬數量異常增多，且其中藍耳病陽性率異常偏高的情況，通過緊急病原學監測提早發現新毒株，進行預警。

第二，危害程度評估：PRRS在無害化處理環節病死豬中的個體陽性率，可以作為評估其危害程度的重要指標；通過無害化收集-處理平臺獲得的病死豬數據，乘以該病種在其中的陽性占比，可以得出較為準確的直接致死數。在二重/多重感染的情況下，可以考慮采用各病種在單獨發病情況下的致死率中位數，在二重/多重感染中進行權重計算。

5.2 對其他豬群疫病區域性監測的啟示

對于防控效果較好、致死率較低的病種，區域性流行狀況的監測以屠宰環節病原學/血清學監測為宜。■

參考文獻：

[1] 趙小月，張格，汪悅，等2018-2019年河南地區豬繁殖于呼吸綜合征病毒分子流行病學調查[J]中國獸醫學報，2020，40（12）：2286-2292.

[2] 王大民，趙勝杰，杜松獻，等.2019年河南省豬繁殖于呼吸綜合征抗體與病原監測[J]中國動物檢疫，2020，37（5）：5-8.

[3] 楊漢春，周磊，周信榮.2020年豬病流行情況與2021年流行趨勢及防控對策[J]豬業科學，2021，38（2）：50-52.

[4] 王景成，李兆華，李志杰，等.豬藍耳病在我國的流行現狀及防控新進展[J].豬業科學，2019，36（9）：102-205.

收稿時間：2024-12-11

作者簡介：肖興（1971—），男，本科，高級獸醫師。研究方向：養殖技術、動物防疫。

通訊作者：唐金花（1977—），女，本科，高級獸醫師。研究方向：獸醫研究。