紅水河斑胚胎孵化及早期胚胎發育觀察

中圖分類號：S961.2 文獻標志碼：A 文章編號： 1004-6755（2025）08-0032-05

Abstract：To conduct artificial propagation research on Hemibagrus guttatus，the effects of different incubation methods and temperatures on the hatching performance of its embryos were thoroughly investigated. Additionally，observations were made on the embryonic morphology at various development stages within the Hongshui River system.The results indicate that fertilized eggs of Hemibagrus guttatus are spherical，yellow，with a diameter of 2.8～3.5mm . Under water temperature conditions of （28±0.5 ） °C ，embryonic development lasted 65h34min with，an accumulated temperature of 1822.8^°C?h ， Seven developmental stages were documented： fertilized egg，cleavage， blastula，gastrula，neurula，organogenesis，and hatching. Among incubation methods，the combination of hatching barrels whit incubation frames achieved the highest average hatching rate of （75.00±3.15）% .The optimal incubation temperature for Hemibagrus guttatus in the Luodian County section of the Hongshui River was determined be 27～29°C ！

Key words： Hongshui River; Hemibagrus guttatus ; embryonic development; hatching

斑（Hemibagrusguttatus），俗稱芝麻劍，科，無鱗片、無肌間刺，棲息于河底，主要分布在中國東南部的珠江、沅江、九龍江、漢江等流域[1]。因其肉質細嫩、無腥味，被稱為珠江“四大名魚\"之二[2]，在自然環境中，它們的食物多樣，涵蓋了甲殼類、昆蟲類、魚類、環節動物等[3]。由于過度捕撈，斑種群數量急劇減少，從2021年起，中國將野生斑列為國家重點保護野生動物（二級）。

在魚類生活史中，早期胚胎發育階段是其關鍵時期之一，該階段胚胎結構會大幅變化，由于胚胎對環境因子變化的感知極為敏感[4-5]，此階段的死亡率最高。早期胚胎發育過程中，存活率會影響幼魚的產量，并決定魚類最終的產量 ?[6-7]

近年來，一些學者開展了對科魚類，如大鰭（Hemibagrusmacropterus）、粗唇鮠（Leiocas-siscrassilabris）的胚胎發育研究 [8-9] 。在斑胚胎發育與水溫的關系方面，一些學者在自然水溫下，于不同的時間批次進行不同水溫下斑胚胎孵化的研究，認為斑孵化適宜水溫為25～28℃[10-11]。

有的學者開展了斑的胚胎孵化研究。楊家堅等[10]于2000年使用小型孵化環道池、孵化網片及玻璃缸孵化；周路等[12]于2005—2006年對斑采用孵化板孵化；譚冬初等[11]于2019年采用孵化框 + 淋水孵化，孵化水溫 25～28^°C 。但在上述研究中，斑胚胎的平均孵化率比較低，分別為 31.8%.32.5% 和 27.6% 。許鎮平[13]于2000年使用孵化網片放置在水泥池中，進行靜水充氧孵化以及微流水充氧孵化，雖然孵化率比較高，分別為 65% 和 85% ，但孵化規模較小。

省羅甸境內蒙江河屬珠江流域紅水河水系，是斑的自然分布區。由于羅甸縣區域的氣溫、水溫等與珠江流域的廣東、廣西等地差別較大，羅甸縣境內的斑體色相對較淡，繁殖高峰期略晚。由于斑胚胎孵化技術尚不成熟，早期發育過程中的成活率仍非常低。本試驗旨在深人研究羅甸縣境內紅水河水系中斑的早期發育特點，篩選適宜的孵化方法，以進一步加強斑的資源保護及開發利用。

1材料與方法

1. 1 試驗材料

斑親魚來自羅甸縣名貴魚類生態養殖公司，該公司的保種場是省省級原種場。斑親魚個體體質量 （772.33±63.92）g ，體長（2號 （47.8±3.87 ） cm 。

1.2 試驗方法

1.2.1 催產受精

采用二次注射法用催產劑（HCG、LHRH一A2和DOM的混合藥物）對親魚進行背部注射誘導催熟產卵，及時檢查卵子成熟情況，待卵子成熟后采用半干法人工授精。

1. 2.2 斑不同的孵化裝置的孵化

在 （28±0.5）°C 水溫條件下，同一批催產繁殖的斑，通過水槽加孵化框、孵化盆加孵化框、孵化桶加孵化框3種孵化方式，3個試驗組，每組3個平行，記錄斑胚胎的受精率、孵化率。

孵化盆加孵化框，將受精卵鋪于孵化框內，孵化框懸于盆底部，孵化盆內無水體循環，底部氧氣泵充氧。

水槽加孵化框，將受精卵鋪于孵化框內，孵化框懸于水槽中間，一端進水，另一端出水，微流水刺激胚胎發育，水槽底部氧氣泵充氧。

孵化桶加孵化框，安裝于一個半徑 1m ，深0.5m 的圓形玻璃鋼孵化桶上，受精卵鋪于孵化框內，孵化框固定于孵化桶頂部，底部微流水刺激胚胎發育，孵化桶底部充氧。

1.2.3 斑不同水溫條件的胚胎孵化

采用孵化桶加孵化框的孵化方式，在25～30°C 設置6個溫度梯度組，每組3個平行，記錄斑的受精率、孵化率。

1.2.4 孵化管理

用小抄網將受精卵緩慢轉移到孵化桶上方的孵化框中（直徑： 60cm ），均勻不聚堆，受精卵密度以 4000～6000 粒/ m² 為宜，進行微流水充氧孵化。孵化期間，及時清除死卵，保持水體清潔，防正污染孵化水體，滋生水霉。水溫的劇烈波動對胚胎發育有影響，須關注溫控系統，保證整個孵化期間水溫恒溫。定期測定溶解氧、 pH 值等水質情況。出膜期降低水流，減少仔魚體力消耗。

1.2.5 斑胚胎發育早期觀察

人工擠卵受精后根據胚胎發育狀況，每個發育階段隨機選取發育中的卵粒，使用NeXCOPe解剖鏡觀察發育進程并記錄，按 60% 受精卵發育至同一時期劃分胚胎發育各個階段。

1. 2.6 數據處理

數據采用 Excel 20lO 和 SPSSStatistics27.0分析。以“平均值 ± 標準差 （mean±SD） ”的方式表示結果。

2結果

2.1斑胚胎發育分期

在水溫 （28±0.5）°C 下，斑的胚胎發育從受精卵到出膜，歷時 65h3min～65h47min 。胚胎發育主要歷經受精、卵裂、囊胚、原腸、神經胚、器官形成以及出膜等階段。首先是精卵混合完成受精，這一過程的積溫為 $1 4 . ＼mathrm { ～ 0 ～ ～ } ^ { ＼circ } ＼mathrm { ～ C ～ } ＼cdot ＼mathrm { ～ h ～ }$ 。在受精1h 22min 后，細胞分裂開始，此時積溫達到 。于受精 8h3min 時，胚胎順利進入囊胚期，此階段積溫達 227.8‰ 。受精14h18min 時，胚胎進入原腸期，此過程消耗積溫 399.0°?h 。當受精時長至 20h43min ，胚胎進入神經胚期，該階段積溫 578. 0°?h 。受精 27h31min ，胚胎步入器官形成期，積溫為773.2°C?h 。最終，在受精 65h34min 時，胚胎開始出膜。整個胚胎發育至出膜階段的總積溫為 1822.8^°C?h.

在 （28±0.5）°C 的水溫條件下，斑的整個胚胎發育歷時 65h3min～65h47min 。未受精時成熟卵呈圓形，黃色，直徑為 2.2～2.6mm ，表面有黏附性，可以黏附在周邊物質上，卵膜柔軟而有彈性。

2.2斑不同孵化方式的胚胎孵化

在（ 28±0.5） ） ^°C 水溫條件下，同一批催產繁殖的斑，通過水槽加孵化框、孵化盆加孵化框、孵化桶加孵化框3種孵化方式，3個試驗組，每個試驗組共有魚卵12000粒，每組3個平行，每個平行卵數4000粒。不同孵化方式斑胚胎的受精及孵化情況見表1。

經統計孵化桶加孵化框中魚卵的平均受精率最高，達 （81.44±1.76）% ；水槽加孵化框中魚卵的平均受精率次之，達 （65.89±1.28）% ；孵化盆加孵化框中魚卵的平均受精率最低，為（58.58±0.16）% 。

孵化桶加孵化框的孵化方式平均孵化率最高，達 （75.00±3.15）% ;水槽加孵化框的平均孵化率次之，達 （24.81±1.54）% ；孵化盆加孵化框的平均孵化率最低，為 （15.98±1.35）% 。

表1不同孵化方式斑胚胎的受精及孵化情況

2.3斑不同水溫條件胚胎孵化

采用孵化桶加孵化框的孵化方式，在25～30^°C 設置6個溫度梯度組，每個試驗組3600卵粒，每組3個平行，每個平行1200卵粒。不同水溫下斑胚胎的受精及孵化情況見表2。

在 （25±0.5）^°C～（30±0.5）^°C 水溫下，各組斑胚胎的出膜時間呈現出差異。在 （25±0.5）°C 時，斑首尾胚胎孵化時間是 64h30min～65h 52min ，胚胎孵化時間是 78h 15min～79h 37min 。隨著水溫升高，胚胎孵化時間縮短，在（30±0.5）^°C 時，斑首尾胚胎孵化時間是48h36min～49 h5min，胚胎孵化時間是 60h27min～60h56min_? 0

經統計，在孵化桶加孵化框的不同水溫下，魚卵的受精率在 （28±0.5）^°C 的框中最高，達（68.2±2.32）% ，其余溫度下，受精率相對略低。

在各組的試驗中，孵化率均比較高，均在（2 （67.2±0.90）% 以上，在水溫 （28±0.5）^°C 時最高，達 （75.5±1.55）% 。

表2不同水溫下斑胚胎的受精及孵化情況

3討論

3.1 紅水河斑胚胎發育的特點

本研究中的斑卵徑為 2.2～2.6mm ，不僅低于珠江流域斑的卵徑 （3.1～3.8mm）^[14] ，還低于楊家堅等[10]研究中體質量為 2.2～6.8kg 雌魚的卵徑 （3.2～4.5mm） 、周路等[12]研究中體質量為 2.5～7.1kg 雌魚的卵徑（約為 3mm ）、譚冬初等[11]測量的 2～7kg 雌魚的卵徑（3.1～3.8mm） 。綜上可知，省羅甸境內紅水河水系斑卵徑小于珠江流域廣東、廣西等地的斑。與同為科的一些魚類相比，斑卵徑較大，大于黃顙魚（Pelteobagrusfuluidraco）[15]（ 1.86～2.26mm） 、長吻鮠（Leiocassislongiros-tris）[16]（2 ？.18～2.35mm） 、瓦氏黃顙魚（ .Pel- teobagrus vachelli）[17]（1. 67mm ）和烏蘇里鮠（Pseudobagrus ussuriensis）[18]（約 2. 0mm^? ，略小于大鰭[8]（ 2.72mm±0.2mm） 。

從胚胎發育時間來看，珠江斑在 （27.5± 0.5）^°C 條件下孵化，受精后 55h ，仔魚開始孵出[14]。本研究在（ $2 8 ＼pm 0 . ＼mathrm { ～ 5 ～ } ） ＼mathrm { ～ ＼textc ～ }$ 時，受精后51h 58min～52h 42min ，仔魚開始出膜，65h 3min～65h 47min. 大部分胚胎出膜孵化，發育時間與珠江斑相近。長吻鮠在水溫21～27^°C 時，受精卵至胚胎發育出膜需要59h5min^[16] 。大鰭在 26.5～31.5° 水溫下，胚胎發育時間為 。黃顙魚在24～27.5°C 水溫下，胚胎發育時間62h 50min^[15] 。烏蘇里鮠在 25.5～26^°C 水溫下，受精卵至胚胎發育出膜歷時 49h 26min^[18] 斑胚胎發育時間略長于上述科魚類，在 （28± 0.5）^°C 的水溫條件下，斑的整個胚胎發育歷時為 65h3min～65h47min 。

魚類胚胎發育的快慢與水溫密切相關[20-21]。從本研究孵化期的水溫來看，總體來說，水溫越高，胚胎發育的時間越短。但斑魚卵的受精率及孵化率隨著水溫變化出現了明顯的差異。溫度處于過高或過低的狀態，均會給胚胎孵化帶來阻礙，進而造成胚胎孵化率降低 [22-23] 。斑在水溫（25±0.5）^°C 時，胚胎發育時間較長，受精率低，僅（51.5±1.92）% ，孵化率為 （67.2±0.90）% 。在水溫 （28±0.5）°C 保持較好的受精率，達到（68.2±2.32% ，孵化率達到 （75.5±1.55）% 。在（27±0.5）^°C～（29±0.5）^°C 時，孵化率較高，可達到（70.4±0.65）% 以上。當水溫為 （30±0.5）^°C 時，孵化率降低至 （69.0±1.06）%因此，紅水河斑的胚胎發育水溫，推薦在27～29°C 進行，可以獲得較高的孵化率。

3.2孵化桶加孵化框的孵化方式可以提高孵化率

孵化盆靜水孵化、水槽微流水、孵化桶等是常見的魚類胚胎孵化裝置。它們在水流控制、溶解氧供應等方面存在差異，進而對孵化效果產生不同影響。

有的魚類在不同的孵化裝置下，孵化效果有差異。對新疆克孜勒河厚唇裂腹魚（Racomala-brosus）的胚胎孵化中，使用淋浴式孵化缸的孵化方式，其平均孵化率可達 91.1% ，大幅超越裂腹魚亞科的其他魚類品種[24]。相較于平列槽、孵化缸微流水孵化方式，以孵化缸淋浴方式開展祁連裸鯉（Ecklonichilienensis）的胚胎孵化工作，能讓孵化率提升 10% 以上[25]。沙塘（Odontobutisobscurus）采用玻璃缸流水孵化有利于胚胎的發育和提高魚苗的出膜率，同時能讓其更好的平游，優于水泥池靜水、水泥池流水孵化[26]。在對拉薩裂腹魚（Racomawaltoni）的孵化試驗中，分別采用了立式孵化器、平列槽以及圓柱形孵化器，對比三種孵化方式的孵化效果，圓柱形孵化器則最差，立式孵化器居中，平列槽孵化效果最佳[27]

本研究中，孵化盆加孵化框、水槽加孵化框槽均出現水霉病現象，其中孵化盆加孵化框孵化裝置尤為嚴重，而孵化桶加孵化框裝置，水霉出現較少。對祁連裸鯉開展的三種孵化方式對比試驗里，涵蓋了孵化缸微流水孵化、孵化缸淋浴孵化和平列槽微流水孵化。水霉發病率在孵化缸淋浴式孵化方式下明顯低于其他兩種方式[25]。綜上，采用孵化桶加孵化框的方式進行斑胚胎的孵化，可以減少水霉病的發生，獲得較高的孵化率，是推薦的孵化方式。

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