miR-181b和lncRNA MIAT對高血壓腎病的診斷價值

[摘要] 目的 分析血清miR-181b、長鏈非編碼RNA（long noncoding RNA，lncRNA）心肌梗死相關轉錄本（myocardial infarction association transcript，MIAT）對高血壓腎病的診斷價值。方法 選取2022年10月至2024年10月金華市人民醫院收治的原發性高血壓患者120例為研究對象，根據尿白蛋白與肌酐比值將其分為高血壓腎病組（68例）和單純高血壓組（52例），另選取同期60例健康體檢者為對照組。比較各組血清miR-181b、lncRNA MIAT、超敏C反應蛋白（hypersensitive C-reaction protein，hs-CRP）、腫瘤壞死因子-α（tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白細胞介素（interleukin，IL）-6。結果 三組受試者的hs-CRP、TNF-α、IL-6、miR-181b、lncRNA MIAT比較差異均有統計學意義（Plt;0.05），其中hs-CRP、TNF-α、IL-6、lncRNA MIAT水平高血壓腎病組gt;單純高血壓組gt;對照組，miR-181b水平高血壓腎病組lt;單純高血壓組lt;對照組。Pearson相關分析結果顯示高血壓腎病患者的血清miR-181b表達與lncRNA MIAT、hs-CRP、TNF-α、IL-6水平呈負相關（Plt;0.05），而lncRNA MIAT表達與hs-CRP、TNF-α、IL-6水平呈正相關（Plt;0.05）。受試者操作特征曲線評估miR-181b、lncRNA MIAT診斷高血壓腎病的敏感度分別為97.1%、73.5%，特異性分別為68.7%、92.1%，曲線下面積分別為0.819、0.951。結論 miR-181b、lncRNA MIAT在高血壓腎病患者血清中異常表達，有望成為高血壓腎病早期診斷的潛在標志物。

[關鍵詞] 原發性高血壓；高血壓腎??；miR-181b；lncRNA MIAT

[中圖分類號] R544.14" """"[文獻標識碼] A """""[DOI] 10.3969/j.issn.1673-9701.2025.19.007

The diagnostic value of serum miR-181b and lncRNA MIAT in hypertensive nephropathy

CHEN Yun¹， LI Chao²

1.Department of Nephrology， Jinhua People’s Hospital， Jinhua 321002， Zhejiang， China; 2.Department of Cardiovascular Medicine， Jinhua People’s Hospital， Jinhua 321002， Zhejiang， China

[Abstract] Objective To analyze the diagnostic value of serum miR-181b and long noncoding RNA （lncRNA） myocardial infarction association transcript （MIAT） for hypertensive nephropathy. Methods A total of 120 patients with essential hypertension admitted to Jinhua People’s Hospital from October 2022 to October 2024 were selected as research subjects. According to urinealbumin-to-creatinine ratio， they were divided into hypertensive nephropathy group （68 cases） and simple hypertension group （52 cases）， and another 60 healthy individuals undergoing physical examinations during the same period were selected as control group. The serum miR-181b， lncRNA MIAT， hypersensitive C-reaction protein （hs-CRP）， tumor necrosis factor-α （TNF-α） and interleukin-6 （IL-6） in each group were compared. Results There were statistically significant differences in hs-CRP， TNF-α， IL-6， miR-181b and lncRNA MIAT among three groups （Plt;0.05）. Among them， the levels of hs-CRP， TNF-α， IL-6 and lncRNA MIAT in hypertensive nephropathy group gt; simple hypertension group gt; control group， and miR-181b level was in hypertensive nephropathy group lt; simple hypertension group lt; control group. The results of Pearson correlation analysis showed that expression of serum miR-181b in patients with hypertensive nephropathy was negatively correlated with the levels of lncRNA MIAT， hs-CRP， TNF-α， and IL-6 （Plt;0.05）， while expression of lncRNA MIAT was positively correlated with the levels of hs-CRP， TNF-α， and IL-6 （Plt;0.05）. The sensitivity of miR-181b and lncRNA MIAT in the diagnosis of hypertensive nephropathy evaluated by receiver operating characteristic curve was 97.1% and 73.5% respectively， the specificity was 68.7% and 92.1% respectively， and area under the curve were 0.819 and 0.951 respectively. Conclusion miR-181b and lncRNA MIAT are abnormally expressed in the serum of patients with hypertensive nephropathy and are expected to become potential markers for early diagnosis of hypertensive nephropathy.

[Key words] Essential hypertension; Hypertensive nephropathy; MiR-181b; LncRNA MIAT

高血壓腎病是原發性高血壓（essential hypertension，EH）的并發癥之一，因腎小動脈硬化可引起夜尿增多、輕–中度蛋白尿及不同程度的腎功能損害^[1]。中國腎臟疾病網絡2016年數據證實，高血壓腎病居慢性腎臟病住院患者病因的第二位，且有高血壓腎損害的慢性腎臟病患者并發心血管疾病的風險更高^[2]。因此，尋找一種簡單、易行的血清指標對高血壓腎病進行早期診斷和預后評估具有重大臨床價值。研究證實微RNA（microRNA，miRNA）、長鏈非編碼RNA（long noncoding RNA，lncRNA）參與EH的發生發展過程^[3-4]。miR–181b可下調組織金屬蛋白酶抑制劑-3、轉化生長因子-β等細胞因子的表達，抑制炎癥反應，負向調節EH的發生發展^[5]。lncRNA心肌梗死相關轉錄本（myocardial infarction association transcript，MIAT）在EH患者血清中高表達，且其表達水平與EH預后呈負相關，通過上調血管緊張素轉化酶基因表達或干預腎素–血管緊張素–醛固酮系統等機制影響EH進程^[6]。本研究旨在探討血清miR–181b、lncRNA MIAT在高血壓腎病患者中的表達變化及臨床意義。

１" 資料與方法

1.1" 一般資料

選取2022年10月至2024年10月金華市人民醫院收治的EH患者120例為研究對象。納入標準：①符合《中國高血壓防治指南（2018年修訂版）》EH的診斷標準^[7]；②年齡18～75歲；③依從性良好，定期隨訪并能配合完成相關指標檢測。排除標準："" ①繼發性高血壓；②原發性腎小球疾病及其他繼發性腎小球疾?。虎郯橛卸嗯K器功能不全等。高血壓腎病判定標準：在EH基礎上尿白蛋白與肌酐比值（urinealbumin-to-creatinine ratio，UACR）gt;30mg/g為陽性^[8]。根據UACR將EH患者分為高血壓腎病組（68例）和單純高血壓組（52例）；另選取同期于本院健康體檢者60例為對照組。高血壓腎病組男43例，女25例，年齡42～60歲，平均（52.82±7.52）歲；單純高血壓組男32例，女20例，年齡39～58歲，平均（51.75±7.58）歲；對照組男36例，女24例，年齡40～60歲，平均（50.28±7.34）歲。三組研究對象的年齡、性別、體質量指數、吸煙史等一般資料比較差異均無統計學意義（Pgt;0.05）。本研究經金華市人民醫院倫理委員會批準（倫理審批號：2025研第017號），入選者均簽署知情同意書。

1.2" 方法

1.2.1" UACR" 受試者取隨機尿液或清晨第一次尿液送檢，UACR 30～300mg/g提示尿中有微量白蛋白，≥300mg/g為臨床蛋白尿。

1.2.2" 血清miR–181b、lncRNA MIAT檢測" 受試者清晨抽取肘靜脈血10ml，置于EDTA抗凝試管中，4℃ 3000轉/min離心15min，分離血清置于EP管，并保存于–80℃冰箱備用。以實時熒光定量聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）檢測miR–181b、lncRNA MIAT相對表達量，TRIzol試劑盒提取血清中的總RNA，反轉錄為互補DNA，根據試劑盒說明書設定反應體系及反應條件，采用ABI Prism? 7500型熒光定量PCR儀檢測miR–181b、lncRNA MIAT的Ct值，遵循試劑盒說明書進行操作，配制反應物條件，引物序列見表１，U６和GAPDH作為內參，通過2^－△△Ct計算miR-181b、lncRNA MIAT相對表達強度。

1.2.3" 血清炎癥因子檢測" 抽取受試者清晨空腹靜脈血5ml，3000轉/min離心15min，取上層血清分裝于EP管，置入–80℃冰箱保存待用。采用全自動生化分析儀檢測血清總膽固醇（total cholesterol，TC）、低密度脂蛋白膽固醇（low density lipoprotein cholesterol，LDL–C）、高密度脂蛋白膽固醇（high density lipoprotein cholesterol，HDL–C）、甘油三酯（triglyceride，TG）、尿酸（uric acid，UA）、空腹血糖（fasting plasma glucose，FPG）水平；采用化學發光法測定同型半胱氨酸（homocysteine，Hcy）濃度；采用離子交換高壓液相色譜測定糖化血紅蛋白（glycosylated hemoglobin，HbA1c）；采用免疫比濁法測定超敏C反應蛋白（hypersensitive C-reaction protein，hs–CRP）；采用酶聯免疫吸附測定法檢測血清腫瘤壞死因子–α（tumor necrosis factor–α，TNF–α）、白細胞介素（interleukin，IL）–6表達。操作按相關試劑盒說明書進行。

1.3" 統計學方法

采用SPSS 27.0統計學軟件對數據進行分析處理。符合正態分布的計量資料以均數±標準差（"）表示，多組間比較采用單因素方差分析，組間兩兩比較采用SNK-q檢驗；計數資料以例數（百分率）[n（%）]表示，組間比較采用χ²檢驗；采用Pearson法進行相關性分析；建立受試者操作特征曲線（receiver operating characteristic curve，ROC曲線）評估預測能力。Plt;0.05為差異有統計學意義。

2" 結果

2.1" 三組受試者的實驗室指標比較

三組受試者的hs–CRP、TNF–α、IL–6比較差異均有統計學意義（Plt;0.05），且上述指標水平高血壓腎病組gt;單純高血壓組gt;對照組。三組受試者的Hcy、TC、LDL–C、HDL–C、TG、UA、FPG、HbA1c比較差異均無統計學意義（Pgt;0.05），見表2。

2.2" 三組受試者的血清miR-181b、lncRNA MIAT表達水平比較

三組受試者的血清miR–181b、lncRNA MIAT表達水平比較差異均有統計學意義（Plt;0.05），且miR–181b表達水平高血壓腎病組lt;單純高血壓組lt;對照組，lncRNA MIAT表達水平高血壓腎病組gt;單純高血壓組gt;對照組，見表3。

2.3" 高血壓腎病患者的血清miR-181b、lncRNA MIAT與炎癥因子的相關性分析

Pearson相關分析表明，高血壓腎病患者的血清miR–181b表達與hs–CRP、TNF–α、IL–6水平均呈負相關（Plt;0.05），lncRNA MIAT表達與hs–CRP、TNF–α、IL–6水平均呈正相關（Plt;0.05），見表4。

2.4" 高血壓腎病患者的血清miR-181b與lncRNA MIAT表達的相關性分析

Pearson相關分析表明，高血壓腎病患者的血清miR–181b與lncRNA MIAT表達呈負相關（r= –0.509，Plt;0.05）。

2.5" miR-181b、lncRNA MIAT對高血壓腎病患者的預測價值

血清miR–181b診斷高血壓腎病的曲線下面積（area under the curve，AUC）為0.819（95%CI：0.756～0.882，Plt;0.05），敏感度為97.1%，特異性為68.7%，最佳截斷值為0.525；血清lncRNA MIAT診斷高血壓腎病的AUC為0.951（95%CI：0.923～0.978，Plt;0.05），敏感度為73.5%，特異性為92.1%，最佳截斷值為12.65，見圖1。

3" 討論

EH的發病率及致殘率居高不下，2019年中國成人高血壓患病人群2.45億，患病率達23.2%，且呈現年輕化趨勢，嚴重危害居民身心健康^[9]。高血壓腎病是EH患者靶器官損害的表現之一，但其發病隱匿，病變緩慢進展，多數直到腎衰竭才被確診。若能早期發現并積極干預，則對控制病情進展、改善高血壓腎病患者預后有積極作用^[10]。既往多將UACR、血肌酐作為診斷高血壓腎病的必要條件，但腎臟代償功能強，輕微損傷時上述指標陽性檢出率低。目前，非編碼RNA（non-coding RNA，ncRNA）在EH中的潛在應用價值已引起學者們的關注，涉及早期診斷、臨床治療及預后評估等方面^[11]。本研究檢測miR–181b、lncRNA MIAT在EH人群中的表達差異，分析其表達水平與高血壓腎病的關系，評估其作為判斷高血壓腎病生物標志物的潛在可能性。

miR–181b通過靶向高遷移率族蛋白B1的分泌，抑制血管平滑肌細胞由收縮型向分泌型轉化，最終降低血壓^[12]。Takashima等^[13]研究表明miR–181b可調控細胞凋亡，影響腎臟疾病嚴重程度。lncRNA MIAT是介導內皮細胞功能的關鍵因子，扮演競爭性內源RNA，與miR–150和血管內皮生長因子形成反饋環，參與動脈粥樣硬化的發生發展^[14]。Ji等^[15]研究發現lncRNA MIAT在糖尿病腎病患者腎活檢組織中過表達，能靶向調控miR–147a/E2F3信號通路，繼而誘導系膜細胞增殖和纖維化。本研究結果表明，單純高血壓組患者血清lncRNA MIAT表達水平上調，miR–181b表達水平下調，高血壓腎病患者的血清miR–181b、lncRNA MIAT表達變化更加顯著，證實miR–181b、lncRNA MIAT與高血壓腎病顯著相關。同時ROC曲線分析顯示血清miR–181b診斷高血壓腎病的AUC為0.819，敏感度為97.1%，特異性為68.7%；血清lncRNA MIAT診斷高血壓腎病的AUC為0.951，敏感度為73.5%，特異性為92.1%，說明miR–181b、lncRNA MIAT均可作為高血壓腎病診斷的潛在生物標志物。

高血壓腎病是一種慢性炎癥性疾病，炎癥因子在其發生、發展、轉歸過程中均起到關鍵作用。hs–CRP、IL–6、TNF–α通過損害血管內皮功能，刺激血管平滑肌增生，引起腎臟血管壁硬化及管腔狹窄，最終介導高血壓腎病發展^[16]。研究證實miR–181b與lncRNA MIAT均可介導炎癥因子參與炎癥反應，lncRNA MIAT充當miR–181b的海綿分子^[17]。本研究顯示單純高血壓組患者血清hs–CRP、IL–6、TNF–α水平升高，且高血壓腎病組患者升高更加顯著，這與上述研究結果一致。深入分析發現，lncRNA MIAT表達與hs–CRP、IL–6、TNF–α水平呈正相關，而miR–181b表達與hs–CRP、IL–6、TNF–α水平呈負相關，此外，lncRNA MIAT表達與miR–181b呈負相關。近期研究發現，敲除lncRNA MIAT可通過核因子κB（nuclear factor κB，NF–κB）途徑發揮抗炎作用，反向證實lncRNA MIAT在動脈粥樣硬化中具有促炎效應^[18]；而miR–181b可直接調節NF–κB，抑制IL–6、IL–8、TNF–α等炎癥因子表達，說明lncRNA MIAT可能通過lncRNA MIAT/miR–181b/NF–κB通路聯合炎癥反應過程參與冠心病的發病機制^[19]。因此，筆者推測lncRNA MIAT可能通過下調miR–181b水平，影響hs–CRP、IL–6、TNF–α分泌，參與調控高血壓腎病的發病機制。

綜上，miR–181b、lncRNA MIAT在高血壓腎病患者血清中異常表達，通過上調hs–CRP、IL–6、TNF–α水平參與高血壓腎病進程，miR–181b、lncRNA MIAT有望成為其早期診斷的生物標志物。

利益沖突：所有作者均聲明不存在利益沖突。

[參考文獻]

[1]"" 中國高血壓防治指南修訂委員會， 高血壓聯盟（中國）， 中國醫療保健國際交流促進會高血壓分會， 等. 中國高血壓防治指南（2024年修訂版）[J]. 中華高血壓雜志， 2024， 32（7）： 603–700.

[2]"" YANG C， GAO B， ZHAO X， et al. Executive summary for China Kidney Disease Network （CK-NET） 2016 annual data report[J]. Kidney Int， 2020， 98（6）： 1419–1423.

[3]"" ARISHE O O， PRIVIERO F， WILCZYNSKI S A， et al. Exosomes as intercellular messengers in hypertension[J]. Int J Mol Sci， 2021， 22（21）： 11685.

[4]"" LIN K H， KUMAR V B， SHANMUGAM T， et al. miR-145-5p targets paxillin to attenuate angiotensin ""Ⅱ-induced pathological cardiac hypertrophy via downre- gulation of Rac 1， pJNK， p-c-Jun， NFATc3， ANP and by Sirt-1 upregulation[J]. Mol Cell Biochem， 2021， 476（9）： 3253–3260.

[5]"" GAO Z， WANG L， WANG J， et al. Molecular mechanism of miR-181b in heart disease due to pregnancy-induced hypertension syndrome[J]. Exp Ther Med， 2017， 14（4）： 2953–2959.

[6]"" PEREIRA DA SILVA A， MATOS A， AGUIAR L， et al. Hypertension and longevity： Role of genetic polymorphisms in renin-angiotensin-aldosterone system and endothelial nitric oxide synthase[J]. Mol Cell Biochem， 2019， 455（1-2）： 61–71.

[7]"" 中國高血壓防治指南修訂委員會， 高血壓聯盟（中國）， 中華醫學會心血管病學分會中國醫師協會高血壓專業委員會， 等. 中國高血壓防治指南（2018年修訂版）[J]. 中國心血管雜志， 2019， 24（1）： 24–56.

[8]"" 高血壓腎病診治中國專家共識組成員. 高血壓腎病診斷和治療中國專家共識（2022）[J]. 中華高血壓雜志， 2022， 30（4）： 307–317.

[9]"" NCD Risk Factor Collaboration （NCD-RisC）. Worldwide trends in hypertension prevalence and progress in treatment and control from 1990 to 2019： A pooled analysis of ""1201 population-representative studies with 104 million participants[J]. Lancet， 2021， 398（10304）： 957–980.

[10] YANG X， ZHOU B， ZHOU L， et al. Development and validation of prediction models for hypertensive nephropathy， the PANDORA study[J]. Front Cardiovasc Med， 2022， 9： 794768.

[11] AMODIO N， STAMATO M A， JULI G， et al. Drugging the lncRNA MALAT1 via LNA gapmeR ASO inhibits gene expression of proteasome subunits and triggers anti-multiple myeloma activity[J]. Leukemia， 2018， 32（9）： 1948–1957.

[12] LI F J， ZHANG C L， LUO X J， et al. Involvement of "the MiR-181b-5p/HMGB1 pathway in Ang Ⅱ-induced phenotypic transformation of smooth muscle cells in hypertension[J]. Aging Dis， 2019， 10（2）： 231–248.

[13] TAKASHIMA Y， KAWAGUCHI A， IWADATE Y， et al. MicroRNA signature constituted of miR-30d， miR-93， and miR-181b is a promising prognostic marker in primary central nervous system lymphoma[J]. PLoS One， 2019， 14（1）： e0210400.

[14] YAN B， YAO J， LIU J Y， et al. lncRNA-MIAT regulates microvascular dysfunction by functioning as a competing endogenous RNA[J]. Circ Res， 2015， 116（7）： 1143–1156.

[15] JI T T， QI Y H， LI X Y， et al. Loss of lncRNA MIAT ameliorates proliferation and fibrosis of diabetic nephropathy through reducing E2F3 expression[J]. J Cell Mol Med， 2020， 24（22）： 13314–13323.

[16] 洪武漢， 李枝錦， 李娥. 腎炎康復片聯合厄貝沙坦治療老年高血壓腎病療效及對患者腎功能、Cys-C、RBP、NGAL和炎癥因子的影響[J]. 中國老年學雜志， 2022， 42（9）： 2181–2183.

[17] PAN J X. LncRNA H19 promotes atherosclerosis by regulating MAPK and NF-kB signaling pathway[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci， 2017， 21（2）： 322–328.

[18] LI X， ZHOU J， HUANG K. Inhibition of the lncRNA mirt1 attenuates acute myocardial infarction by suppressing NF-κB activation[J]. Cell Physiol Biochem， 2017， 42（3）： 1153–1164.

[19] 吳迪. 長鏈非編碼 RNA-MIAT 及微小 RNA-181b 在急性冠脈綜合征患者血漿中變化水平的研究[D]. 長春： 吉林大學， 2020.

（收稿日期：2025–02–06）

（修回日期：2025–06–17）

通信作者：李超，電子信箱：303334361@qq.com