中孕期非整倍體染色體異常血清學(xué)篩查不同方案比較

唐坤強(qiáng)

[摘要] 目的 對(duì)中孕期非整倍體染色體異常血清學(xué)篩查不同方案的檢出率進(jìn)行探討。 方法 選取513名2009年9月～2013年3月在攀枝花市婦幼保健院產(chǎn)科進(jìn)行常規(guī)產(chǎn)前篩查的孕婦血清樣本，分別采用化學(xué)發(fā)光法和時(shí)間分辨熒光免疫法對(duì)孕婦血清進(jìn)行二聯(lián)、三聯(lián)、四聯(lián)檢查，比較陽性率及假陽性率。 結(jié)果 二聯(lián)化學(xué)發(fā)光法檢測唐氏綜合征（DS）高危假陽性率為9.10%，三聯(lián)為7.36%，四聯(lián)為6.28%，假陽性率呈遞減趨勢（χ2=5.119，P < 0.05）；二聯(lián)化學(xué)發(fā)光法篩查18-三體高危假陽性率（0.63%）低于三聯(lián)（0.82%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=4.776，P < 0.05）。三聯(lián)時(shí)間分辨熒光免疫法篩查DS、18-三體假陽性率（4.01%、0.34%）較二聯(lián)（8.93%、0.61%）均明顯降低（χ2=6.992、4.776，P < 0.05）。二聯(lián)化學(xué)發(fā)光法檢測DS、18-三體假陽性率分別為9.10%、0.63%，時(shí)間分辨熒光免疫法則分別為8.93%、0.61%，兩種檢測方法比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.787、0.000，P > 0.05）；而三聯(lián)時(shí)間熒光分辨法檢測DS、18-三體假陽性率（4.01%、0.34%）均低于三聯(lián)化學(xué)發(fā)光法（7.36%、0.82%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.382、4.783，P < 0.05）。 結(jié)論 化學(xué)發(fā)光法的檢測系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)篩查效率二聯(lián)、三聯(lián)及四聯(lián)方案呈遞增趨勢。時(shí)間分辨熒光免疫法檢測系統(tǒng)發(fā)現(xiàn)篩查效率三聯(lián)高于二聯(lián)方案，時(shí)間熒光分辨法三聯(lián)篩查優(yōu)于化學(xué)發(fā)光法。

[關(guān)鍵詞] 中孕期；非整倍體染色體異常；血清學(xué)篩查；比較

[中圖分類號(hào)] R715.5 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2015）01（c）-0134-04

非整倍體異常是臨床中常見的染色體異常，主要包括唐氏綜合征、18-三體綜合征、13-三體綜合征及一些性染色體異常[1-2]。染色體異常是圍生兒死亡和兒童智力障礙的主要原因之一[3]，因此，檢測染色體異常胎兒成為孕期侵入性產(chǎn)前手術(shù)的最常見指征。不同的產(chǎn)前篩查方案，對(duì)唐氏綜合征（DS）的篩查效率不同。本研究選擇2009年9月～2013年3月在攀枝花市婦幼保健院產(chǎn)科（以下簡稱“我科”）進(jìn)行常規(guī)產(chǎn)前篩查的孕婦血清樣本513份，采用化學(xué)發(fā)光法和時(shí)間分辨熒光免疫法對(duì)孕婦血清進(jìn)行二聯(lián)、三聯(lián)、四聯(lián)檢查，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2009年9月～2013年3月在我科進(jìn)行常規(guī)產(chǎn)前篩查的孕婦血清樣本共513份，年齡19～38歲，平均（28.31±5.64）歲，孕齡14～20周+6 d，均為單胎。513份血清樣本分別進(jìn)行化學(xué)發(fā)光法和時(shí)間分辨熒光免疫法二聯(lián)、三聯(lián)、四聯(lián)檢測。

1.2 方法

化學(xué)發(fā)光法和時(shí)間分辨熒光免疫法檢測孕婦血清，包括二聯(lián)篩查：Ms AFP+free β-hCG；三聯(lián)篩查：Ms AFP+ free β-hCG+uE3；四聯(lián)篩查：Ms AFP+ free β-hCG +uE3+ inh-A。同時(shí)將孕婦的年齡、孕齡、體重及二聯(lián)、三聯(lián)、四聯(lián)指標(biāo)的OD值全部輸入計(jì)算機(jī)，通過“優(yōu)生勝算”軟件進(jìn)行計(jì)算，可得到經(jīng)體重校正過二聯(lián)、三聯(lián)、四聯(lián)指標(biāo)水平。利用描述性統(tǒng)計(jì)分析和回歸分析獲得DIA中位數(shù)值。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 15.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)數(shù)資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P < 0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 染色體異常檢出情況

中孕期母體血清樣本513份中，505名采用化學(xué)發(fā)光法檢測得到完整四聯(lián)檢測值，503名采用時(shí)間分辨熒光免疫法得到完整三聯(lián)檢測值，498名得到兩種方法的全部檢測結(jié)果。513名孕婦中，檢出21-三體3例，18-三體2例，均經(jīng)臨床的染色體核型分析證實(shí)。

2.2 二聯(lián)、三聯(lián)及四聯(lián)化學(xué)發(fā)光法篩查DS、18-三體高危情況比較

化學(xué)發(fā)光法檢測二聯(lián)、三聯(lián)及四聯(lián)計(jì)算DS高危比較，二聯(lián)篩查假陽性率為9.10%，三聯(lián)為7.36%，四聯(lián)為6.28%，假陽性率呈遞減趨勢，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。四聯(lián)篩查方案可使假陽性率較三聯(lián)下降約1.08%，較二聯(lián)下降約2.82%。見表1。化學(xué)發(fā)光法二聯(lián)篩查18-三體高危的假陽性率（0.63%）低于三聯(lián)（0.82%），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。見表2。

2.3 二聯(lián)、三聯(lián)時(shí)間分辨熒光免疫法篩查DS、18-三體高危情況比較

時(shí)間分辨熒光免疫法三聯(lián)篩查DS的假陽性率較二聯(lián)檢測明顯降低，18-三體的假陽性率也顯著降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P < 0.05）。見表3、4。

2.4 二聯(lián)、三聯(lián)化學(xué)發(fā)光法、時(shí)間分辨熒光免疫法篩查DS、18-三體高危情況比較

化學(xué)發(fā)光法與時(shí)間分辨熒光免疫法比較，在二聯(lián)檢測DS、18-三體的假陽性率上，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）；而時(shí)間熒光分辨法三聯(lián)檢測DS、18-三體的假陽性率均低于化學(xué)發(fā)光法三聯(lián)檢測，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），提示時(shí)間熒光分辨法三聯(lián)篩查DS、18-三體優(yōu)于化學(xué)發(fā)光法。見表5、6。

3 討論

非整倍體異常是臨床中常見的染色體異常，其中，DS是一種由21號(hào)染色體三倍體異常的多基因畸變所造成的胎兒先天性愚型，臨床表現(xiàn)為異常體貌、智力低下，嚴(yán)重影響了患者及家庭的正常生活。DS目前醫(yī)學(xué)上尚無法預(yù)防及治療，只能通過有效的產(chǎn)前篩查及做出明確診斷之后，終止妊娠，以防止患有DS的嬰兒出生。因此，DS有效的產(chǎn)前篩查方法成為了臨床產(chǎn)科醫(yī)生關(guān)注的熱點(diǎn)之一，也是圍產(chǎn)醫(yī)學(xué)發(fā)展的重要研究方向。目前我國對(duì)DS的產(chǎn)前篩查還未推廣及普及，部分地區(qū)對(duì)DS的產(chǎn)前篩查方法主要是中孕期二聯(lián)血清學(xué)篩查方案[4-6]。

國外對(duì)DS產(chǎn)前篩查的研究熱點(diǎn)集中在母體血清生化指標(biāo)的臨床應(yīng)用方面。在對(duì)BtJN、suRuss、FAsTER等大型臨床實(shí)驗(yàn)研究及普及開展早孕期篩查后，不僅極大地提高了產(chǎn)前篩查檢出率，降低假陽性率，而且也豐富并擴(kuò)充了產(chǎn)前篩查模式。目前國內(nèi)產(chǎn)前篩查的研究因受限于較多的衛(wèi)生資源支持[7-9]，所開展的產(chǎn)前篩查方法主要是中孕期母血清二聯(lián)篩查（AFP+β-hCG），而國外發(fā)達(dá)國家所采用的產(chǎn)前篩查方法主要是中孕期母血清四聯(lián)篩查（AFP+β-hCG+uE3+inh-A）。國外對(duì)suRuss大型臨床實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果也表明，中孕期孕婦血清學(xué)篩查中四聯(lián)篩查方案比二聯(lián)篩查方案、三聯(lián)篩查方案效果更優(yōu)[10-13]。

產(chǎn)前篩查的目的在于通過篩查出高風(fēng)險(xiǎn)孕婦進(jìn)行產(chǎn)前診斷而避免缺陷兒的出生，20年前臨床上就已經(jīng)對(duì)胎兒進(jìn)行DS和18-三體綜合征非整倍體血清學(xué)篩查。血清學(xué)篩查安全，對(duì)孕婦和胎兒沒有影響，可以盡早避免缺陷兒的出生，發(fā)現(xiàn)問題時(shí)，能夠盡早做出診斷處理，使危害降到最低，因此孕婦應(yīng)該進(jìn)行產(chǎn)前診斷。同時(shí)產(chǎn)前血清學(xué)篩查對(duì)全前腦、開放性神經(jīng)管缺陷、嚴(yán)重先心病等患有嚴(yán)重結(jié)構(gòu)異常的胎兒產(chǎn)前診斷率高，甚至還能夠預(yù)測早發(fā)型子癇前期、胎兒宮內(nèi)生長受限等疾病[14-16]。

中孕期篩查通常在15～20周進(jìn)行，血清學(xué)指標(biāo)有AFP、free β-hCG、uE3和inh-A。AFP、free β-hCG雙聯(lián)篩查是國內(nèi)最常見篩查方案之一。中孕期篩查全部采用母血清學(xué)指標(biāo)，與NT等超聲指標(biāo)相比可減少操作失誤及結(jié)果的偏差，其檢測方法更具精確性和可重復(fù)性[17-18]。本研究中，513名孕婦中，檢出21-三體3例，18-三體2例，均經(jīng)臨床的染色體核型分析證實(shí)。

血清標(biāo)志物的檢測方法主要包括放射免疫法、酶聯(lián)免疫吸附法、化學(xué)發(fā)光法、金標(biāo)法、時(shí)間分辨熒光法等。時(shí)間分辨熒光法為國際上最為認(rèn)可的檢測方法，其采用稀土離子來標(biāo)記抗原或抗體，優(yōu)點(diǎn)有靈敏度高、制備標(biāo)志物簡便、有效期長、無放射性污染等，具有較高的權(quán)威性[19-21]。另外化學(xué)發(fā)光法就檢測方法學(xué)而言，靈敏度高、背景噪音低、反應(yīng)簡單、快速而無需催化劑，同時(shí)也有配套的中文風(fēng)險(xiǎn)計(jì)算軟件，適于中小型的篩查機(jī)構(gòu)。隨著化學(xué)發(fā)光法DIA檢測方法的出現(xiàn)，相較以往的酶聯(lián)免疫吸附法更能穩(wěn)定地檢測該指標(biāo)，為其在臨床上的使用和推廣提供了條件[22-24]。

本研究中，化學(xué)發(fā)光法檢測二聯(lián)、三聯(lián)及四聯(lián)計(jì)算DS高危比較，二聯(lián)篩查假陽性率為9.10%，三聯(lián)為7.36%，四聯(lián)為6.28%，假陽性率呈遞減趨勢，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。四聯(lián)篩查方案可使假陽性率較三聯(lián)下降約1.08%，較二聯(lián)下降約2.82%。化學(xué)發(fā)光法二聯(lián)篩查18-三體高危的假陽性率低于三聯(lián)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。說明化學(xué)發(fā)光法檢測系統(tǒng)篩查效率二聯(lián)、三聯(lián)及四聯(lián)方案呈遞增趨勢。時(shí)間分辨熒光免疫法二聯(lián)、三聯(lián)檢測DS、18-三體高危假陽性率，三聯(lián)與二聯(lián)比較，假陽性率明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），說明時(shí)間分辨熒光免疫法檢測系統(tǒng)篩查效率三聯(lián)高于二聯(lián)方案。兩種檢測系統(tǒng)二聯(lián)檢測DS、18-三體的假陽性率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P > 0.05）；三聯(lián)假陽性率比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。提示二聯(lián)篩查化學(xué)發(fā)光法檢測系統(tǒng)與時(shí)間熒光分辨法檢測系統(tǒng)相近，三聯(lián)篩查時(shí)間熒光分辨法優(yōu)于化學(xué)發(fā)光法。

綜上所述，高效的早中孕聯(lián)合和篩查已經(jīng)得到了廣泛的肯定，而對(duì)于中孕期進(jìn)入篩查的人群，四聯(lián)血清學(xué)篩查被認(rèn)為是最佳的選擇。不論年齡，所有孕齡< 20周到產(chǎn)前保健門診檢查的孕婦，均可要求接受非整倍體篩查，以降低缺陷兒的發(fā)生。

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