培美曲塞聯合順鉑化療方案對老年非小細胞肺癌患者外周血淋巴細胞表型變化的影響

培美曲塞聯合順鉑化療方案對老年非小細胞肺癌患者外周血淋巴細胞表型變化的影響

胡偉華陳振平1王磊1肖衛1許菊秀1

(長江大學臨床醫學院，湖北荊州434000)

摘要〔〕目的探討培美曲塞聯合順鉑(CDDP)化療方案對老年非小細胞肺癌(NSCLC)外周血淋巴細胞亞群的影響。方法選擇年齡≥60歲的NSCLC 患者64例，給予培美曲塞500 mg/m2，第1天靜脈滴注，順鉑25 mg/m2，第1～3天靜脈滴注，21 d為1個周期，每例患者至少治療治療兩個周期。另以同期健康查體者作為對照組，流式細胞儀檢測外周血CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+及CD19+細胞百分率和CD4+/CD8+比值。 結果老年NSCLC患者化療前CD4+、CD16+56+細胞百分率及CD4+/CD8+比值顯著低于健康對照組(P<0.05)，CD3+、CD8+及CD19+細胞百分率變化與對照組比差異較無統計學意義(P>0.05)；化療后CD4+、CD16+56+細胞百分率及CD4+/CD8+比值較化療前明顯升高(P<0.05)，CD3+、CD8+及CD19+細胞百分率較化療前后無顯著差異(P>0.05)。結論培美曲塞聯合順鉑化療可改善老年NSCLC患者的免疫功能。

關鍵詞〔〕培美曲塞;順鉑;非小細胞肺癌;淋巴細胞表型

中圖分類號〔〕R732〔文獻標識碼〕A〔

通訊作者：陳振平(1966-)，男，副主任醫師，碩士，主要從事眼科疾病臨床研究。

1長江大學附屬第一醫院呼吸內科

第一作者：胡偉華(1977-)，女，碩士，主治醫師，主要從事肺癌及COPD研究。

由于老年患者器官功能減退，并且常伴發多種其他系統疾病，因此，老年非小細胞肺癌(NSCLC)患者的治療越來越受到關注。培美曲塞為多靶點葉酸拮抗劑，可抑制多種代謝酶，導致嘌呤和嘧啶合成障礙來發揮其抗腫瘤作用〔1~3〕，2008年美國食品藥品監督局(FDA)批準培美曲塞聯合順鉑作為治療非鱗癌NSCLC患者的一線化療方案〔4,5〕。由于該化療方案高效、低毒等特點，可應用于老年NSCLC患者的治療。本研究旨在觀察培美曲塞聯合順鉑(CDDP)化療前后老年NSCLC患者外周血淋巴細胞亞群的變化。

1對象與方法

1.1研究對象選擇2011年10月至2012年2月來我院就診的老年NSCLC患者64例，均有測量病灶，年齡60～89〔平均(68.1±8.6)〕歲，男40例，女24例。所有患者根據美國聯合癌癥分類委員會(AJCC)和國際抗癌聯盟(UICC)2007年制定的TNM分期第7版，分為Ⅳ期。ⅠB期2例，ⅡA～ⅡB期8例，ⅢA期14例，ⅢB～Ⅳ期40例。病理類型為腺癌41例、鱗癌18例、腺鱗癌5例。所有患者Karnofsky評分≥60分，預計生存≥3個月，均無免疫系統疾病，化療前心電圖、肝腎功能均正常，既往1個月內未行其他抗腫瘤治療。入選同一時期于我院查體的38例健康者作為健康對照組，男24例，女14例，平均年齡(54.2±9.3)歲。兩組研究對象在性別、年齡分布無差異。

1.2治療方法培美曲塞500 mg/m2，第1天靜脈滴注，順鉑25 mg/m2，第1～3天靜脈滴注，21 d為1個周期，每例患者至少治療治療兩個周期。化療期間給予5-HT3受體拮抗劑和其他止吐藥物，以減輕消化道反應。

1.3檢測方法健康對照組于清晨空腹抽取靜脈血約3 ml(肝素抗凝)，64例老年NSCLC患者于化療前2 d及化療結束后第7天分別空腹抽取靜脈血約3 ml(EDTA抗凝)。淋巴細胞及其亞群表面抗原表達采用直接免疫熒光標記全血溶血法進行測定，包括CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+及CD19+，并計算CD4+/CD8+比值。將肝素抗凝的外周血100 μl，分別加入不同熒光標記的單克隆抗體(mAb)各20 μl，避光條件下反應15 min后加入細胞裂解液，使紅細胞溶解破裂，PBS液洗滌2次。采用用流式細胞儀(美國BD公司，FACS Calibur)對樣品進行檢測，每份待測樣品同步做同型對照，在直方圖中框出淋巴細胞群，Cellquest軟件分析數據，分別計算出10 000個淋巴細胞中個陽性細胞的百分比。

1.4統計學方法采用SPSS16.0統計學軟件進行分析，定量資料組間比較行t檢驗。

2結果

2.1CDDP化療方案對NSCLC患者外周血淋巴細胞表型的影響與健康對照組比較，老年NSCLC患者化療前CD4+、CD16+56+細胞百分率及CD4+/CD8+比值顯著降低(P<0.05)，CD3+、CD8+及CD19+細胞百分率變化與健康對照組無統計學差異(P>0.05)；化療前后CD4+、CD16+56+細胞百分率及CD4+/CD8+比值較化療前明顯升高(P<0.05)，而CD3+、CD8+及CD19+細胞百分率較化療前無顯著差異(P>0.05)。見表1。

2.2CDDP化療方案對不同類型NSCLC患者外周血淋巴細胞亞群的影響化療前，腺癌、鱗癌及腺鱗癌三組患者CD4+、CD16+56+細胞百分率及CD4+/CD8+比值明顯低于對照組(P<0.05)，CD3+、CD8+及CD19+細胞百分率變化與對照組無統計學差異(P>0.05)；化療后，CD3+、CD4+、CD8+、CD16+56+及CD19+細胞百分率和CD4+/CD8+比值與對照組比較無統計學差異(P>0.05)；與化療前比較，三組患者化療后CD4+、CD16+56+細胞百分率及CD4+/CD8+比值明顯升高(P<0.05)，然而與化療前比較，CD3+、CD8+及CD19+細胞百分率變化無統計學差異(P>0.05)。

表1　CDDP化療方案治療老年NSCLC患者外周血淋巴細胞表型的變化 ± s)

與健康對照組比較：1)P<0.05;與本組治療前比較：2)P<0.05，下表同

表2　CDDP化療方案對不同類型NSCLC患者外周血淋巴細胞亞群影響 ± s，%)

3討論

培美曲塞是抑制新型多靶點抗葉酸藥物，作用于葉酸依賴性代謝途徑中的胸苷酸合成酶、二氫葉酸還原酶和甘氨酰胺核苷甲酰基轉移酶等，抑制嘌呤和嘧啶核苷酸合成，控制腫瘤細胞生長，具有高效、低毒等特點〔6,7〕，可用于治療老年NSCLC患者。

肺癌的發生、發展及轉歸與機體免疫功能狀態密切相關，研究發現，以T淋巴為主的細胞免疫對腫瘤細胞的防御和清除發揮著關鍵的作用，其比例失調與腫瘤的發生密切相關〔8,9〕。T細胞亞群中CD3+T淋巴細胞代表總成熟T細胞水平，其水平下降表示機體免疫功能低下；CD4+輔助性T細胞具有免疫調節作用，輔助B細胞產生抗體，其數量減少反映機體免疫反應誘導及效應不足，抗腫瘤能力下降〔10〕；CD8+T淋巴細胞又稱細胞毒性T淋巴細胞(TCL)，其活化后分泌可溶性抑制因子，從而抑制CD4+T細胞與B細胞功能，使腫瘤逃避免疫攻擊，與腫瘤的存在、發展及腫瘤宿主的免疫抑制狀態密切相關〔11〕；CD4+/CD8+比值動態平衡是維持機體細胞免疫功能穩定的重要基礎，比值降低可反映T細胞亞群失衡致機體免疫功能低下；CD16+56+為NK細胞的特異性標記，可直接殺傷腫瘤細胞或病毒感染的細胞，是抗腫瘤的第一道防線；CD19+是B淋巴細胞表型，負責機體的體液免疫〔12〕，因此，老年NSCLC患者外周血淋巴細胞亞群的變化可有效反映機體腫瘤免疫能力的變化。

本研究表明老年NSCLC患者體內T淋巴細胞亞群水平的改變以及NK細胞免疫功能的降低，與先前研究一致〔13〕，可能是導致機體異常細胞逃避宿主免疫監視并誘發腫瘤發生和發展的主要原因。然而，CODP化療后老年NSCLC患者機體免疫微環境得到明顯改善。

綜上所述，CODP化療方案能夠改善老年NSCLC患者T細胞亞群及NK細胞水平，對機體免疫微環境具有一定的優化作用。同時，可將外周血淋巴細胞亞群作為一項判斷老年NSCLC患者預后的指標，為老年患者化療藥物應用及治療效果提供參考價值。

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〔2013-09-19修回〕

(編輯曹夢園)