基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)探討血府逐瘀湯“異病同治”治療冠心病和缺血性腦卒中的作用機(jī)制

匡慧芳 李靜 郭志華 劉祎 王明韻 張秋雁

心腦血管疾病為中國(guó)城鄉(xiāng)居民的首要死亡原因,其患病率和死亡率仍居高不下[1]。研究表明冠心病(coronary heart disease,CHD)發(fā)展程度與缺血性腦卒中(ischemic stroke,IS)有密切關(guān)系,二者相互促進(jìn)病情發(fā)展,給臨床用藥造成了困擾。且患病后遺留不同程度的功能障礙,影響患者的生活質(zhì)量[2]。CHD和IS具有相似的致病因素,均與血壓水平、吸煙等常見(jiàn)危險(xiǎn)因素有關(guān),古代醫(yī)家認(rèn)為二者發(fā)病與外邪、痰飲、氣血虧虛、陽(yáng)氣不足而致病理因素瘀滯血脈關(guān)系密切[3]。

血府逐瘀湯是活血化瘀經(jīng)典名方,出自清代王清任《醫(yī)林改錯(cuò)》,由桃仁、紅花、當(dāng)歸、川芎、枳殼、柴胡等11味中藥組成,臨床上用于治療心腦血管等疾病,療效確切[4-7]。越來(lái)越多的證據(jù)支持神經(jīng)系統(tǒng)與心血管系統(tǒng)的生理、病理之間存在密切聯(lián)系,稱之為腦—心軸。現(xiàn)代研究顯示腦卒中所致心臟損傷(stroke induced heart injury,SIHI)其病理生理機(jī)制分為全身系統(tǒng)性和心臟局部性[8-10],同時(shí)二者在多個(gè)病理變化上十分相似,如動(dòng)脈粥樣硬化的形成、血流動(dòng)力學(xué)異常和炎癥反應(yīng)等過(guò)程。而血府逐瘀湯在保護(hù)血管內(nèi)皮、改善血液流變學(xué)特征、抗炎和抗氧化應(yīng)激等方面療效確切[11]。

基于中藥成分?jǐn)?shù)據(jù)庫(kù)、潛在靶標(biāo)預(yù)測(cè)技術(shù)、網(wǎng)絡(luò)分析平臺(tái)的網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究方法與中藥及其復(fù)方所發(fā)揮的藥效作用相符,有助于血府逐瘀湯“異病同治”治療CHD和IS的科學(xué)內(nèi)涵和分子機(jī)制的闡釋[12]。本研究探索血府逐瘀湯治療CHD和IS的活性成分、作用靶點(diǎn)及其參與的生物過(guò)程和信號(hào)通路,進(jìn)而構(gòu)建關(guān)聯(lián)網(wǎng)絡(luò),為闡釋血府逐瘀湯“異病同治”效果的科學(xué)內(nèi)涵和效應(yīng)機(jī)制提供了新思路和新方法,為血府逐瘀湯的臨床新應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 血府逐瘀湯藥物活性成分篩選與靶點(diǎn)獲取

在TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)(TCMSP,https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php)中檢索本方藥物組成,篩選血府逐瘀湯各藥物的活性成分(OB≥30%,DL≥0.18為條件)[13-14],基于上述候選成分獲取相應(yīng)靶標(biāo)。此外,對(duì)于未收錄的中藥結(jié)合相關(guān)文獻(xiàn)[15],對(duì)其中有明確生物活性及藥理作用的成分予以納入。經(jīng)Uniprot蛋白質(zhì)數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.uniprot.org)校正靶標(biāo)名稱。

1.2 疾病靶點(diǎn)的獲取

以“Coronary heart disease”和“Ischemic stroke”為關(guān)鍵詞分別在OMIM(https://omim.org)、GeneCards(https://www.genecards.org/)、DisGeNET(https://www.disgenet.org/)、TTD(http://metascape.org/gp)和DrugBank(https://go.drugbank.com)數(shù)據(jù)庫(kù)中獲取CHD和IS的疾病相關(guān)靶點(diǎn)。匯總并去重以上數(shù)據(jù)庫(kù)疾病靶點(diǎn),即為治療CHD和IS兩種疾病的潛在靶點(diǎn)。通過(guò)靶點(diǎn)可構(gòu)建疾病與活性成分關(guān)聯(lián)進(jìn)而建立與各藥材的關(guān)系。

1.3 復(fù)方網(wǎng)絡(luò)圖及PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及分析

在Cytoscape 3.7.1軟件中上傳血府逐瘀湯的中藥、有效成分及相應(yīng)靶點(diǎn),構(gòu)建“中藥—成分—靶點(diǎn)”復(fù)方網(wǎng)絡(luò)圖。將有效成分相應(yīng)靶點(diǎn)與疾病靶點(diǎn)的交集靶點(diǎn)導(dǎo)入STRING11.5數(shù)據(jù)庫(kù)(https://cn.string-db.org/),限定物種為“homo sapiens”,蛋白間相互作用(protein-protein interaction,PPI)≥0.4,下載PPI數(shù)據(jù),可得到關(guān)鍵靶點(diǎn)信息,并通過(guò)Cytoscape 3.7.1進(jìn)行可視化。

1.4 基因本體功能和基因組通路富集分析

采用Metascape(http://metascape.org)基因富集分析庫(kù)對(duì)“1.2”項(xiàng)交集靶點(diǎn)實(shí)現(xiàn)基因本體(Gene Ontology,GO)分析和京都基因與基因組百科全書(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)通路富集分析。設(shè)置物種為“H.sapiens”,最小交疊值為3,P<0.01,GO分析分別采用生物過(guò)程(biological process,BP)、細(xì)胞組成(cellular component,CC)、分子功能(molecular function,MF)結(jié)果的前10位,KEGG分析根據(jù)校正后P值大小對(duì)結(jié)果進(jìn)行排序,結(jié)果通過(guò)微生信網(wǎng)站(www.bioinformatics.com.cn)繪制BP、CC、MF三合一柱狀圖和KEGG氣泡圖。

1.5 分子對(duì)接

分別通過(guò)Pubchem數(shù)據(jù)庫(kù)(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/)和PDB數(shù)據(jù)庫(kù)(https://www.rcsb.org/)獲取活性成分的2D結(jié)構(gòu)的mol2格式文件及靶標(biāo)3D結(jié)構(gòu)的pdb格式文件,運(yùn)用AutoDockTools-1.5.6軟件進(jìn)行分子對(duì)接,通過(guò)比較結(jié)合能的大小分析化合物和靶點(diǎn)間的親和力,對(duì)接結(jié)果經(jīng)Pymol軟件可視化呈現(xiàn)。

2 結(jié)果

2.1 血府逐瘀湯“中藥—成分—靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖

通過(guò)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)篩選并檢索對(duì)應(yīng)靶蛋白,去除重復(fù)的活性成分后共獲得189種,包括桃仁23種、紅花22種、當(dāng)歸2種、牛膝4種、川芎7種、桔梗7種、赤芍29種、枳殼5種、柴胡17種、甘草92種,共有成分有11種,并結(jié)合文獻(xiàn)補(bǔ)充生地黃3個(gè)活性成分。通過(guò)Uniprot數(shù)據(jù)庫(kù)查找對(duì)應(yīng)靶蛋白名稱,去除重復(fù)和無(wú)效靶點(diǎn)后得到394個(gè)靶點(diǎn)蛋白。將血府逐瘀湯的組分、有效成分和預(yù)測(cè)靶標(biāo)導(dǎo)入Cytoscape 3.7.1軟件進(jìn)行可視化展示,構(gòu)建“中藥—成分—靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖,該網(wǎng)絡(luò)包括556節(jié)點(diǎn),2533條邊,見(jiàn)圖1。

注:淡綠色代表血府逐瘀湯中各味中藥;字母A1-J1代表兩味及以上中藥共有的化合物;深藍(lán)色代表血府逐瘀湯的潛在靶點(diǎn)。

2.2 血府逐瘀湯治療CHD和IS的共同靶點(diǎn)

檢索OMIM、DrugBank、DisGNET、TTD、GeneCards數(shù)據(jù)庫(kù),獲得CHD相關(guān)疾病靶點(diǎn)2719個(gè)、IS相關(guān)靶點(diǎn)2220個(gè)。將血府逐瘀湯中所預(yù)測(cè)的靶點(diǎn)和2種疾病的靶點(diǎn)分別輸入在線網(wǎng)站Venny 2.1.0(http://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/),得到135個(gè)交集靶點(diǎn)(圖2),導(dǎo)入Cytoscape 3.7.1構(gòu)建血府逐瘀湯治療CHD和IS的“單味藥—共有靶點(diǎn)—疾病”網(wǎng)絡(luò)(圖3)。通過(guò)對(duì)網(wǎng)絡(luò)進(jìn)行拓?fù)浞治?Degree值大小說(shuō)明該成分在網(wǎng)絡(luò)中的調(diào)控作用的強(qiáng)弱。將數(shù)據(jù)按Degree值降序排列并下載文件,結(jié)果表明,槲皮素、木犀草素、山柰酚等化合物可能是血府逐瘀湯治療CHD和IS的核心成分,具體信息見(jiàn)表1。

表1 血府逐瘀湯治療CHD和IS的成分中度值前10的活性化合物的相關(guān)信息

圖2 血府逐瘀湯治療CHD和IS的靶點(diǎn)交集韋恩圖

注:綠色代表兩種疾病;紅色部分:TR 桃仁;HH 紅花;DG 當(dāng)歸;DH 生地黃;NX 牛膝;CX 川芎;JG 桔梗;CS 赤芍;ZQ 枳殼;GC 甘草;CH 柴胡;藍(lán)色部分:疾病和藥物的相交靶點(diǎn)。

2.3 構(gòu)建共有靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)

利用STRING11.5構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò),見(jiàn)圖4、5。該網(wǎng)絡(luò)含135個(gè)節(jié)點(diǎn),2971條邊。節(jié)點(diǎn)代表靶點(diǎn),連線代表它們的交互作用,顏色深淺代表靶點(diǎn)度值大小。根據(jù)表2中網(wǎng)絡(luò)節(jié)點(diǎn)的度值、介數(shù)中心性和中心接近度參數(shù)綜合篩選排名靠前的核心靶點(diǎn),其中白蛋白(albumin,ALB)、白細(xì)胞介素(interleukin,IL)-6、腫瘤壞死因子(tumor necrosis factor,TNF)、RAC-絲氨酸/蘇氨酸-蛋白激酶(RAC-alpha serine/threonine-protein kinase,Akt1)、胰島素(insulin,INS)、白細(xì)胞介素-1β(interleukin-1,IL-1β)的度值最突出,提示以上靶點(diǎn)可能是血府逐瘀湯治療CHD和IS的核心靶點(diǎn)。

圖4 潛在靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)圖

圖5 關(guān)鍵靶點(diǎn)PPI網(wǎng)絡(luò)圖

2.4 GO功能和KEGG通路富集分析

設(shè)置P<0.01,GO分析獲得BP1851條、CC90條、MF148條。根據(jù)P值降序排列,分別選取排前10位條目見(jiàn)圖6。血府逐瘀湯治療CHD和IS所涉及的生物過(guò)程主要參與激素的反應(yīng)、對(duì)營(yíng)養(yǎng)水平的反應(yīng)、炎癥應(yīng)答等;主要分布于膜筏、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔囊泡腔、細(xì)胞外基質(zhì)等部位;與RNA聚合酶II特異性DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、信號(hào)受體調(diào)節(jié)劑的活性、蛋白酶結(jié)合等分子功能關(guān)聯(lián)性較大。

注:A KEGG通路富集;B BP生物過(guò)程、CC細(xì)胞組分、MF分子功能。

KEGG分析共富集199條信號(hào)通路(P<0.01),選取P值前20位通路見(jiàn)圖6。排除與本研究不相關(guān)通路(如癌癥通路、前列腺癌、阿米巴病等),血府逐瘀治療CHD和IS主要作用于脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化、低氧誘導(dǎo)因子-1(hypoxia inducible factor-1,HIF-1)、松弛素、核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)信號(hào)通路等。

2.5 分子對(duì)接結(jié)果

將從血府逐瘀湯中篩選出的7個(gè)質(zhì)量標(biāo)志物與5個(gè)靶點(diǎn)蛋白進(jìn)行分子對(duì)接,ALB、IL6、TNF、Akt1、INS作為受體,槲皮素、木犀草素、山柰酚、異鼠李素、柚皮素、川陳皮素、7-methoxy-2-methyl-3-phenylchromen-4-one作為配體,分子對(duì)接結(jié)果見(jiàn)表3、圖7。結(jié)合性較好的前五個(gè)分子對(duì)接結(jié)果見(jiàn)圖8。結(jié)合能<0,表明受體與配體能自發(fā)結(jié)合;結(jié)合能越小表明二者結(jié)合性越好,結(jié)合能<-5.0 kcal/mol,表明其結(jié)合良好[16]。

表3 活性成分—核心靶點(diǎn)對(duì)接結(jié)果結(jié)合能

注:橫軸為藥物核心成分,縱軸為預(yù)測(cè)核心靶點(diǎn)。顏色從藍(lán)到紅,表示結(jié)合能的數(shù)值大小由高到低。

圖8 血府逐瘀湯主要成分與核心靶點(diǎn)的分子對(duì)接圖

3 討論

血府逐瘀湯是臨床活血化瘀經(jīng)典名方,現(xiàn)代臨床研究表明,該方可治療多種神經(jīng)精神疾病和心血管疾病如血管性頭痛、腦梗死后輕度認(rèn)知障礙、CHD、慢性心力衰竭等。腦卒中屬于中醫(yī)“中風(fēng)”范疇,而“瘀”尤在缺血性中風(fēng)病的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮關(guān)鍵作用[17]。血瘀是多種疾病發(fā)展過(guò)程的關(guān)鍵環(huán)節(jié),王清任提出“治病之要訣,在明白氣血”,血府逐瘀湯重在調(diào)和氣血,體現(xiàn)其臨床重要價(jià)值。中醫(yī)對(duì)于“心與腦”的認(rèn)識(shí),如《醫(yī)學(xué)衷中參西錄》記載“人之神明,原在心與腦兩處,神明之功用,原心與腦相輔相成”“神明之體藏于腦,神明之用發(fā)于心”,體現(xiàn)“心腦相通”,這與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中“心腦軸”觀念不謀而合。心腦血管疾病在多個(gè)病理變化上近似,如動(dòng)脈粥樣硬化的形成、血流動(dòng)力學(xué)異常和炎癥反應(yīng)等過(guò)程。基于以上理論,本團(tuán)隊(duì)推測(cè)血府逐瘀湯能夠闡釋中醫(yī)理論“異病同治”的科學(xué)內(nèi)涵發(fā)揮對(duì)CHD和IS具有一定的治療作用。同時(shí)也運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接技術(shù)驗(yàn)證中藥復(fù)方治療疾病多靶點(diǎn)特色。

本研究發(fā)現(xiàn)血府逐瘀湯的不同藥味存在相同的活性成分,不同成分又存在與同一靶點(diǎn)產(chǎn)生聯(lián)系,充分展示了中藥復(fù)方具有整體觀念,具有“多成分、多靶點(diǎn)、多途徑和多效應(yīng)”的優(yōu)勢(shì),體現(xiàn)了在中醫(yī)“異病同治”理論的指導(dǎo)下,可以提高療效的同時(shí)減少患者的用藥頻次。本研究中血府逐瘀湯共有192種活性成分,發(fā)現(xiàn)Degree值較高的核心成分中,槲皮素是黃酮類化合物中具有強(qiáng)大的清除活性氧簇的能力,可以通過(guò)血腦屏障,其心血管保護(hù)作用與抗氧化功能密切相關(guān)。在炎癥早期,槲皮素不僅能下調(diào)中性粒細(xì)胞IL-6的表達(dá),調(diào)控NF-κB信號(hào)通路抑制凋亡和乙酰膽堿酯酶,減輕新生大鼠缺氧缺血性腦損傷和順鉑對(duì)H9C2細(xì)胞的細(xì)胞毒作用,還能誘導(dǎo)神經(jīng)保護(hù)發(fā)揮保護(hù)血管內(nèi)皮功能的作用和抗炎作用[18-21]。木犀草素是一種天然多酚,在抗炎、抗氧化、抗癌、細(xì)胞保護(hù)和巨噬細(xì)胞極化等方面具有生物活性。對(duì)IS模型大鼠的研究發(fā)現(xiàn)木犀草素不僅能通過(guò)抑制小膠質(zhì)細(xì)胞和星形膠質(zhì)細(xì)胞的激活,還能抑制HIF-1α/NLRP3信號(hào)通路,從減輕神經(jīng)細(xì)胞凋亡、炎癥和氧化應(yīng)激程度等方面減輕認(rèn)知障礙[22-23]。山柰酚不僅能調(diào)控NF-κB經(jīng)典促炎信號(hào)通路促進(jìn)抗凋亡蛋白的表達(dá),抑制缺血性腦神經(jīng)元死亡和神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞活化,降低大鼠外周血和大腦中中性粒細(xì)胞的激活和數(shù)量,還能正常化卵巢切除術(shù)+高脂飲食誘導(dǎo)的載脂蛋白E(APOE)-/-模型小鼠的血管形態(tài)和脂質(zhì)水平,并顯著抑制氧化應(yīng)激、炎癥和凋亡水平,從而減輕動(dòng)脈粥樣硬化[24-25]。CHD和IS的發(fā)病與動(dòng)脈粥樣硬化有關(guān),其發(fā)生發(fā)展伴隨著脂質(zhì)堆積、血管內(nèi)皮損傷、氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)、細(xì)胞凋亡等病理過(guò)程[26-27],通過(guò)研究該方主要活性成分的現(xiàn)代藥理作用,可知血府逐瘀湯可以通過(guò)炎癥因子的釋放、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡、減輕氧化應(yīng)激、保護(hù)血管內(nèi)皮功能、降低脂質(zhì)水平等方式,從而實(shí)現(xiàn)相應(yīng)的治療作用,與CHD和IS的發(fā)病機(jī)制相符。

分析核心靶點(diǎn)和血府逐瘀湯主要活性成分的對(duì)接結(jié)果,在所有的關(guān)鍵靶點(diǎn)蛋白中,Akt1與潛在活性成分7-methoxy-2-methyl-3-phenylchromen-4-one之間的結(jié)合能力最強(qiáng),其結(jié)合能為-6.88 kcal/mol。分子虛擬對(duì)接的結(jié)果表明血府逐瘀湯潛在活性成分與關(guān)鍵靶點(diǎn)之間的結(jié)合性均較好,可以通過(guò)相互作用而發(fā)揮血府逐瘀湯異病同治CHD和IS的功效。推測(cè)本方活性成分可能通過(guò)調(diào)控炎癥應(yīng)答、細(xì)胞對(duì)脂質(zhì)的反應(yīng)、對(duì)氧水平的反應(yīng)、對(duì)細(xì)胞群增殖的負(fù)調(diào)控作用等過(guò)程抑制細(xì)胞炎癥、調(diào)節(jié)脂質(zhì)水平、抑制細(xì)胞凋亡。通過(guò)構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)圖可知血府逐瘀湯治療CHD和IS主要作用于ALB、IL-6、TNF、Akt1、INS等靶點(diǎn),提示為關(guān)鍵性靶蛋白,它們大多與炎癥因子相關(guān),與二者的共同病理過(guò)程中炎癥因子釋放相吻合。ALB作為本方Degree值最高的潛在靶點(diǎn)在許多生物過(guò)程中起著重要作用。ALB屬于脂代謝途徑相關(guān)的蛋白質(zhì)與改善血液流變性有關(guān),研究發(fā)現(xiàn)低蛋白血癥、炎癥及內(nèi)皮損傷和動(dòng)脈粥樣硬化性疾病密切相關(guān),并觀察包括ALB在內(nèi)的蛋白質(zhì)的特異性變化,能提高對(duì)不同類型動(dòng)脈粥樣硬化患者的診斷準(zhǔn)確性[28-30]。對(duì)一項(xiàng)多中心、隨機(jī)、盲法對(duì)照的臨床研究發(fā)現(xiàn)IS發(fā)病5小時(shí)內(nèi)給予患者靜脈注射25%人白蛋白(ALB)2 g/kg,存在良好地改善臨床療效的趨勢(shì)[31]。KEGG通路富集發(fā)現(xiàn)血府逐瘀湯異病同治CHD和IS相關(guān)通路有脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化、HIF-1、松弛素、NF-κB和胰島素抵抗等信號(hào)通路。脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化是二者共同的病理基礎(chǔ),在此不作贅述。HIF-1是一種敏感的氧穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)因子,在缺氧/缺血情況下會(huì)迅速表達(dá)。HIF-1信號(hào)通路與冠狀動(dòng)脈易損斑塊的不穩(wěn)定性有關(guān),具有保護(hù)缺血缺氧的心肌細(xì)胞、抗氧化應(yīng)激損傷、調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡、線粒體功能和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表達(dá)影響血管新生的作用;還能調(diào)節(jié)神經(jīng)炎癥、血管生成、糖代謝和血腦屏障干預(yù)腦卒中的病理變化[32-33]。松弛素信號(hào)通路在心腦血管疾病的生理病理起著關(guān)鍵作用,研究證明松弛素促進(jìn)血管舒張及血管生成,改善缺血/再灌注引起的心臟損傷心臟肥大和并逆轉(zhuǎn)心肌梗死后的纖維化[34-36];臨床研究表明腦缺血后6小時(shí)給予人類基因-2(H2)-松弛素具有抗炎和抗細(xì)胞凋亡作用[37]。當(dāng)機(jī)體發(fā)生胰島素抵抗時(shí),游離脂肪酸水平升高促進(jìn)活性氧簇升高引起氧化應(yīng)激和內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激,進(jìn)而刺激脂肪組織合成和分泌大量促炎細(xì)胞因子、急性期反應(yīng)物、血管緊張素Ⅱ等生物活性物質(zhì);脂肪組織會(huì)激活典型的促炎性NF-κB通路[38-39]。發(fā)生腦缺血再灌注時(shí),NF-κB信號(hào)通路被激活并釋放大量TNF-α等炎性因子造成腦神經(jīng)元損傷和神經(jīng)炎癥反應(yīng),經(jīng)中藥干預(yù)能減輕病灶炎癥發(fā)揮對(duì)腦組織的保護(hù)作用[40-41]。以上機(jī)制都有助于內(nèi)皮功能障礙、動(dòng)脈粥樣硬化和血栓形成,參與心腦血管疾病的形成。

綜上所述,本研究通過(guò)網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合分子對(duì)接技術(shù),探索血府逐瘀湯“異病同治”治療CHD和IS多途徑、多成分、多靶點(diǎn)發(fā)揮藥效的特點(diǎn)。證實(shí)了血府逐瘀湯活性物質(zhì)與CHD和IS的核心治療靶點(diǎn)具有較強(qiáng)的結(jié)合力,其中槲皮素、木犀草素、山柰酚等為主要活性成分,通過(guò)ALB、IL-6、TNF、Akt1、INS等關(guān)鍵靶點(diǎn),干預(yù)脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化、HIF-1、松弛素、NF-κB和胰島素抵抗信號(hào)通路等關(guān)鍵生物過(guò)程,實(shí)現(xiàn)對(duì)機(jī)體的炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激及血管新生和血管功能障礙、細(xì)胞的凋亡和脂質(zhì)代謝等產(chǎn)生影響,調(diào)節(jié)細(xì)胞炎癥反應(yīng)的進(jìn)展,改善局部血液流變學(xué),以實(shí)現(xiàn)對(duì)CHD和IS治療效果。結(jié)合上面的分析結(jié)果,下一步可圍繞血府逐瘀湯對(duì)于HIF-1、松弛素、NF-κB及胰島素抵抗等信號(hào)通路的作用及本方對(duì)脂質(zhì)代謝和胰島素抵抗等病理機(jī)制展開進(jìn)一步研究。本研究為血府逐瘀湯的新的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù),在治療CHD和IS的新藥研制方面提供新思路和新方法。但本研究的結(jié)果和結(jié)論受到數(shù)據(jù)庫(kù)信息不全、疾病靶點(diǎn)尚未得到徹底研究等方面的限制,篩選和預(yù)測(cè)的結(jié)果均存在一定的偏倚,仍需要通過(guò)進(jìn)一步的臨床和實(shí)驗(yàn)研究加以驗(yàn)證。