宮腔灌注富血小板血槳在薄型子宮內(nèi)膜患者冷凍胚胎移植周期中的療效觀察

【中圖分類號(hào)】R711.74 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】2096-2665.2025.15.0032.04

DOI：10.3969/j.issn.2096-2665.2025.15.011

Observationonthe therapeuticefectofintrauterineperfusionofplatelet-ichplasmainthefrozenembryotransfercycleofpatints with thin endometrium

LiLushan’，HanQianqian'，LiFangfang'，QinQingyan2，HeHongm1

（1.DepartmentofReproductieQujingMatealandChidHealtcareHospital;DeparmentofloodanfusionQujingateal

andChild Health-careHospital，Qujing，Yunnan 655o99，China）

【Abstract】ObjectiveToexplore theeffectofintrauterie perfusionofplatelet-rch plasma （PRP）onthe pregnancyoutcomeof patientswithoeEigfobeFlsdrodereeforals reproduction.MethodsAtotalof69patientswithTEadmitedtoQujingMatealandChildHalth-careHospitalfromAugust223to August204 wereselectedas tereseahbjectsaddividedintotecotrolgroup（35ases）ndthbsevationgop（34casaccding to herandomnumbertablemetodPatitsintheotrolgroupeceivedconvetioaltreamentilepatintsineobseatiooupere treatedwithintrauteriperfusionofRdurig teFETcycle.Patitsreflowedupfor1wksofgestationEndometralh andpregnancyoutcomeswerecomparedbetwenthetwogroups.ResultsTheendometrial thicknessandtheincreaseofendometriumon the transformation day in the observation group were both greater than those in the control group （all Plt;0.05 ）. Therewere no statistically significantdiesinbplaatesiieatecoadotro）alpatey miscarriage rate between the two groups of patients （all Pgt;0.05 ）.Conclusion For patients with TE， intrauterine perfusion of PRP can promote endomerilevelotdieaedoeral.ptatiateositivateofGialprate early miscarriage rate are comparable to those of conventional treatment.

【Keywords】Intrauterine Perfusion; Platelet-Rich Plasma; Thin Endometrium; Frozen Embryo Transfer

輔助生殖技術(shù)（ART）作為不孕癥的一項(xiàng)有效治療手段，隨著體外受精-胚胎移植（IVF）等技術(shù)的持續(xù)改善及胚胎培養(yǎng)體系、基因篩查技術(shù)的不斷完善，ART治療的妊娠率得到提升，然而，該技術(shù)仍存在部分局限性和風(fēng)險(xiǎn)[1]。在ART治療過程中，子宮內(nèi)膜容受性不足是導(dǎo)致周期取消的重要因素之一。目前，薄型子宮內(nèi)膜（thinendometrium，TE）的定義尚無統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn)，臨床推薦將其定義為：在自然周期中為排卵日，或在新鮮IVF周期中人絨毛膜促性腺激素（HCG）注射日，或在冷凍胚胎移植（FET）周期中進(jìn)行內(nèi)膜轉(zhuǎn)化時(shí)，經(jīng)超聲測(cè)量顯示的子宮內(nèi)膜厚度 lt;7mm^[2] 。富血小板血漿（PRP）是血漿中的自體血小板濃縮物，由于其可釋放大量與組織再生修復(fù)相關(guān)的生物活性因子，已應(yīng)用于多種組織的再生修復(fù)[3]。宮腔灌注PRP因操作便捷、安全性良好等優(yōu)勢(shì)，在生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域逐漸受關(guān)注。然而，目前關(guān)于宮腔灌注PRP促進(jìn)TE修復(fù)的臨床研究仍較有限，其具體作用機(jī)制及臨床療效尚需進(jìn)一步探索。基于此，本研究旨在探討TE患者在FET周期進(jìn)行宮腔灌注自體PRP對(duì)治療結(jié)局的影響，以期為TE患者的助孕方案提供新的思路和依據(jù)，現(xiàn)報(bào)道如下。

1資料與方法

1.1一般資料選取2023年8月至2024年8月曲靖市婦幼保健院收治的69例TE患者為研究對(duì)象，按照隨機(jī)數(shù)字表法分為對(duì)照組（35例）和觀察組（34例）。對(duì)照組患者年齡25～42歲，平均年齡（ 32.40±3.96 歲；不孕年限1～10年，不孕年限中位數(shù)為3年；不孕類型[4]：原發(fā)性不孕9例，繼發(fā)性不孕26例；不孕原因：輸卵管因素28例，男方因素0例，排卵障礙5例，卵巢功能減退0例，原因不明2例；基礎(chǔ)卵泡刺激素（bFSH）4.53～9.93U/L ，平均bFSH（ 6.34±1.38）U/L ；基礎(chǔ)促黃體生成素（bLH） 0.54～10.60IU/L ，平均bLH（ 4.66±2.52 ）IU/L；抗米勒管激素（AMH） 1.04～13.61ng/mL ，平均AMH（ 3.85±2.45Ω）ng/mL ；基礎(chǔ)雌二醇（ bE₂ ）11.58～70.84pg/mL ，平均 bE₂ （ 43.85±14.63）pg/mL ；移植胚胎數(shù)1～2個(gè)，平均移植胚胎數(shù)（ 1.29±0.46 個(gè)。觀察組患者年齡22～41歲，平均年齡（ 33.38±4.24 歲；不孕年限1～11年，不孕年限中位數(shù)為2年；不孕類型：原發(fā)性不孕5例，繼發(fā)性不孕29例；不孕原因：輸卵管因素30例，男方因素1例，排卵障礙1例，卵巢功能減退1例，原因不明1例；bFSH 2.89～12.01U/L ，平均bFSH（ 6.88±2.18）U/L ;bLH 1.29～9.09U/L ，平均bLH0 5.17±2.13）IU/L ; AMH 0.27～12.05ng/mL ，平均AMH（ 4.05±2.83）ng/mL ， bE₂15.82～97.16pg/mL ，平均 bE₂ 0 46.04±19.54）pg/mL ；移植胚胎數(shù)1～2個(gè)，平均移植胚胎數(shù)（ 1.35±0.54 個(gè)。兩組患者一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均 Pgt;0.05 ），組間具有可比性。本研究經(jīng)曲靖市婦幼保健院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，患者及其家屬均知情并簽署知情同意書。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）行FET的TE患者[5，選擇激素替代方案（HRT）；（2）年齡20～42歲；（ 3）BMI18～30kg/m² ；（4既往促排周期HCG日子宮內(nèi)膜厚度 lt;7mm ，自然周期或HRT周期反復(fù)出現(xiàn)子宮內(nèi)膜偏薄（子宮內(nèi)膜厚度 lt;7mm ）；（5基礎(chǔ)性激素水平無明顯異常；（6宮腔鏡顯示宮腔形態(tài)正常。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1合并子宮腺肌病、輸卵管積水者；（②合并嚴(yán)重器質(zhì)性病變者；（3存在糖代謝異常、甲狀腺功能異常者；（④存在染色體異常和子宮內(nèi)膜異位癥重度器質(zhì)性病變者。

1.2治療方法對(duì)照組患者行常規(guī)HRT方案準(zhǔn)備內(nèi)膜，具體方法為：月經(jīng)第2～3天開始給予戊酸雌二醇片（BayerWeimarGmbHamp;Co.KG，國藥準(zhǔn)字HJ20160678，規(guī)格： 1mg/ 片）口服， 2mg/ 次，2～3次/d。7～8d后使用超聲診斷儀（三星麥迪遜有限公司，國械注進(jìn)20172062384，型號(hào)：HS50）檢測(cè)子宮內(nèi)膜厚度，子宮內(nèi)膜厚度 lt;7mm 時(shí)，加用雌二醇片／雌二醇地屈孕酮片復(fù)合包裝（AbbottBiologicalsB.V.，國藥準(zhǔn)字HJ20150345，規(guī)格：雌二醇片含雌二醇 2mg ；雌二醇地屈孕酮片含雌二醇 2mg 和地屈孕酮 10mg ），進(jìn)行陰道給藥，每晚1片，至移植日，不進(jìn)行PRP灌注。觀察組患者PRP制備：HRT第7～8天空腹抽取患者外周靜脈血 10mL ，采用檸檬酸鈉抗凝，無菌條件下采用Landesberg二次離心法（室溫下以 2 500r/min 的轉(zhuǎn)速離心 5～10min ，離心半徑為 12cm ，取上層淡黃色部分及中層以下 1～2mL 至另一離心管，以 3200r/min 的轉(zhuǎn)速再次離心 8min ，離心半徑為 12cm ）制備分離提取PRP，最后獲得1mLPRP，搖勻靜止備用。觀察組患者PRP 灌注：在HRT方案準(zhǔn)備內(nèi)膜的第7～8天，采用子宮內(nèi)人工授精（IUI）管對(duì)患者進(jìn)行宮腔灌注，注入PRP 1mL72h 后檢測(cè)子宮內(nèi)膜厚度，若子宮內(nèi)膜厚度未達(dá) 7mm ，則進(jìn)行第二次PRP宮腔灌注。轉(zhuǎn)化內(nèi)膜及黃體支持：兩組患者均在用藥12～14d轉(zhuǎn)化內(nèi)膜，轉(zhuǎn)化第4/6d進(jìn)行卵裂胚/囊胚移植（至少1個(gè)為優(yōu)質(zhì)胚胎），移植后常規(guī)行黃體支持：地屈孕酮片（AbbottBiologicalsB.V.，國藥準(zhǔn)字HJ20170221，規(guī)格：10mg/ 片），口服， 10mg/ 次，3次 /d ；黃體酮陰道緩釋凝膠[Dendronbrandslimited，國藥準(zhǔn)字HJ20140552，規(guī)格：8% （ 90mg/ 支）]陰道給藥， 90mg/ 次，1次/d，如妊娠則繼續(xù)黃體支持并隨訪至孕12周，未妊娠者無需黃體支持。

1.3觀察指標(biāo) （1）比較兩組患者子宮內(nèi)膜厚度。使用超聲診斷儀測(cè)量轉(zhuǎn)化日子宮內(nèi)膜厚度，轉(zhuǎn)化日內(nèi)膜增幅 =[ 轉(zhuǎn)化日內(nèi)膜厚度-（準(zhǔn)備內(nèi)膜7～8d內(nèi)膜厚度）]。（②比較兩組患者妊娠結(jié)局。胚胎著床：患者FET術(shù)后28～30d使用超聲診斷儀（奧地利通用電氣醫(yī)療兩合公司，國械注進(jìn)20152061495，型號(hào)：Volus0nE10）確定孕囊數(shù)。胚胎著床率 宮內(nèi)孕囊總數(shù)/移植胚胎數(shù) ×100% HCG陽性：移植后14d抽取患者空腹靜脈血 3mL ，使用離心機(jī)以 3000r/min 的轉(zhuǎn)速離心 10min （離心半徑 12cm ），取血清，檢測(cè)血清人絨毛膜促性腺激素（ β -HCG），檢測(cè)儀器為電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀（羅氏診斷公司，國械注進(jìn)20182222487，型號(hào)：cobase411）， β-HCGgt;50IU/L 為HCG陽性。臨床妊娠：移植后28d使用超聲診斷儀檢查，見孕囊可確定為臨床妊娠。早期流產(chǎn)：妊娠12周前發(fā)生流產(chǎn)。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS27.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料符合正態(tài)分布時(shí)以（ ）表示，組間比較采用 t 檢驗(yàn)；非正態(tài)分布數(shù)據(jù)以中位數(shù)（四分位數(shù)間距）表示，組間比較采用Mann-Whitney U 檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以[例 （%）] 表示，采用 x² 檢驗(yàn)。以 Plt;0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1兩組患者子宮內(nèi)膜厚度比較觀察組患者內(nèi)膜轉(zhuǎn)化日內(nèi)膜厚度、轉(zhuǎn)化日內(nèi)膜增幅均大于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均 Plt;0.05 ），見表1。

2.2兩組患者妊娠結(jié)局比較兩組患者胚胎著床率、HCG陽性率、臨床妊娠率、早期流產(chǎn)率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均 Pgt;0.05 ），見表2。

3討論

子宮內(nèi)膜厚度是胚胎能否成功植入的重要因素，一項(xiàng)Meta分析顯示：子宮內(nèi)膜厚度 gt;8mm 的患者IVF-ET后的妊娠率、持續(xù)妊娠率及活產(chǎn)率顯著高于子宮內(nèi)膜厚度 lt;8mm 的患者[。通常認(rèn)為TE預(yù)示著子宮內(nèi)膜容受性降低，周期取消率增加，移植后臨床妊娠率降低，妊娠后子癇前期和胎盤早剝等產(chǎn)科風(fēng)險(xiǎn)增加，對(duì)患者的生理、心理、經(jīng)濟(jì)造成極大的影響[。

目前，常用宮腔灌注的藥物有單一成分的粒細(xì)胞集落刺激因子、HCG等，而PRP富含多種生長因子，經(jīng)激活后可以緩慢釋放、協(xié)同發(fā)揮作用，與單一的一次性釋放方式相比，作用時(shí)間更長、具有更強(qiáng)的實(shí)際效果[8]。PRP中血小板活化后釋放大量儲(chǔ)存在血小板 顆粒中的趨化因子、細(xì)胞因子和生長因子，受上述因子影響的過程包括血管生成、細(xì)胞外基質(zhì)的重塑，及干細(xì)胞的分化、增殖和募集[，且上述因子在組織的修復(fù)與再生方面產(chǎn)生積極的作用。本研究結(jié)果顯示，觀察組患者內(nèi)膜轉(zhuǎn)化日內(nèi)膜厚度、轉(zhuǎn)化日內(nèi)膜增幅均大于對(duì)照組，提示PRP宮腔灌注在FET周期準(zhǔn)備內(nèi)膜中可有效改善TE患者的子宮內(nèi)膜厚度，子宮內(nèi)膜對(duì)胚胎的容受性也隨著子宮內(nèi)膜厚度的增加而提高。TE患者常伴隨慢性子宮內(nèi)膜炎，進(jìn)一步降低子宮內(nèi)膜容受性。有研究顯示，PRP可以介導(dǎo)白細(xì)胞介素（IL）-1α、IL-1β和IL-10的表達(dá)，減少IL-6的生成，趨化巨噬細(xì)胞及中性粒細(xì)胞募集，從而發(fā)揮抗炎作用[10]。一項(xiàng)研究比較PRP和G-CSF宮腔灌注后TE患者療效，結(jié)果顯示PRP宮腔灌注后子宮內(nèi)膜厚度及內(nèi)膜血流得到改善[1]，進(jìn)一步證實(shí)PRP較單一藥物宮腔灌注對(duì)TE 治療的優(yōu)勢(shì)。

PRP通過自身外周靜脈血進(jìn)行制備，安全性高、操作簡單和患者接受度高，生殖領(lǐng)域越來越關(guān)注其應(yīng)用。目前，大部分研究結(jié)果顯示PRP可改善薄型子宮內(nèi)膜的妊娠結(jié)局[12]，但目前PRP在生殖領(lǐng)域的應(yīng)用仍在起步階段。一項(xiàng)Meta分析的結(jié)果顯示：PRP宮腔灌注后子宮內(nèi)膜的厚度明顯高于對(duì)照組，且后續(xù)IVF助孕臨床妊娠率觀察組高于對(duì)照組。PRP宮腔灌注對(duì)于促進(jìn)不孕女性的子宮內(nèi)膜增厚、改善IVF臨床妊娠結(jié)局有明顯的效果。但此研究局限性在于納入文獻(xiàn)較少，僅有6篇隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)（RCT）[13]。本研究結(jié)果顯示，兩組患者胚胎著床率、HCG陽性率、臨床妊娠率、流產(chǎn)率比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。一般情況下，胚胎移植后的妊娠率會(huì)隨著子宮內(nèi)膜厚度的增加而升高，本研究中觀察組患者臨床妊娠率高于對(duì)照組，這與PRP灌注后子宮內(nèi)膜厚度增加，容受性改善有關(guān)，但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可能與本試驗(yàn)納入的樣本量小有關(guān)系，課題組將在進(jìn)一步的臨床研究中加大樣本量來進(jìn)一步證實(shí)試驗(yàn)結(jié)果。且因流產(chǎn)率病因復(fù)雜，受遺傳、感染、內(nèi)分泌和免疫等方面影響，PRP宮腔灌注是否可降低FET后的流產(chǎn)率，還需要大樣本多因素回歸分析進(jìn)一步探討。但由于周期數(shù)少，未統(tǒng)一移植胚胎類型等，研究結(jié)果可能存在一定偏差，有待進(jìn)一步擴(kuò)大樣本量，不斷改進(jìn)研究方法來進(jìn)一步證實(shí)PRP在生殖領(lǐng)域的應(yīng)用效果。

綜上所述，對(duì)TE患者來說，PRP宮腔灌注可幫助子宮內(nèi)膜發(fā)育，使子宮內(nèi)膜增厚，而胚胎著床率、HCG陽性率、臨床妊娠率、早期流產(chǎn)率與常規(guī)治療效果相當(dāng)。

參考文獻(xiàn)

[1]貝佳露，曹文麗.不同試管嬰兒技術(shù)對(duì)不孕癥患者一次種植成功率及妊娠結(jié)局的影響[J].中國婦幼保健，2024，39（1）：70-74.

[2]趙靜，黃國寧，孫海翔，等.輔助生殖技術(shù)中異常子宮內(nèi)膜診療的中國專家共識(shí)[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志，2018，27（11）：1057-1064.

[3]SAMADIP， SHEYKHHASANM，KHOSHINANIHM.Theuseofplatelet-rich plasmainaestheticand regenerative medicine：Acomprehensivereview[J].AestheticPlastSurg，2019，43（3）：803-814.

[4]陳子江，劉嘉茵，黃荷鳳，等.不孕癥診斷指南[J].中華婦產(chǎn)科雜志，2019，54（8）：505-511.

[5]中國輸血協(xié)會(huì)臨床輸血管理學(xué)專業(yè)委員會(huì)富血小板血漿創(chuàng)新技術(shù)專家聯(lián)盟子宮修復(fù)項(xiàng)目組.自體單采富血小板血漿治療薄型子宮內(nèi)膜的專家共識(shí)[J].臨床輸血與檢驗(yàn)，2023，25（3）：289-296.

[6]華蓬勃，楊怡卓，胡家芳，等.子宮內(nèi)膜厚度預(yù)測(cè)IVF-ET妊娠結(jié)局的Meta分析[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志，2022，31（8）：1119-1126.

[7]GUO Z，XUX，ZHANGL， etal.Endometrial thickness isassociatedwith incidence of small-for-gestational-age infants in fresh in vitrofertilization-intracytoplasmic sperminjectionand embryotransfercycles[J].FertilSteril，2020，113（4）：745-752.

[8]任軍香，韓紅敬.富血小板血漿宮腔灌注治療薄型子宮內(nèi)膜的研究進(jìn)展[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志，2022，31（4）：551-555.

[9]MOLINAA，SANCHEZJ，SANCHEZW，etal.Platelet-richplasmaas an adjuvantin the endometrial preparation of patientswith refractoryendometrium[J].JBRAAssistReprod，2018，22（1）：42-48.

[10]GIUSTII，D'ASCENZOS，MACCHIARELLIG，etal.In vitroevidence supportingapplications of platelet derivativesin regenerativemedicine[J].Blood Transfus，2020，18（2）：117-129.

[11]龍惠東，王鳳，吳迪，等.兩種宮腔灌注治療對(duì)薄型子宮內(nèi)膜患者的療效對(duì)比觀察[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志，2020，29（11）：1421-1426.

[12]常亞杰，張曉莉，楊星，等.富血小板血漿促子宮內(nèi)膜增殖對(duì)妊娠結(jié)局的影響[J].實(shí)用婦產(chǎn)科雜志，2016，32（6）：445-449.

[13]趙恒，孫強(qiáng)，濮義福，等.富血小板血漿宮腔灌注在薄型子宮內(nèi)膜中治療作用的meta分析[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2022，31（2）：113-116.